B7-H4分子是B7家族的成員之一,其特異性表達在多種腫瘤組織中,如乳腺癌、肺癌、食管癌、卵巢癌、前列腺癌、胃癌等,并與疾病的不良預后有關(guān)。B7-H4分子通過與受體的結(jié)合發(fā)揮免疫負調(diào)控的作用,可以有效抑制T細胞的增殖、活化和細胞因子的產(chǎn)生來介導腫瘤的免疫逃逸。已有研究表明,利用B7-H4的抗體可以促進抗腫瘤免疫效應[1]。通過抑制B7-H4分子與B7-H4受體的結(jié)合,從而促進機體免疫細胞對腫瘤細胞的殺傷。由此可見,B7-H4的受體在腫瘤免疫中的作用和地位,但由于B7-H4受體尚未克隆,關(guān)于其受體的研究較少,本課題組通過腹水誘生法用表達B7-H4受體的扁桃體細胞去免疫小鼠,從而得到了抗B7-H4受體的單克隆抗體10A10。本研究主要利用抗B7-H4受體的抗體10A10,通過其與B7-H4受體的特異性結(jié)合,研究B7-H4受體的表達與肺癌臨床指征的關(guān)聯(lián)性。主要通過檢測肺癌細胞株和肺癌組織中B7-H4受體的表達來明確B7-H4受體在細胞和組織中的表達,另一方面,通過對肺癌組織芯片進行免疫組化研究,建立B7-H4受體表達與肺癌臨床表現(xiàn)的關(guān)聯(lián),以期為肺癌的臨床診斷與治療提供一種方向。一、采用抗B7-H4受體的抗體10A10檢測B7-H4受體在肺癌細胞株H1299和A549以及肺癌組織中的表達【目的】檢測肺癌細胞株H1299和A549中B7-H4受體的表達;檢測B7-H4受體在肺癌和癌旁組織中的表達,為下一步實驗做準備。【方法】利用抗B7-H4受體的抗體10A10,通過流式細胞術(shù)檢測B7-H4受體在肺癌細胞株H1299和A549中的表達情況。通過細胞爬片,利用細胞染色檢測B7-H4受體在細胞中的表達和定位。利用免疫組化的方法,檢測B7-H4受體在肺癌組織和癌旁組織的不同表達和其表達的定位�！窘Y(jié)果】流式結(jié)果顯示,B7-H4受體在肺癌細胞株H1299和A549中均有表達,且其在兩種細胞中的表達有差異,B7-H4受體在A549中的表達略強于H1299,為57%,在H1299中的表達為40%。細胞染色結(jié)果顯示,A549的染色強于H1299,與流式的檢測結(jié)果一致。此外,通過細胞染色可以發(fā)現(xiàn),B7-H4受體在H1299和A549中的表達主要定位在細胞核和細胞漿。肺癌和癌旁組織的免疫組化結(jié)果顯示,B7-H4受體在組織中均有表達,主要定位在細胞核和細胞漿,且癌組織的著色明顯強于癌旁組織。【結(jié)論】B7-H4受體在肺癌細胞株H1299和A549以及肺癌組織中均有表達,且主要表達在細胞核和細胞漿中。二、采用抗B7-H4受體的抗體10A10檢測B7-H4受體在肺腺癌組織芯片中的表達并分析其與臨床指標的關(guān)聯(lián)性【目的】檢測B7-H4受體在肺癌和癌旁組織中的表達并分析其與肺癌病人臨床病理參數(shù)的關(guān)聯(lián)性。【方法】購買肺腺癌病人的150點組織芯片。其中,肺癌組織為75點,癌旁組織為75點,且為一一對應。通過免疫組化的方法,檢測肺腺癌芯片組織中B7-H4受體的表達水平,并根據(jù)組織著色的陽性率和染色強度對其進行評分,利用SPSS軟件分析染色評分與病人病理參數(shù)的關(guān)聯(lián)性。【結(jié)果】免疫組化結(jié)果顯示,B7-H4受體主要表達在肺腺癌樣本的細胞漿和細胞核,其在肺腺癌癌組織和癌旁組織的表達有差異,且癌組織胞漿的表達強于癌旁組織胞漿的表達;癌組織胞核的染色也強于癌旁組織。關(guān)聯(lián)性分析顯示,B7-H4受體在癌組織與癌旁組織胞漿的表達具有相關(guān)性,且為正相關(guān);B7-H4受體在癌組織胞核的表達和癌旁組織胞核的表達呈現(xiàn)正相關(guān);此外,B7-H4受體在癌組織胞核的表達和患者性別、臨床分期相關(guān);癌旁組織胞核的表達和患者性別相關(guān)。生存分析顯示,在單因素分析中,B7-H4受體在癌組織和癌旁組織的表達都與病人的預后相關(guān)。另外,腫瘤大小、T分期、N分期、臨床分期也分別和病人的預后顯著相關(guān)。多因素分析中,B7-H4受體在癌組織胞核中的表達和腫瘤大小可以作為病人獨立的預后因素。【結(jié)論】B7-H4受體在肺腺癌中的表達和病人的預后相關(guān),并且其在病人組織胞核中的表達和腫瘤大小可作為獨立的預后因素之一。
【學位單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R392
【部分圖文】：

