GLP-1(7-36)抑制ApoE-/-小鼠主動脈斑塊面積及泡沫細胞內(nèi)CD36、ACAT1表達及其效應研究
發(fā)布時間:2021-02-17 00:31
目的探討GLP-1(7-36)對高脂飲食喂養(yǎng)的ApoE-/-小鼠動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展及巨噬細胞來源的泡沫細胞內(nèi)CD36、ACAT1表達的影響。方法①18~20 g的6~8周齡雄性ApoE-/-基因敲除小鼠實驗分4組(n=10):普通飲食組、高脂飲食組、GLP-1(7-36)組、GLP-1(7-36)+Exendin(9-39)組。通過HE染色、油紅O染色、免疫組化CD36、ACAT1抗體染色明確小鼠主動脈根部粥樣硬化斑塊的面積。②巨噬細胞實驗分8組(n=4):空白對照組、泡沫細胞組、不同濃度GLP-1(7-36)組、GLP-1(7-36)+Exendin(9-39)組。RT-PCR檢測各組細胞CD36、ACAT1 mRNA的表達;Western blot檢測各組細胞CD36、ACAT1蛋白的表達;高效液相色譜法檢測各組細胞總膽固醇(TC)、游離膽固醇(FC)及膽固醇酯(CE)的含量;細胞免疫熒光分析CD36、ACAT1受體蛋白表達。結果①與空白對照組相比,泡沫細胞組CD36、ACAT1mRNA表達水平較高(P<0.05);與泡沫細胞組...
【文章來源】:第三軍醫(yī)大學學報. 2019,41(20)北大核心
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 實驗動物
1.2 實驗藥物
1.3 實驗試劑
1.4 動物研究方法
1.4.1 小鼠分組及處理
1.4.2 組織形態(tài)學觀察
1.4.3 小鼠主動脈根部血管內(nèi)皮細胞CD36、ACAT1抗體染色
1.5 細胞研究方法
1.5.1 細胞培養(yǎng)和分組
1.5.2 油紅O染色
1.5.3 用實時PCR檢測各組細胞中的CD36、ACAT1 mRNA表達水平
1.5.4 用Western blot法檢測各組細胞中的CD36、ACAT1蛋白表達水平
1.5.5 酶熒光化學法測定細胞內(nèi)各種膽固醇含量
1.5.6 細胞免疫熒光觀察各組細胞表面CD36、ACAT1蛋白表達
1.6 統(tǒng)計學方法
2 結果
2.1 各組小鼠主動脈根部HE染色、油紅O染色結果
2.2 各組小鼠主動脈根部血管內(nèi)皮細胞CD36、ACAT1 表達
2.2.1 不同濃度GLP-1(7-36)干預CD36、ACAT1的mRNA、蛋白表達
2.2.2 各組CD36、ACAT1的mRNA、蛋白表達
2.2.3 GLP-1對細胞內(nèi)膽固醇含量的影響
2.2.4 免疫熒光染色
3 討論
本文編號:3037153
【文章來源】:第三軍醫(yī)大學學報. 2019,41(20)北大核心
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 實驗動物
1.2 實驗藥物
1.3 實驗試劑
1.4 動物研究方法
1.4.1 小鼠分組及處理
1.4.2 組織形態(tài)學觀察
1.4.3 小鼠主動脈根部血管內(nèi)皮細胞CD36、ACAT1抗體染色
1.5 細胞研究方法
1.5.1 細胞培養(yǎng)和分組
1.5.2 油紅O染色
1.5.3 用實時PCR檢測各組細胞中的CD36、ACAT1 mRNA表達水平
1.5.4 用Western blot法檢測各組細胞中的CD36、ACAT1蛋白表達水平
1.5.5 酶熒光化學法測定細胞內(nèi)各種膽固醇含量
1.5.6 細胞免疫熒光觀察各組細胞表面CD36、ACAT1蛋白表達
1.6 統(tǒng)計學方法
2 結果
2.1 各組小鼠主動脈根部HE染色、油紅O染色結果
2.2 各組小鼠主動脈根部血管內(nèi)皮細胞CD36、ACAT1 表達
2.2.1 不同濃度GLP-1(7-36)干預CD36、ACAT1的mRNA、蛋白表達
2.2.2 各組CD36、ACAT1的mRNA、蛋白表達
2.2.3 GLP-1對細胞內(nèi)膽固醇含量的影響
2.2.4 免疫熒光染色
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