單線態(tài)氧產(chǎn)生者（mini singlet oxygen generator,miniSOG）是改造于擬南芥向光素2蛋白而獲得的小分子熒光黃素蛋白,由106個氨基酸殘基組成。miniSOG被廣泛用于電鏡及熒光顯微鏡,并被廣泛用于發(fā)色團輔助的光滅活（Chromophore-assisted light inactivation,CALI）蛋白、DNA或RNA,并結合免疫光敏用于癌癥的治療,以及結合細胞消融用于神經(jīng)科學、免疫生物學等。但是目前國內(nèi)并無商品化的miniSOG抗體,為了輔助課題研究,制備抗miniSOG蛋白的單克隆抗體,本研究根據(jù)miniSOG基因的ORF區(qū)序列構建miniSOG-GST重組蛋白的原核表達載體PGEX-4T-1-miniSOG,然后將該重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化于BL21感受態(tài)大腸桿菌中,異丙基硫代半乳糖苷（Isopropylβ-DThiogalactoside,IPTG）誘導融合蛋白的表達,并經(jīng)親和層析方法進行純化。將純化后的重組蛋白免疫BALB/c小鼠,利用雜交瘤技術制備單克隆抗體。篩選獲得穩(wěn)定分泌抗miniSOG的單克隆抗體細胞株,最終選取性能最優(yōu)的4F9細胞株進行小鼠腹... 

【文章來源】：病毒學報. 2019,35(06)北大核心

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

pGEX4P1miniSOG的構建及鑒定注：M.DNAMarker；1.陰性對照；


本文編號：3000074