培養(yǎng) 48h 后，CD25Foxp3T 細胞在 CD4T 細胞中的比例升高[24]，這4 可促進調(diào)節(jié)性 T 細胞的增殖。在腫瘤微環(huán)境中，腫瘤組織中高表達的 B7-H4 分子導致 CD3+和 CD8+的淋巴細胞(TAL)數(shù)目顯著減少[25]，高表達 B7-H4 的腫瘤相關(guān)巨噬細胞(T瘤微環(huán)境中也可以顯著地阻抑 CD8+T 細胞的活化和增殖功能[26]，從而細胞在機體中轉(zhuǎn)移和生長[27]。當運用 siRNA 干擾技術(shù)沉默 TAM 上 達后，對 CTL 的這種抑制效應不再顯現(xiàn)。在腫瘤微環(huán)境內(nèi)，B7-H4 能通過在不同細胞成分的選擇性表達從而抑制性 T 細胞的活化和增殖。B7-H4 的其他作用還包括阻滯細胞毒性 T 淋巴)細胞周期進展和減少細胞因子的產(chǎn)生。B7-H4 通過以上途徑負性調(diào)節(jié) T疫應答。B7-H4 分子異常表達可使機體對腫瘤的免疫監(jiān)視作用減弱，從瘤免疫逃逸。此外，有研究發(fā)現(xiàn) B7-H4 還可通過抑制中性粒細胞的前體從而抑制固有免疫應答，進一步促進腫瘤細胞免疫逃逸的發(fā)生。

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 荊心研;盧兆蓮;張婷;胡成進;;基于MALDI-TOF-MS技術(shù)建立肺腺癌診斷預測模型及其初步驗證[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2018年09期

2 王斌;張雨潔;;肺腺癌的治療現(xiàn)狀[J];世界最新醫(yī)學信息文摘;2018年45期

3 汪向海;潘賢慧;邢敏;;外周血血小板/淋巴細胞比值在肺腺癌診斷中的價值[J];皖南醫(yī)學院學報;2018年06期

4 朱嬋艷;瞿冀琛;曹海霞;朱佩;陳光榆;顏士巖;范建高;;非酒精性脂肪性肝病與原發(fā)性支氣管肺腺癌發(fā)生的相關(guān)性研究[J];實用肝臟病雜志;2016年06期

5 張靜;馮瑞娥;梁智勇;;直徑小于等于3cm的肺腺癌臨床病理特點分析及臨床實踐[J];中華肺部疾病雜志(電子版);2016年06期

6 劉洋;鐘聲逸;何綺華;張劍嶸;陳學煒;郭敏章;何建行;;Ⅰ期肺腺癌VATS肺葉切除與亞肺葉切除預后比較[J];中國肺癌雜志;2017年01期

7 孫婷;金晨宇;;肺腺癌術(shù)后早期復發(fā)的影響因素分析[J];實用腫瘤雜志;2017年04期

8 王云;廖江榮;李桂鳳;朱麗萍;;肺腺癌子宮內(nèi)膜轉(zhuǎn)移1例報道[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2017年20期

9 黃方;潘學誼;王宏;劉亞楠;關(guān)則兵;郭煜;李銘杰;曾文彬;徐之龍;;蛋白質(zhì)Z在肺腺癌的表達及其臨床意義[J];重慶醫(yī)學;2015年36期

10 曲楊;張海青;韋立新;;含黏液的肺腺癌研究進展[J];診斷病理學雜志;2016年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 畢建平;魏學燕;張用;皮國良;郭小芳;周曉藝;胡德勝;韓光;;肺腺癌EGFR突變與顱外轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究[A];第九屆中國腫瘤學術(shù)大會暨第十五屆海峽兩岸腫瘤學術(shù)大會論文集[C];2016年

2 李曉琴;周欣;劉春玲;;新疆維、漢民族肺腺癌EGFR基因突變分析[A];中華醫(yī)學會臨床藥學分會2014年全國學術(shù)會議論文匯編[C];2014年

3 袁明遠;;周圍型肺腺癌病灶的放射學分類及其臨床價值[A];中華醫(yī)學會第16次全國放射學學術(shù)大會論文匯編[C];2009年

4 顧國浩;;生物芯片在肺腺癌診斷中的應用進展[A];中華醫(yī)學會第八次全國檢驗醫(yī)學學術(shù)會議暨中華醫(yī)學會檢驗分會成立30周年慶典大會資料匯編[C];2009年

5 邵艷;洪偉俊;寧允葉;胥武劍;李強;;肺腺癌惡性轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白的初步篩查[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術(shù)會議）論文匯編[C];2011年

