發(fā)布時間：2021-01-14 17:47

　　目的探討ORMDL3基因與系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）臨床表型之間的關(guān)系。方法采用TALEN技術(shù)構(gòu)建Ormdl3基因敲除小鼠。取純合敲除小鼠(Ormdl3^-/-)與同窩野生小鼠(Ormdl3^+/+)各20只,分為4組,分別腹腔注射降植烷與PBS各0.5 m L,在注射3個月和6個月后比較各組小鼠24 h尿蛋白水平,HE染色比較腎臟損傷程度,稱重比較脾臟質(zhì)量、體質(zhì)量,流式細胞術(shù)比較脾臟組織CD4⁺/CD8⁺T細胞比例。結(jié)果 （1）注射降植烷3個月及6個月后,Ormdl3^-/-敲除小鼠脾臟腫大程度低于同時注射降植烷的Ormdl3^+/+野生小鼠;（2）Ormdl3^-/-敲除小鼠在注射降植烷6個月后,24 h尿蛋白水平較同樣注射降植烷的Ormdl3^+/+野生小鼠差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.066）;HE染色結(jié)果顯示Ormdl3^-/-敲除小鼠在注射降植烷后腎臟損傷程度較注射降植烷的Ormdl3^+/... 

【文章來源】：寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2020,42(01)

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

Ormdl3基因敲除小鼠敲除效率分析

尿蛋白水平增高是快速直觀反應(yīng)SLE患者腎臟損傷程度的有效指標(biāo)，因此，為了明確Ormdl3基因敲除是否能夠有效緩解降植烷誘導(dǎo)狼瘡小鼠尿蛋白水平，利用小鼠代謝籠收集各組實驗小鼠24 h尿液，并利用考馬斯亮藍法檢測尿蛋白濃度。結(jié)果顯示，Ormdl3+/+野生小鼠在注射降植烷3個月后即可檢測到有尿蛋白產(chǎn)生，與注射6個月后比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=0.464,P=0.663）。與Ormdl3+/+野生小鼠相比，Ormdl3-/-敲除小鼠在注射降植烷3、6個月后尿蛋白濃度比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（t=1.170,P=0.307;t=2.239,P=0.066）（圖4）。圖4 降植烷誘導(dǎo)Ormdl3+/+和Ormdl3-/-小鼠尿蛋白濃度檢測

圖3 Ormdl3+/+和Ormdl3-/-小鼠分別注射降植烷和PBS 6個月后脾臟質(zhì)量、體質(zhì)量及其比值的比較（*P<0.05,**P<0.01)HE染色結(jié)果顯示，Ormdl3+/+野生小鼠在注射降植烷6個月后出現(xiàn)明顯腎小球腎炎表現(xiàn)，主要表現(xiàn)為炎性細胞浸潤、腎小球體積增大致腎小囊腔減小或消失、系膜增生等。Ormdl3-/-敲除小鼠在注射降植烷6個月后雖然也出現(xiàn)腎小球腎炎表現(xiàn)，但腎小球增大并不顯著（圖5）。以上結(jié)果提示，Ormdl3基因缺失在一定程度上可以抵抗降植烷誘導(dǎo)狼瘡小鼠腎臟損傷水平。


本文編號：2977262