目的 Rv2742是基于蛋白質(zhì)基因組學(xué)技術(shù)從結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis H37Rv,結(jié)核菌）中發(fā)現(xiàn)并驗(yàn)證的遺漏注釋基因。該研究旨在篩選Rv2742在結(jié)核菌中的相互作用蛋白質(zhì),對(duì)Rv2742互作網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行分析,為深入探索其在結(jié)核菌中所參與的生物學(xué)功能提供理論基礎(chǔ)。方法采用免疫親和純化質(zhì)譜（IP-MS）篩選Rv2742在結(jié)核菌中的互作蛋白質(zhì)。以pMAL-c2X和pMAL-c2X-Rv2742載體誘導(dǎo)表達(dá)、純化獲得的麥芽糖結(jié)合蛋白（MBP）和MBP-Rv2742融合蛋白為誘餌,分別取等摩爾蛋白與H37Rv非變性全細(xì)胞蛋白質(zhì)裂解物進(jìn)行孵育,收集2次生物學(xué)重復(fù)實(shí)驗(yàn)得到的與MBP和MBP-Rv2742誘餌結(jié)合的蛋白質(zhì)復(fù)合物,10%SDS-PAGE凝膠電泳驗(yàn)證,通過(guò)液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）分析、篩選出Rv2742在結(jié)核菌中的互作蛋白質(zhì),對(duì)篩選到的蛋白質(zhì)進(jìn)行基因本體（gene ontology,GO）和互作網(wǎng)絡(luò)分析。結(jié)果共篩選到105個(gè)Rv2742的潛在互作蛋白質(zhì),其定位主要分布在細(xì)胞壁、細(xì)胞質(zhì)膜和細(xì)胞外區(qū)域等細(xì)胞組分中,功能上主要參與低氧應(yīng)激、宿主... 

【文章來(lái)源】：軍事醫(yī)學(xué). 2019,43(10)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【部分圖文】：

標(biāo)簽蛋白MBP與融合蛋白MBP-Rv2742誘導(dǎo)表達(dá)、純化檢測(cè)

MBP pull-down結(jié)果檢測(cè)

LC-MS/MS檢測(cè)結(jié)果


本文編號(hào)：3000330