發(fā)布時(shí)間：2017-04-10 22:24

  本文關(guān)鍵詞：基于P38信號(hào)通路探究溫陽(yáng)振衰顆粒對(duì)阿霉素所致慢性心力衰竭模型兔心肌細(xì)胞P38表達(dá)及凋亡的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：通過(guò)觀察溫陽(yáng)振衰顆粒對(duì)慢性充血性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)模型兔的作用,探討抑制劑SB203580對(duì)于在體動(dòng)物的使用,進(jìn)一步研究SB203580的有效使用劑量方法,且根據(jù)血清NT-proBNP、p38總蛋白和p38磷酸化蛋白、p38mRNA水平表達(dá)和電鏡下心肌細(xì)胞的影響,探討溫陽(yáng)振衰顆粒其治療CHF的作用機(jī)制。 方法： 第一階段：將40只健康普通級(jí)新西蘭兔隨機(jī)抽取為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、P3840ug組、P3820ug組、P38空白組、DMSO阿霉素組、DMSO空白組、依那普利組。每組實(shí)驗(yàn)兔5只。連續(xù)藥物處理4周后,取心臟組織,并采用Western-blot和檢測(cè)P38總蛋白、P38磷酸化的表達(dá)水平和P38mRNA。 第二階段：從第一階段所得結(jié)論,將56只兔子,將實(shí)驗(yàn)兔隨機(jī)分為8組,每組7只實(shí)驗(yàn)兔。分別為：正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、溫陽(yáng)振衰組、依那普利組、P38抑制劑+阿霉素組、P38抑制劑40u1組、DMSO組、DMSO組+阿霉素組。8周后,取實(shí)驗(yàn)兔心臟,檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)兔血清NT-proBNP、心肌細(xì)胞凋亡、P38總蛋白、P38磷酸化蛋白、p38mRNA水平,以及電鏡下心肌細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)。 結(jié)果： 第一階段： 造模4周后各組間P38比較,經(jīng)過(guò)SB和藥物干預(yù)后,心肌P38均不同程度上升,其中以模型對(duì)照組上升最為明顯(P0.05)。SB低、高劑組和陽(yáng)性對(duì)照組心肌P38水平上升較模型對(duì)照組緩慢(P0.05),其中SB高劑組心肌P38水平升高最為緩慢(P0.05)。各組在4周末心肌p38總蛋白及心肌p38mRNA水平與其余各組相比差異無(wú)顯著性意義(P0.05)。 第二階段： 1.各組血清NT-proBNP:造模8周后,各組血清NT-proBNP均不同程度上調(diào),各實(shí)驗(yàn)組均高于正常對(duì)照組、DMSO組、SB空白組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),阿霉素對(duì)照組最高(P0.05)。SB抑制劑組、依那普利對(duì)照組、溫陽(yáng)振衰組血清NT-proBNP水平均有升高。(P0.05),其中以溫陽(yáng)振衰血清NT-proBNP水平升高最為緩慢(P0.05)。 2.各組心肌凋亡指數(shù)：造模8周后,各組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)均不同程度上調(diào),與正常對(duì)照組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其中以阿霉素DMSO組上調(diào)最為明顯(P0.05)。溫陽(yáng)振衰組、依那普利對(duì)照組、SB抑制劑組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)水平上調(diào)較阿霉素DMSO組緩慢(P0.05),其中以SB抑制劑組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)升高最為緩慢(P0.05)。 3.各組P38總蛋白和P38mRNA變化,8周造模后各組差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 4.各組P-P38變化：各組P38磷酸化的蛋白水平均不同程度上調(diào),與正常對(duì)照組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其中以阿霉素組上調(diào)最為明顯(P0.05)。DMSO阿霉素組與阿霉素對(duì)照組比較,以及DMSO空白組與正�？瞻捉M比較P38磷酸化的蛋白水平分別相比差異無(wú)顯著性意義(P0.05)。實(shí)驗(yàn)各組心肌細(xì)胞P38磷酸化的蛋白水平相比差異無(wú)顯著性意義(P0.05)。SB抑制劑組和依那普利對(duì)照組、溫陽(yáng)振衰組P38磷酸化的蛋白水平上調(diào)較模型對(duì)照組緩慢(P0.05),其中以溫陽(yáng)振衰組最為緩慢(P0.05)。 5.各組心肌細(xì)胞電鏡結(jié)果：電鏡結(jié)果顯示模型對(duì)照組及藥物干預(yù)各組均可見(jiàn)肌纖維壞死或萎縮,部分線粒體水腫、空泡化,肌絲結(jié)構(gòu)不清,可見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。SB40抑制劑組、依那普利組、溫陽(yáng)振衰組電鏡下改變相對(duì)于模型對(duì)照組為輕,溫陽(yáng)振衰組在這三組中最輕。 結(jié)論： 1.抑制劑在體內(nèi)使用長(zhǎng)時(shí)間有效劑量為SB40ul組,持續(xù)皮下注射4周能顯著降低P38蛋白磷酸化的水平。 2.溫陽(yáng)振衰顆粒可通過(guò)調(diào)節(jié)心衰模型兔的心臟功能,降低血清NT-proBNP、P38磷酸化蛋白水平表達(dá)和改善心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu),對(duì)P38總蛋白、P38mRNA無(wú)明顯改變,從而防止和延緩CHF的進(jìn)一步惡化,溫陽(yáng)振衰組療效與SB抑制劑組有相似的作用。
【關(guān)鍵詞】：溫陽(yáng)振衰顆粒 慢性充血性心力衰竭 抑制劑 P38
【學(xué)位授予單位】：湖南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R285.5;R-332
【目錄】：

