研究背景:間充質干細胞（MSCs）,多呈長梭形,能粘附在塑料表面并形成克隆集落。利用MSCs的增殖分化和再生能力,選擇合適的生物材料或細胞因子,可以引導其向神經(jīng)、骨、軟骨等方向的細胞分化,協(xié)助參與修復過程。因而,MSCs被廣泛認同為組織工程再生的種子細胞。尤其是最早從骨髓內(nèi)分離出來的骨髓間充質干細胞（BMSCs）,性能突出,是該方面的研究熱點。近年來研究發(fā)現(xiàn),BMSCs具有免疫調控能力,能夠調節(jié)局部免疫微環(huán)境,提供適合再生的條件。隨著對損傷修復過程中免疫反應認識的逐步深入,巨噬細胞作為一種通過調節(jié)自身表型參與整個修復過程的免疫細胞,吸引了越來越廣泛的關注。BMSCs能夠將巨噬細胞（Mφs）誘導為抗炎、促修復的M2表型,進一步促進修復過程的進展。利用不斷發(fā)展的細胞生物學和細胞治療技術,BMSCs的免疫調控能力為治療各種損傷修復及免疫相關疾病帶來新的希望。然而,BMSCs的性能受到供體年齡的影響,隨著年齡增長,BMSCs增殖、分化、血管形成等性能（體內(nèi)和體外）隨之下降,呈現(xiàn)出衰老狀態(tài),極大地影響了其臨床應用。另外,往往是老年患者對干細胞治療的需求最為迫切,因此,年齡是否影響B(tài)MSCs的免疫... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

RAW264.7的細胞形態(tài)和鑒定（A.未處理條件下的RAW264.7，標尺：200μm；B.RAW264.7細胞表面標記物鑒定）

且為貼壁生長，符合 BMSCs 的外形和生長特征（圖1-2A）。YMSCs 和 AMSCs 均能在培養(yǎng)皿上增殖。CCK-8 的檢測結果表明 7 天增殖過程中，YMSCs 的增殖速度明顯高于 AMSCs（圖 1-2B）。EdU 檢測表明培養(yǎng) 4 天時，YMSCs 細胞組內(nèi) EdU 陽性細胞比率明顯高于 AMSCs 細胞組（圖 1-2C）。圖 1-2 不同年齡小鼠 BMSCs 培養(yǎng)和增殖活性檢測

空軍軍醫(yī)大學碩士學位論文（A. P1 代 YMSCs 和 AMSCs 細胞形態(tài)，標尺：100 μm；B. CCK-8 檢測下兩種細胞生長曲線；C. EdU 染色的 YMSCs 和 AMSCs 細胞和統(tǒng)計分析）3，在相應的誘導條件下，YMSCs 和 AMSCs 能被誘導成骨或是成脂。成骨誘導液誘導 7 天后，YMSCs 和 AMSCs 培養(yǎng)板內(nèi)均可見礦化結節(jié)形成，茜素紅染色后大體上可見為紅色片/塊狀，顯微鏡下表現(xiàn)為細胞之間的紅色礦化結節(jié)聚集。照片及定量分析發(fā)現(xiàn) YMSCs 成骨能力（形成的礦化結節(jié)量）較 AMSCs 更強（P < 0.05）（圖 1-3A）。成脂誘導液誘導 7 天后，顯微鏡可見 YMSCs 和 AMSCs 細胞內(nèi)明顯的橘紅色小液滴狀的脂滴聚集。異丙醇溶解脂滴并定量結果表明 AMSCs 細胞成脂能力（形成的脂滴的量）較 YMSCs 更強（P < 0.05）（圖 1-3B）。


本文編號：3000307