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肝臟血流控制優(yōu)化方法的動(dòng)物模型建立與其機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2017-04-09 09:27

  本文關(guān)鍵詞:肝臟血流控制優(yōu)化方法的動(dòng)物模型建立與其機(jī)制,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:背景19世紀(jì)的末期,醫(yī)學(xué)工作者通過反復(fù)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)與研究,基本確立肝實(shí)質(zhì)切開是可行的,切除后的余肝可以再生以并可達(dá)到其原來的體積,因肝臟血運(yùn)豐富,血管分布復(fù)雜,行肝臟切除術(shù)時(shí)總會(huì)伴隨著大量出血手術(shù)成功率很低。直到1908年P(guān)ringle提出肝切除時(shí)暫時(shí)阻斷肝蒂的入肝血流阻斷方法突破了很多制約肝臟外科手術(shù)的不利因素。經(jīng)過100多年來的臨床實(shí)踐證明,Pringle法簡(jiǎn)便、實(shí)用,幾乎可用于各種類型的肝切除術(shù),但對(duì)一些特殊部位腫瘤的手術(shù)切除,因術(shù)中顯露困難增加了手術(shù)難度與時(shí)間,術(shù)中術(shù)后會(huì)出現(xiàn)大出血和肝功能衰竭等并發(fā)癥,手術(shù)死亡率明顯增高。如何探索出一種最大限度減少肝臟缺血再灌注損傷,使全身炎性反應(yīng)更輕,更好的保護(hù)術(shù)后剩余肝臟功能的血流阻斷方法,一直是肝膽外科學(xué)研究的熱點(diǎn)。目的本實(shí)驗(yàn)根據(jù)大鼠肝臟存在兩套血供系統(tǒng),即肝動(dòng)脈與門靜脈,其解剖結(jié)構(gòu)與人類相似,開展優(yōu)化入肝血流控制方法的實(shí)驗(yàn)研究[4-5]。方法1.設(shè)計(jì)出大鼠肝臟熱缺再灌注損傷模型,隨機(jī)分為四組:實(shí)驗(yàn)對(duì)照組,Pringle法組、半肝阻斷血流阻斷法組及尾狀葉分流保留動(dòng)脈阻斷門靜脈組。觀察不同阻斷方法下肝缺血再灌注24 h及7天實(shí)驗(yàn)動(dòng)物存活率、肝斷面出血量、肝組織內(nèi)血流灌注壓及門靜脈壓力變化,結(jié)合病理學(xué)、血清酶學(xué)等常規(guī)方法,篩選出一種優(yōu)化的肝門血流控制方式。2.在手術(shù)前12小時(shí),讓大鼠充分適應(yīng)外界環(huán)境,手術(shù)前禁食,對(duì)飲水不受限制。3.動(dòng)物麻醉:采用腹腔內(nèi)注射10%水合氯醛進(jìn)行麻醉,術(shù)中間斷給以乙醚吸入使其一直處于麻醉狀態(tài)。4.手術(shù)步驟:將處于麻醉狀態(tài)下的Wistar大鼠仰臥位固定在自制手術(shù)操作臺(tái)上,采取上腹部正中切口進(jìn)入腹腔,用棉簽鈍性剝離肝臟下緣組織,將胃腸撥向左側(cè),充分顯露第一肝門。尖端肝周圍韌帶,仔細(xì)分離出擬阻斷的肝臟血管。(1)對(duì)照組:開腹后進(jìn)行肝臟周圍韌帶的游離,成完成灌注壓及門靜脈壓測(cè)定后,結(jié)扎肝左葉通道,切除肝左葉用于病理學(xué)檢查,于肝中葉邊緣做一切長(zhǎng)約0.5cm的切口,在切口上放置無菌棉球收集出血,時(shí)間設(shè)定為2分鐘,收集完畢后斷頭處死。(2)Pringle法組:游離出門靜脈與肝固有動(dòng)脈后用血管夾阻斷連同膽管一同夾閉造成整個(gè)入肝血流阻斷。(3)半肝血流阻斷組:用無損傷血管夾阻斷肝門部將入肝中葉與左葉的管道阻斷造成70%肝臟缺血。(4)尾狀葉分流保留動(dòng)脈阻斷門靜脈組:用兩個(gè)無損傷血管夾分別阻斷肝中葉與肝左葉的門靜脈通道,保留動(dòng)脈血流與尾葉血供。(5)各組在阻斷到30分鐘后松開血管夾,復(fù)流30分鐘后,切除肝左葉。認(rèn)真止血檢查無明顯出血后逐層縫合進(jìn)行關(guān)腹。5.觀察不同阻斷方式下對(duì)肝創(chuàng)面出血的控制。6.Wistar大鼠開腹后進(jìn)行手術(shù)操作,不同肝臟血流阻斷方法下每組需保證15只大鼠存活,通過使用大鼠數(shù)量計(jì)算了手術(shù)成功率,觀察手術(shù)成功后大鼠不同阻斷方法下大鼠24小時(shí)、7天存活率。7.病理學(xué)檢查:手術(shù)完成后切除部分肝臟,行肝組織切片做HE染色,觀察鏡下肝細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。