• 英文~.略詞表6-7
• 中文摘要7-9
• Abstract9-11
• 引言11-14
• 第一部分 實(shí)驗(yàn)研究14-24
• 1 材料14-15
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物14
• 1.2 動(dòng)物飼料14
• 1.3 實(shí)驗(yàn)藥物14-15
• 1.3.1 造模藥物14
• 1.3.2 受試藥物14
• 1.3.3 陽(yáng)性藥物14
• 1.3.4 麻醉藥物14-15
• 1.4 實(shí)驗(yàn)試劑15
• 1.5 實(shí)驗(yàn)儀器15
• 2 實(shí)驗(yàn)條件15
• 3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)15-24
• 3.1 第一階段實(shí)驗(yàn)16-18
• 3.1.1 分組方法16
• 3.1.2 病理模型表達(dá)誘導(dǎo)16
• 3.1.3 給藥方法16
• 3.1.4 樣本采集與檢測(cè)16-18
• 3.1.4.1 心肌組織總蛋白質(zhì)提取16-17
• 3.1.4.2 Western-blot檢測(cè)17-18
• 3.1.4.3 RT-PCR分析18
• 3.1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法18
• 3.2 第二階段實(shí)驗(yàn)18-24
• 3.2.1 分組方法18-20
• 3.2.2 觀察指標(biāo)及方法20-23
• 3.2.2.1 基礎(chǔ)狀態(tài)20
• 3.2.2.2 血漿BNP的檢測(cè)20
• 3.2.2.3 心肌細(xì)胞凋亡檢測(cè)20-21
• 3.2.2.4 P38總蛋白和P38磷酸化水平的表達(dá)21
• 3.2.2.5 P38mRNA轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)21
• 3.2.2.6 心肌組織病理切片電鏡觀察21-22
• 3.2.2.7 心肌組織病理切片光鏡觀察22-23
• 3.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法23-24
• 第二部分 結(jié)果與分析24-33
• 1 第一階段實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析24-26
• 1.1 一般情況24
• 1.2 實(shí)驗(yàn)后各組間心肌P38的表達(dá)24-26
• 1.3 結(jié)果26
• 2 第二階段實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析26-33
• 2.1 實(shí)驗(yàn)后各組血清NT-proBNP的變化26-27
• 2.2 實(shí)驗(yàn)后各組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)的變化27-28
• 2.3 P38總蛋白和P38磷酸化的蛋白水平的表達(dá)28-30
• 2.4 P38-mRNA的表達(dá)30-31
• 2.5 實(shí)驗(yàn)后各組間心肌組織透射光鏡觀察31-32
• 2.6 實(shí)驗(yàn)后各組間心肌組織透射電鏡觀察32-33
• 第三部分 討論33-44
• 1 CHF的中醫(yī)認(rèn)識(shí)及治療研究33-36
• 1.1 病名源流33
• 1.2 病因病機(jī)33-35
• 1.2.1 心氣虛是慢性心衰發(fā)病的始動(dòng)因素33-34
• 1.2.2 陽(yáng)氣虛衰是病機(jī)關(guān)鍵34-35
• 1.3 關(guān)于治療的記載35-36
• 2 CHF的西醫(yī)認(rèn)識(shí)及治療研究36-40
• 2.1 病理生理認(rèn)識(shí)36-39
• 2.1.1 神經(jīng)體液作用機(jī)制學(xué)說(shuō)36-37
• 2.1.2 細(xì)胞凋亡學(xué)說(shuō)37-38
• 2.1.3 心衰發(fā)病中細(xì)胞信號(hào)傳的研究現(xiàn)狀38-39
• 2.2 治療研究39-40
• 3 導(dǎo)師對(duì)本病的認(rèn)識(shí)40
• 4 溫陽(yáng)振衰顆粒的方解及現(xiàn)代藥理研究40-43
• 4.1 溫陽(yáng)振衰顆粒方解40-41
• 4.2 現(xiàn)代藥理研究41-43
• 5 溫陽(yáng)振衰顆粒治療CHF的作用機(jī)制分析43
• 6 溫陽(yáng)振衰顆粒的研究展望43-44
• 第四部分 結(jié)論44-45
• 致謝45-46
• 附錄A：心肌凋亡結(jié)果46-48
• 附錄B：心肌組織光鏡結(jié)果48-50
• 附錄C：心肌組織電鏡結(jié)果50-52
• 參考文獻(xiàn)52-55
• 綜述55-63
• 參考文獻(xiàn)61-63

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張頻捷;朱立新;耿小平;;p38 MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路及其抑制劑的研究現(xiàn)狀[J];安徽醫(yī)藥;2010年05期

2 章燕;戴小華;;益氣活血中藥改善急性心肌梗死后左心室重構(gòu)實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[J];安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年02期

3 張鳳;戴小華;;調(diào)脾護(hù)心方治療心脾兩虛證慢性心力衰竭療效觀察[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2014年05期

4 高淑彩;;參麥注射液聯(lián)合西醫(yī)治療慢性心力衰竭76例療效觀察[J];河北中醫(yī);2012年05期

5 任澎;張巍;劉永國(guó);李U

本文編號(hào)：297658