【摘要】：作為一種擁有多潛能功能的干細胞,神經(jīng)干細胞(neural stem cells,NSCs),在各個時期的中樞神經(jīng)系統(tǒng)中,均可以維持自我更新增殖的能力,從而具備干性;在胚胎發(fā)育階段和成年時期的腦中均能啟動分化從而形成神經(jīng)元、星形膠質細胞以及少突膠質細胞等具有不同功能、成熟的神經(jīng)細胞。目前,NSCs的自我更新、分化命運轉變與決定機制是干細胞生物學基礎研究中最重要的科學問題。NSCs的自我增殖能力、干性維持能以及向分化命運的啟動,是通過對不同時期、階段特定的轉錄因子的基因表達進行調控而實現(xiàn)的。因此,如何準確的對調控NSCs自我更新能力、以及對決定分化命運轉換分子機制的確定,從而為胚胎期神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育異常以及成體神經(jīng)系統(tǒng)疾病的預防、治療提供一定的幫助,這方面的相關研究成為神經(jīng)干細胞領域中的一個重要的科學問題。NSCs在受到分化信號刺激時可以表達分化命運決定因子MAP2、GFAP和NG2等,從而退出細胞周期失去干性,分化發(fā)展成為多種形態(tài)、不同功能的成熟的神經(jīng)細胞。大量研究發(fā)現(xiàn),在細胞生命活動過程中,大部分蛋白質只有經(jīng)過翻譯后的修飾加工才能具有生物活性,從而參與細胞內的各種生命活動。棕櫚�；庸ば揎椬饔�,是細胞內蛋白質翻譯后最重要的修飾加工方式的一種。目前的研究中,一些關于棕櫚�；牡鞍踪|組學、關于具有棕櫚�；D移酶功能的DHHC家族的研究結果,暗示細胞內蛋白質翻譯后的棕櫚酰化修飾加工水平,在各時期神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育過程中和相關神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)病過程中,可能有著重要的調控作用。因而,明確細胞內蛋白翻譯后的棕櫚酰化修飾加工,在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程(神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育缺陷)以及成體神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)生過程中的作用,及其內在分子水平的調控機制,已經(jīng)成為近年來神經(jīng)生物科學相關領域的研究熱點。本研究中,我們通過體外培養(yǎng)的小鼠胚胎神經(jīng)干細胞模型,利用棕櫚酰轉移酶抑制劑—2-溴棕櫚酸(2-bromopalmitate),來探討細胞內蛋白翻譯后的棕櫚酰化修飾加工作用在胚胎發(fā)育時期神經(jīng)干細胞中的功能作用及有關的內部分子機制。第一部分2-溴棕櫚酸對小鼠胚胎神經(jīng)干細胞增殖、分化的影響關于棕櫚�；南嚓P研究中證實,高濃度的2-溴棕櫚酸會產(chǎn)生細胞毒性誘導細胞凋亡,而低濃度對細胞活力沒有明顯的影響,本研究中實驗組均采用低濃度的2-溴棕櫚酸:10 μM。關于棕櫚�；绊懮窠�(jīng)干細胞NSCs增殖方面的研究,首先在增殖培養(yǎng)條件下,利用倒置相差顯微鏡,觀察小鼠胚胎神經(jīng)干細胞的大體形態(tài)有無變化,結果顯示,2-溴棕櫚酸處理組中神經(jīng)球(神經(jīng)干細胞自然增殖形成的球狀結構)的形態(tài)和致密度等,與對照組相比,均沒有明顯的改變;用MTT實驗的方法檢測小鼠胚胎神經(jīng)干細胞的細胞活度,結果顯示:增殖培養(yǎng)1天、2天、3天和5天,處理組中神經(jīng)干細胞的活力,與對照組相比,沒有顯著的統(tǒng)計學差別;采取神經(jīng)干細胞NSCs貼壁培養(yǎng)的模式,利用蛋白免疫熒光染色的實驗技術,結果發(fā)現(xiàn),2-溴棕櫚酸處理組中,神經(jīng)干細胞的標記物蛋白Nestin,以及干性維持標記物蛋白Sox2的表達,與對照組相比,沒有顯著的統(tǒng)計學差別;與此同時,利用Western blot的實驗技術對小鼠胚胎神經(jīng)干細胞標記物蛋白Nestin和Sox2的表達量進行檢測,結果與免疫熒光實驗結果是非常一致的,處理組中Nestin蛋白和Sox2蛋白的表達量與對照組比較,沒有明顯的統(tǒng)計學差異。以上實驗結果表明,2-溴棕櫚酸對小鼠胚胎神經(jīng)干細胞的增殖,沒有產(chǎn)生明顯的影響。