背景:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cell,BMSCs）作為組織工程骨最理想的種子細(xì)胞已無(wú)爭(zhēng)議。在骨損傷的修復(fù)中,有多種細(xì)胞因子參與,如屬于轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF-β）超家族的骨形態(tài)發(fā)生蛋白2（BMP-2）是目前誘導(dǎo)成骨作用最確切的成員;另外,堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）是一種廣譜的有絲分裂源,能夠促進(jìn)軟骨及骨組織的形成,還可直接刺激血管形成以提高植入體內(nèi)的組織工程骨的新骨形成,它還可與BMP-2共同誘導(dǎo)骨的發(fā)生,在骨愈合過(guò)程中也發(fā)揮重要作用。越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)BMP-2與bFGF聯(lián)合誘導(dǎo)BMSC比單獨(dú)應(yīng)用BMP2或bFGF成骨活性更強(qiáng)。但外源性成骨誘導(dǎo)因子在直接植入體內(nèi)時(shí)易被蛋白酶分解而失去活性、易被沖散流失和稀釋,持續(xù)作用時(shí)間短、效價(jià)低,不能針對(duì)局部持續(xù)發(fā)揮刺激和成骨誘導(dǎo)作用。因此,選擇基因治療的方法,通過(guò)轉(zhuǎn)基因誘導(dǎo)成骨可很好地克服直接應(yīng)用外源性生長(zhǎng)因子的不足,可增加生長(zhǎng)因子的作用時(shí)間。腺病毒是目前應(yīng)用最廣的能高效將目的基因?qū)爰?xì)胞的媒介之一,它是一種非致病性復(fù)制缺陷型載體,能提供長(zhǎng)期的基因表達(dá)能力且免疫源性非常低,其宿主范圍廣,... 

【文章來(lái)源】：廣州醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：49 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

2A序列連接A、B基因示意圖

PCR擴(kuò)增BMP-2瓊脂糖電泳結(jié)果，顯示出約1200bp的光帶

PCR擴(kuò)增bFGF瓊脂糖電泳結(jié)果，顯示出約860bp的光帶

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2基因的克隆及重組真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建[J]. 王衛(wèi)東,殷力,王剛.  中華顯微外科雜志. 2010 (03)
[2]慢病毒介導(dǎo)的增強(qiáng)型綠色熒光蛋白報(bào)告基因?qū)﹂g充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記[J]. 李丹,朱康順,周斌,王勁,顏榮華,李征然,孟曉春,黃明聲,姜在波,單鴻.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2010 (19)
[3]骨形態(tài)發(fā)生蛋白2、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165雙基因轉(zhuǎn)染小鼠骨髄基質(zhì)干細(xì)胞的體內(nèi)誘導(dǎo)成骨[J]. 孫立,田曉濱,楊述華,胡如印,汪雷,陸延盛,張宇坤,傅德皓.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2008(47)
[4]Preparation of recombinant human bone morphogenetic protein-2 loaded dextran-based microspheres and their characteristics[J]. Fa-ming CHEN~(2,3) Zhi-fen WU~3 Qin-tao WANG~3 Hong WU~4 Yong-jie ZHANG~2 Xin NIE~2 Yan JIN~(2,5)2 Center for Tissue Engineering,College of Stomatology;3 Department of Periodontology and Mucosal Diseases,College of Stomatology;4 Department of Chemistry,Faculty of Preclinical Medicine,the Fourth Military Medical University,Xi-an 710032,China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2005(09)
[5]BMP-2重組腺病毒轉(zhuǎn)染肌源細(xì)胞體內(nèi)外成骨的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 韓劍鋒,林欣,王立春,劉建宇.  中華顯微外科雜志. 2005(01)



本文編號(hào)：3004254