8.Wistar大鼠進(jìn)行斷尾進(jìn)行血液標(biāo)本采集進(jìn)行對(duì)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)數(shù)值檢測(cè)。9.檢測(cè)肝組織內(nèi)灌注壓及門靜脈內(nèi)壓力的變化。10.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析,實(shí)驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,采用單因素方差分析,兩組均數(shù)比較用t檢驗(yàn),P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.成功完成Pringle法組、半肝血流阻斷組與尾狀葉分流保留動(dòng)脈阻斷門靜脈組的動(dòng)物模型建立;2. Pringle法組、半肝血流阻斷組與尾狀葉分流保留動(dòng)脈阻斷門靜脈組三種阻斷肝門血流控制法阻斷肝臟血流后,肝斷面仍然有一定的出血量,肝臟斷面出血量有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。3.手術(shù)成功率:正常對(duì)照組100%(15/15)、Pringle法組88.2%(15/17)、半肝血流阻斷組71.4%(15/21)、尾狀葉分流保留動(dòng)脈阻斷門靜脈組83.3%(15/18)。4. Pringle法組術(shù)后第7天僅2只存活率為13.3%;半肝阻斷法組術(shù)后第7天僅存6只存活率為40.0%;尾狀葉分流保留動(dòng)脈阻斷門靜脈法組術(shù)后7天有8只存活,活率為53.3%。5.病理切片結(jié)果:三者鏡下均見點(diǎn)狀或小灶狀肝細(xì)胞壞死,半肝血流阻斷組與尾狀葉分流保留動(dòng)脈阻斷門靜脈組肝細(xì)胞受損率較Pringle法組明顯輕。6.三組動(dòng)物模型在復(fù)流后1小時(shí)、24小時(shí)后對(duì)肝功能進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果表明半肝血流阻斷組與尾狀葉分流保留動(dòng)脈阻斷門靜脈組對(duì)肝組織谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活力影響明顯較Pringle法組輕。7. Pringle法組阻斷后肝內(nèi)灌注壓會(huì)突然上升至正常水平的3.4倍。結(jié)論本次研究表明尾狀葉分流保留動(dòng)脈阻斷門靜脈法較Pringle法與半肝血流阻斷法相比有著明顯優(yōu)勢(shì),能有效減輕肝臟因缺血缺血再灌注造成的損傷,尾狀葉分流保留動(dòng)脈阻斷門靜脈法是值得在臨床應(yīng)用的一種肝門血流控制方法。
【關(guān)鍵詞】:肝臟缺血再灌注損傷 血流阻斷 肝切除 血清酶學(xué)
【學(xué)位授予單位】:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R657.3;R-332
【目錄】:
  • 摘要5-8
  • Abstract8-14
  • 前言14-16
  • 1 實(shí)驗(yàn)材料16-17
  • 2 實(shí)驗(yàn)方法17-21
  • 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-30
  • 4 討論30-34
  • 5 結(jié)論34-35
  • 參考文獻(xiàn)35-40
  • 綜述:肝癌切除術(shù)技術(shù)特點(diǎn)與缺血再灌注損傷研究進(jìn)展40-55
  • 參考文獻(xiàn)49-55
  • 附錄55-56
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況56-57
  • 致謝57-58
  • 個(gè)人簡(jiǎn)介58

【引證文獻(xiàn)】

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 葉勝龍;;原發(fā)性肝癌規(guī)范化診治專家共識(shí)解讀[A];第十二屆全國(guó)肝癌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年


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本文編號(hào):294973

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