中腦導水管周圍灰質(zhì)（Periaqueductal gray,PAG）被認為是調(diào)控厭惡情緒與防御性行為的重要神經(jīng)核團,包括恐懼、威脅、焦慮情緒下出現(xiàn)的對抗、逃跑或者凝滯等行為。目前,對于該腦區(qū)在主動回避學習中的調(diào)節(jié)機制尚未完全明確。目的:探索中腦導水管周圍灰質(zhì)γ-氨基丁酸（γ-Aminobutyric acid,GABA）能神經(jīng)元在主動回避學習中的調(diào)控作用。方法:通過穿梭箱實驗,對實驗小鼠進行主動回避訓練;通過早期即刻基因c-fos免疫熒光染色確定小鼠PAG內(nèi)c-fos表達的變化;利用腦立體定位注射,將攜帶有hM3Dq或hM4Di基因的重組腺相關(guān)病毒定位注射于Vgat-cre轉(zhuǎn)基因小鼠的PAG內(nèi),待2-3周后GABA能神經(jīng)元穩(wěn)定表達hM3Dq或hM4Di。制備300μm厚度的PAG離體腦片,進行全細胞膜片鉗記錄,記錄CNO對GABA能神經(jīng)元活動的調(diào)節(jié)。應(yīng)用化學遺傳學技術(shù),在清醒小鼠體內(nèi)特異性激活或者抑制PAG的GABA能神經(jīng)元,觀察改變GABA能神經(jīng)元的活動對小鼠主動回避學習能力的影響;結(jié)果:Vgat-ChR2-EYFP轉(zhuǎn)基因小鼠在主動回避學習中存在延遲建立的特性;主動回避學習中,與正常... 

【文章來源】：桂林醫(yī)學院廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學位級別】：碩士

【圖文】：

中腦導水管周圍灰質(zhì)形態(tài)學分區(qū)Figure1ThemorphologicalsubdivisionsofPAG注：小鼠中腦導水管周圍灰質(zhì)按照其內(nèi)部神經(jīng)元大小、形狀和密度可分為：背側(cè)區(qū)（dPAG）、背

前 24h 在小鼠的飼養(yǎng)籠中，每籠放入兩瓶 1%（w/v）的蔗糖溶液，緊接著 24h 將其中的一瓶換成純水，適應(yīng)結(jié)束后，禁食禁水 24h。在測試中，小鼠可以自由活動在裝有等量體積的兩個水瓶之間，一瓶為 1%（w/v）的蔗糖溶液，另一瓶為純水，禁食，12h 后，取走兩瓶并稱重，記錄小鼠的總液體消耗，糖水消耗和純水消耗。1.2.2 化學遺傳學學實驗（Designer receptors exclusively activated bydesigner drugs，DREADDs）DREADDs 是將 hM3Dq 或 hM4Di（改造過的人毒蕈堿型乙酰膽堿受體）通過 AAV 病毒載體表達在帶有 Cre 酶系的神經(jīng)元細胞上[35]，使用藥物疊氮平-N-氧化物（clozapine-N-oxide，CNO）可以特異性地結(jié)合表達在細胞膜上的 hM3Dq 或 hM4Di 蛋白，使得表達 hM3Dq 的神經(jīng)元去極化，興奮性增AB

主動回避學習實驗（穿梭箱）


本文編號：2949426