本文關(guān)鍵詞：結(jié)核分枝桿菌對RAW264.7細(xì)胞和THP-1細(xì)胞凋亡及細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄水平的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：肺結(jié)核是第一個世界衛(wèi)生組織發(fā)布的可致死全球性疾病。據(jù)統(tǒng)計,全球每年有800萬例新發(fā)病例,并有高達(dá)兩百萬的死亡病例。近些年來由于部分耐藥結(jié)核分枝桿菌株的出現(xiàn)和人類免疫缺陷病疫情擴(kuò)大,使結(jié)核病的防治面臨新型重大威脅。因此,為更好的診斷、預(yù)防和治療結(jié)核病,我們需要加強(qiáng)結(jié)核病基礎(chǔ)研究和應(yīng)用研究。為探討結(jié)核分枝桿菌感染巨噬細(xì)胞后不同時間點細(xì)胞凋亡情況與其分泌的幾種主要細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄與表達(dá)之間的關(guān)系,建立THP-1細(xì)胞和RAW264.7細(xì)胞體外巨噬細(xì)胞模型。分別用結(jié)核分枝桿菌強(qiáng)毒株H37Rv、疫苗株BCG和從鹿源分離的牛型結(jié)核分枝桿菌中等毒力菌株M-8感染細(xì)胞,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測巨噬細(xì)胞在六個時間點的凋亡情況,應(yīng)用Griess法檢測巨噬細(xì)胞在六個時間點NO分泌情況,應(yīng)用cck-8法檢測感染后細(xì)胞增殖情況,應(yīng)用熒光定量PCR檢測細(xì)胞因子TNF-α、IL-10、IL-6的轉(zhuǎn)錄水平,應(yīng)用ELISA方法檢測細(xì)胞上清液中三種細(xì)胞因子的分泌量。結(jié)果顯示:各感染組細(xì)胞凋亡情況、NO分泌量和細(xì)胞增殖情況與對照組相比均差異顯著(P0.05)。兩種細(xì)胞各感染組NO分泌量均呈上升趨勢,細(xì)胞凋亡情況和細(xì)胞增值情況變化比較復(fù)雜。各時間點細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄情況和分泌量趨勢基本相同。RAW264.7細(xì)胞凋亡情況和細(xì)胞因子分泌情況變化并未見明顯規(guī)律。對THP-1細(xì)胞,可看出BCG感染組凋亡情況隨時間變化呈上升趨勢,其分泌的細(xì)胞因子TNF-α表現(xiàn)為相同趨勢,IL-6表現(xiàn)為相反趨勢。H37Rv感染組細(xì)胞凋亡情況低于BCG感染組,細(xì)胞因子分泌情況一般表現(xiàn)為先增強(qiáng)后抑制。通過對兩種巨噬細(xì)胞凋亡結(jié)果分析表明,THP-1細(xì)胞更適合用于結(jié)核分枝桿菌免疫機(jī)制實驗。結(jié)核分枝桿菌對巨噬細(xì)胞凋亡的機(jī)制是一個復(fù)雜的過程,但與感染后細(xì)胞因子分泌情況密不可分。感染后12 h-24 h時間段往往是結(jié)核分枝桿菌發(fā)揮逃逸作用的關(guān)鍵時期。本試驗通過對結(jié)核分枝桿菌感染巨噬細(xì)胞后不同時間點細(xì)胞因子與凋亡情況關(guān)系的研究,為結(jié)核分枝桿菌對巨噬細(xì)胞凋亡機(jī)制提供新思路。
【關(guān)鍵詞】：結(jié)核分枝桿菌 THP-1細(xì)胞 RAW264.7細(xì)胞 凋亡 細(xì)胞因子
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R378.911
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-7
• 前言7-8
• 第一篇 文獻(xiàn)綜述8-18
• 第一章 結(jié)核病概述8-11
• 1.1 病原學(xué)8-9
• 1.2 臨床癥狀9
• 1.3 傳播途徑9
• 1.4 流行情況9-11
• 第二章 巨噬細(xì)胞免疫策略11-14
• 2.1 巨噬細(xì)胞概述11
• 2.2 巨噬細(xì)胞生物學(xué)功能11-12
• 2.3 巨噬細(xì)胞對結(jié)核分枝桿菌免疫策略12-14
• 第三章 結(jié)核分支桿菌免疫逃逸14-18
• 3.1 抑制吞噬體-溶酶體的融合14
• 3.2 抵抗活性氮中間體(RNI)和活性氧自由基(ROI)14-15
• 3.3 抑制MHC分子的加工與遞呈15-16
• 3.4 不同毒力結(jié)核分枝桿菌對巨噬細(xì)胞免疫的影響16-18
• 第二篇 研究內(nèi)容18-42
• 第一章 結(jié)核分枝桿菌對RAW264.7 細(xì)胞凋亡及細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄水平的影響18-32
• 1.1 材料18-19
• 1.2 方法19-23
• 1.3 結(jié)果23-29
• 1.4 討論29-31
• 1.5 小結(jié)31-32
• 第二章 結(jié)核分枝桿菌對THP-1 細(xì)胞凋亡及細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄水平的影響32-42
• 2.1 材料32
• 2.2 方法32-34
• 2.3 結(jié)果34-40
• 2.4 討論40-41
• 2.5 小結(jié)41-42
• 結(jié)論42-43
• 參考文獻(xiàn)43-49
• 作者簡介49-50
• 致謝50

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 魏熙胤;牛瑞芳;;流式細(xì)胞儀的發(fā)展歷史及其原理和應(yīng)用進(jìn)展[J];現(xiàn)代儀器;2006年04期

  本文關(guān)鍵詞：結(jié)核分枝桿菌對RAW264.7細(xì)胞和THP-1細(xì)胞凋亡及細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄水平的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：314601