研究背景:間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）,多呈長梭形,能粘附在塑料表面并形成克隆集落。利用MSCs的增殖分化和再生能力,選擇合適的生物材料或細(xì)胞因子,可以引導(dǎo)其向神經(jīng)、骨、軟骨等方向的細(xì)胞分化,協(xié)助參與修復(fù)過程。因而,MSCs被廣泛認(rèn)同為組織工程再生的種子細(xì)胞。尤其是最早從骨髓內(nèi)分離出來的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）,性能突出,是該方面的研究熱點(diǎn)。近年來研究發(fā)現(xiàn),BMSCs具有免疫調(diào)控能力,能夠調(diào)節(jié)局部免疫微環(huán)境,提供適合再生的條件。隨著對損傷修復(fù)過程中免疫反應(yīng)認(rèn)識(shí)的逐步深入,巨噬細(xì)胞作為一種通過調(diào)節(jié)自身表型參與整個(gè)修復(fù)過程的免疫細(xì)胞,吸引了越來越廣泛的關(guān)注。BMSCs能夠?qū)⒕奘杉?xì)胞（Mφs）誘導(dǎo)為抗炎、促修復(fù)的M2表型,進(jìn)一步促進(jìn)修復(fù)過程的進(jìn)展。利用不斷發(fā)展的細(xì)胞生物學(xué)和細(xì)胞治療技術(shù),BMSCs的免疫調(diào)控能力為治療各種損傷修復(fù)及免疫相關(guān)疾病帶來新的希望。然而,BMSCs的性能受到供體年齡的影響,隨著年齡增長,BMSCs增殖、分化、血管形成等性能（體內(nèi)和體外）隨之下降,呈現(xiàn)出衰老狀態(tài),極大地影響了其臨床應(yīng)用。另外,往往是老年患者對干細(xì)胞治療的需求最為迫切,因此,年齡是否影響B(tài)MSCs的免疫... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

RAW264.7的細(xì)胞形態(tài)和鑒定（A.未處理?xiàng)l件下的RAW264.7，標(biāo)尺：200μm；B.RAW264.7細(xì)胞表面標(biāo)記物鑒定）

且為貼壁生長，符合 BMSCs 的外形和生長特征（圖1-2A）。YMSCs 和 AMSCs 均能在培養(yǎng)皿上增殖。CCK-8 的檢測結(jié)果表明 7 天增殖過程中，YMSCs 的增殖速度明顯高于 AMSCs（圖 1-2B）。EdU 檢測表明培養(yǎng) 4 天時(shí)，YMSCs 細(xì)胞組內(nèi) EdU 陽性細(xì)胞比率明顯高于 AMSCs 細(xì)胞組（圖 1-2C）。圖 1-2 不同年齡小鼠 BMSCs 培養(yǎng)和增殖活性檢測

空軍軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文（A. P1 代 YMSCs 和 AMSCs 細(xì)胞形態(tài)，標(biāo)尺：100 μm；B. CCK-8 檢測下兩種細(xì)胞生長曲線；C. EdU 染色的 YMSCs 和 AMSCs 細(xì)胞和統(tǒng)計(jì)分析）3，在相應(yīng)的誘導(dǎo)條件下，YMSCs 和 AMSCs 能被誘導(dǎo)成骨或是成脂。成骨誘導(dǎo)液誘導(dǎo) 7 天后，YMSCs 和 AMSCs 培養(yǎng)板內(nèi)均可見礦化結(jié)節(jié)形成，茜素紅染色后大體上可見為紅色片/塊狀，顯微鏡下表現(xiàn)為細(xì)胞之間的紅色礦化結(jié)節(jié)聚集。照片及定量分析發(fā)現(xiàn) YMSCs 成骨能力（形成的礦化結(jié)節(jié)量）較 AMSCs 更強(qiáng)（P < 0.05）（圖 1-3A）。成脂誘導(dǎo)液誘導(dǎo) 7 天后，顯微鏡可見 YMSCs 和 AMSCs 細(xì)胞內(nèi)明顯的橘紅色小液滴狀的脂滴聚集。異丙醇溶解脂滴并定量結(jié)果表明 AMSCs 細(xì)胞成脂能力（形成的脂滴的量）較 YMSCs 更強(qiáng)（P < 0.05）（圖 1-3B）。


本文編號：3000307