本文關鍵詞：小鼠梗阻性黃疸及膽汁內(nèi)外引流動物模型的建立及各組肝臟組織中膽汁酸受體TGR5的表達研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景及目的：黃疸是臨床上常見的體征之一,梗黃發(fā)生時可通過引起機體的內(nèi)環(huán)境變化導致機體免疫狀態(tài)改變,腸道免疫功能異常,嚴重營養(yǎng)不良,凝血異常,甚至心功能不全,腎、肝臟功能損傷等身體器官的損害。對于一些需要手術治療的梗黃患者,在術前減黃的方式的選擇目前尚存在爭議。同時有研究發(fā)現(xiàn)膽汁酸受體TGR5在肝臟炎性反應過程中起到一定的調(diào)節(jié)作用。本研究嘗試探索建立小鼠的梗阻性黃疸及膽汁內(nèi)、外引流模型。并對梗阻性黃疸及膽汁內(nèi)外引流術后的小鼠肝臟內(nèi)TGR5的表達情況進行了初步研究,探討其是否參與并調(diào)節(jié)這一過程的病理生理變化。材料與方法：為了探索建立小鼠模型,本研究采用雄性昆明小鼠153只,隨機分為假手術組(SH),梗阻性黃疸組(OJ),膽汁外引流組(ED)及膽汁內(nèi)引流組(ID)四組。參考大鼠建模方法,重新改進并建立小鼠動物模型。第一次手術建立SH組和OJ組,第二次手術在梗黃后第五天實施,OJ及SH組在第一次手術后第五天采集血液和肝臟組織標本ID及ED組于第二次手術后第五天采集。為了確定建模是否成功并探索TGR5是否參與梗阻性黃疸及膽汁引流過程中肝臟炎癥調(diào)節(jié)。將血液樣本送檢驗科檢測生化指標,對收集的肝臟組織一部分行HE染色,另一部分行Real-time PCR及Western blot檢測肝臟中TGR5 mRNA及蛋白水平的表達情況。結果：本研究成功建立了小鼠梗阻性黃疸及膽汁內(nèi)、外引流術的動物模型。在對各組肝臟組織進行HE染色,血樣進行生化檢測后發(fā)現(xiàn)SH組肝臟組織形態(tài)及生化指標上均未見明顯異常,而OJ組肝組織內(nèi)可發(fā)現(xiàn)肝纖維化、水腫變性及炎癥壞死等改變,生化指標提示膽紅素升高肝功能異常。在行ED和ID治療后可不同程度的改善肝臟損傷,且生化指標趨于正常。提示梗黃及引流模型可靠有效。在mRNA和蛋白水平對各組TGR5表達情況進行檢測顯示：OJ組TGR5 mRNA表達水平較SH組上調(diào)1.3倍(P=0.005)；ED組及ID組中,TGR5 mRNA表達水平較OJ組明顯下調(diào)(P0.05),與SH組相比無明顯差異。但不同引流方式對TGR5mRNA表達水平無明顯影響。蛋白水平檢測結果與mRNA檢測結果一致,提示與SH組相比,梗阻性黃疸時肝臟TGR5的表達水平明顯上調(diào),經(jīng)引流后TGR5表達水平基本恢復正常,但內(nèi)、外引流的手術方式對TGR5的表達水平無明顯影響。結論：本研究成功建立小鼠的梗阻性黃疸及膽汁內(nèi)、外引流模型。梗阻性黃疽小鼠肝臟組織內(nèi)TGR5表達明顯增高,膽汁引流術可逆轉(zhuǎn)這一改變。提示在梗阻性黃疸發(fā)生后肝臟損傷及膽汁引流術后肝臟修復炎癥消退的過程可能與TGR5表達調(diào)控有關。
【關鍵詞】：梗阻性黃疸 肝臟 膽汁引流術 TGR5
【學位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R575;R-332
【目錄】：

• 縮略詞表6-7
• 中文摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-13
• 實驗材料13-16
• 1. 動物13
• 2. 手術器械及耗材13
• 3. 實驗設備、試劑及耗材13-16
• 實驗方法16-26
• 1. 動物麻醉16
• 2. 手術及分組16-19
• 3. 標本采集及檢測19-21
• 4. 各組間肝臟組織中TGR5 MRNA的測定21-24
• 5. 各組間肝臟組織中TGR5蛋白水平上的測定24-25
• 6. 統(tǒng)計學方法25-26
• 結果26-31
• 1. 動物術后基本情況分析26
• 2. 各組小鼠肝臟組織HE染色結果分析26-27
• 3. 各組小鼠術后化驗結果情況27-28
• 4. 各組間肝臟組織中TGR5表達的檢測結果28-31
• 討論31-34
• 結論34-35
• 參考文獻35-39
• 綜述：梗阻性黃疸檢查方法的綜述39-46
• 參考文獻43-46
• 攻讀期間學位期間發(fā)表文章情況46-47
• 致謝47

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Zi-Kai Wang;Jian-Guo Xiao;Xue-Fei Huang;Yi-Chun Gong;Wen Li;;Effect of biliary drainage on inducible nitric oxide synthase, CD14 and TGR5 expression in obstructive jaundice rats[J];World Journal of Gastroenterology;2013年15期

  本文關鍵詞：小鼠梗阻性黃疸及膽汁內(nèi)外引流動物模型的建立及各組肝臟組織中膽汁酸受體TGR5的表達研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：304270