6 夏和順;;國際肺腺癌多學科分類介紹[A];第22屆湖北省腫瘤學術(shù)大會論文匯編[C];2012年

7 王恩華;;解讀及評價國際多學科肺腺癌分類[A];2012年浙江省病理學學術(shù)年會論文集[C];2012年

8 董瑜;李營;彭紅;金波;黃艾彌;白皓;熊慧;韓寶惠;;EGFR突變狀態(tài)對可手術(shù)切除的肺腺癌患者復發(fā)及生存的預測價值[A];第13屆全國肺癌學術(shù)大會論文匯編[C];2013年

9 宋正波;朱慧能;郭振英;吳偉;孫文勇;張沂平;;肺腺癌新分類在預測Ⅰ期非小細胞肺腺癌預后中的價值[A];第13屆全國肺癌學術(shù)大會論文匯編[C];2013年

10 孫強;顧春東;雷霆;王金;李錦繡;;浸潤性周圍型小肺腺癌(≤2cm)不同病理亞型的比較[A];第13屆全國肺癌學術(shù)大會論文匯編[C];2013年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 丁香;日發(fā)現(xiàn)肺腺癌的預測因子[N];中國醫(yī)藥報;2007年

2 仇逸邋孫國根;吸煙丈夫的妻子,患肺腺癌風險高[N];新華每日電訊;2007年

3 曾理;肺腺癌早診研究關(guān)注“起源”[N];健康報;2008年

4 記者 李天舒　胡德榮;為何不吸煙者也患肺癌[N];健康報;2010年

5 本報記者 孔同;肺腺癌13個突變基因首次公布[N];解放日報;2016年

6 高原;或與MiR-21分子有關(guān)[N];廣東科技報;2009年

7 杜傳信　山東省臨沂市人民醫(yī)院;被誤診為肋間神經(jīng)痛的肺腺癌[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2011年

8 中國婦女報·中國女網(wǎng)記者 彭蕓;女性大多不吸煙為何也會得肺癌？[N];中國婦女報;2017年

9 記者 胡德榮;非吸煙肺腺癌人群致癌基因突變譜建立[N];健康報;2011年

10 ;三氧化二砷對肺腺癌化學治療敏感性的影響及其機制[N];中國醫(yī)藥報;2003年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 張琪;肺腺癌患者EGFR和MET酪氨酸激酶抑制劑耐藥突變的功能學研究[D];南方醫(yī)科大學;2018年

2 趙志洪;加權(quán)基因共表達網(wǎng)絡分析（WGCNA）探索肺腺癌中的功能基因模塊[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2017年

3 馬偉;肺腺癌不同驅(qū)動基因相關(guān)性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2017年

4 李航;吸煙肺腺癌患者靶向治療相關(guān)基因突變譜研究[D];復旦大學;2013年

5 楊繼要;肺腺癌腫瘤相關(guān)抗原的篩選鑒定及克隆表達[D];鄭州大學;2006年

6 趙鑫;肺腺癌A549紫杉醇耐藥細胞株建立以及新型紫杉烷類化合物多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用及機制研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2004年

7 劉亞嵐;水通道蛋白3在人體多種器官正常和癌組織中的表達及意義[D];中國醫(yī)科大學;2007年

8 程萬宏;Wnt-1基因和nm23-H_1基因在肺腺癌中的表達及siRNA抑制Wnt-1基因?qū)θ朔蜗侔┘毎闍2的影響[D];中國醫(yī)科大學;2007年

9 高杰;肺腺癌臨床病理預后因素及相關(guān)分子靶向研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2014年

10 孫正亮;肺腺癌的分子分型特征及其與病理分型的關(guān)聯(lián)研究[D];復旦大學;2014年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 龍春歡;bFGF、Vasohibin-1、USE1在肺腺癌中的表達及臨床意義[D];河北北方學院;2018年

2 袁滿;B7-H4受體的抗體10A10在肺腺癌研究中的應用[D];蘇州大學;2018年

3 肖楠;~(18)F-FDG PET-CT相關(guān)代謝參數(shù)對于肺腺癌患者EGFR突變狀態(tài)的預測價值[D];中國醫(yī)科大學;2018年

4 耿羽智;肺腺癌EGFR基因突變臨床特征、CT征象及腫瘤標記物相關(guān)性研究[D];中國醫(yī)科大學;2018年

5 常利名;肺腺癌EGFR基因突變與臨床病理特征及CT征象的相關(guān)性研究[D];河北醫(yī)科大學;2018年

6 張晶;早期肺腺癌低劑量CT定量測量指標及影像組學特征與病理的相關(guān)研究[D];河北醫(yī)科大學;2018年

7 趙星丞;雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶-1在肺腺癌組織中的表達與預后的相關(guān)性研究[D];中國醫(yī)科大學;2018年

8 孫宇;EGFR基因、Ki-67蛋白在含微乳頭結(jié)構(gòu)肺腺癌中的表達及臨床相關(guān)性分析[D];河北大學;2018年

9 王紹淳;肺腺癌臨床病理特征與EGFR、KRAS基因突變的關(guān)系研究[D];河北醫(yī)科大學;2018年

10 鄧佳;長鏈非編碼RNA NEAT1在肺腺癌患者血清中的表達及其臨床意義[D];河北醫(yī)科大學;2018年

本文編號：2818237