為了探究蛋白質翻譯后的棕櫚酰化修飾加工作用在神經(jīng)干細胞NSCs進入分化階段后的有關影響,首先采用免疫熒光染色技術,以檢測與神經(jīng)干細胞分化成熟為成熟細胞相關的標記物蛋白:MAP2、GFAP和NG2等的表達與分布情況。實驗結果顯示,2-溴棕櫚酸處理組中分化成熟的神經(jīng)元、星形膠質細胞和少突膠質細胞數(shù),與對照組相比,明顯減少,并且具有顯著的統(tǒng)計學差異。繼續(xù)利用Western Blot技術,檢測神經(jīng)干細胞分化相關標記物蛋白:MAP2、GFAP和NG2的表達水平,實驗結果顯示,與對照組相比,2-溴棕櫚酸處理組中MAP2、GFAP和NG2等的蛋白水平均呈現(xiàn)出明顯的下調。繼續(xù)利用qRT-PCR技術,檢測相關神經(jīng)干細胞分化命運決定因子水平,來印證2-溴棕櫚酸對神經(jīng)干細胞分化的影響,結果顯示,與對照組相比,2-溴棕櫚酸處理組中分化命運決定因子NeuroDl、GFAP、0lig2等mRNA的表達受到明顯抑制。既然,NSCs的細胞分化是與分化命運決定相關轉錄因子息息相關,由此可以同時借助多種實驗技術對NSCs相關的因子進行檢測。通過免疫熒光染色技術,與對照組相比,2-溴棕櫚酸處理組中神經(jīng)干細胞標記物蛋白Nestin和干性維持標記物蛋白Sox2獲得持續(xù)性的高表達,同時,qRT-PCR結果顯示,與增殖相關的多潛能因子Sox2、Nestin mRNA亦獲得持續(xù)性的高表達。這些結果提示,在分化培養(yǎng)條件下,小分子化合物2-溴棕櫚酸,通過抑制與神經(jīng)干細胞分化命運決定相關因子的表達,促進自我更新增殖相關因子的表達,從而抑制了小鼠胚胎神經(jīng)干細胞分化命運的發(fā)生。第二部分2-溴棕櫚酸影響小鼠胚胎神經(jīng)干細胞分化命運轉換的機制研究為了揭示2-溴棕櫚酸影響小鼠胚胎神經(jīng)干細胞分化的內在的分子調節(jié)機制,首先利用TUNEL染色技術檢測2-溴棕櫚酸是否通過促進分化期神經(jīng)干細胞凋亡而導致分化相關因子的表達減少,結果顯示,2-溴棕櫚酸處理組中小鼠胚胎神經(jīng)干細胞凋亡的數(shù)量有一定的減少,但是在統(tǒng)計學上沒有顯著的差異。這表明2-溴棕櫚酸對分化期的神經(jīng)干細胞命運的影響不是由促進凋亡引起的。第一部分中免疫熒光染色技術實驗和qRT-PCR技術檢測結果顯示,與對照組相比,2-溴棕櫚酸處理組中神經(jīng)干細胞干性維持相關因子Nestin和Sox2在蛋白水平和mRNA水平均獲得持續(xù)性的高表達,說明2-溴棕櫚酸是通過促進分化期神經(jīng)干細胞的增殖,從而抑制其分化的發(fā)生。接下來,通過一系列的相關技術實驗檢測,來再次印證這個結論。首先采用MTT的實驗技術檢測2-溴棕櫚酸對分化時期神經(jīng)干細胞活力的影響作用,結果顯示,2-溴棕櫚酸處理組中,MTT值隨著分化天數(shù)的延長呈現(xiàn)出明顯的增長,具有顯著的統(tǒng)計學差異。同時利用BrdU摻入法印證分化期神經(jīng)干細胞命運的改變,結果與MTT實驗變化相一致,2-溴棕櫚酸處理組中,BrdU陽性的細胞數(shù)量明顯增加,具有統(tǒng)計學顯著差異。以上實驗結果證明,2-溴棕櫚酸導致小鼠胚胎神經(jīng)干細胞的分化命運被抑制,增殖能力得到提高。干細胞在接受到分化信號的刺激后,首先得退出細胞周期,然后才能表達分化相關的因子,開始進入細胞分化的狀態(tài)。既然實驗結果顯示2-溴棕櫚酸抑制了小鼠胚胎神經(jīng)干細胞的分化,接下來利用細胞流式技術(FACS)檢測分化階段神經(jīng)干細胞細胞周期的變化。小鼠胚胎神經(jīng)干細胞分化培養(yǎng)5天,經(jīng)FACS實驗技術檢測并分析,結果顯示,對照組中的神經(jīng)干細胞主要分布于G0/G1期(分裂間期);而2-溴棕櫚酸處理組中,處于G0/G1期(分裂間期)的神經(jīng)干細胞數(shù)目卻顯著減少,處于S期(有絲分裂期)的神經(jīng)干細胞數(shù)目明顯增多。與此同時,采用qRT-PCR的實驗技術,檢測與神經(jīng)干細胞分化相關的多種CKIs(細胞周期依賴激酶抑制因子)表達情況,用來闡明2-溴棕櫚酸阻礙神經(jīng)干細胞細胞周期退出的內在相關分子機制。結果顯示,,2-溴棕櫚酸處理組中,與分化相關的CKIs因子P21、P27與P57的表達在分化培養(yǎng)24h時即受到明顯抑制,而細胞周期增殖標記物Ki67一直維持在高水平表達。以上實驗結果表明,2-溴棕櫚酸可下調小鼠胚胎神經(jīng)干細胞分化期相關CKIs家族因子P21、P27與P57等的表達水平,從而使細胞周期的退出受阻,進而抑制神經(jīng)分化的發(fā)生;通過上調增殖相關因子Ki67的表達,從而使處于分化狀態(tài)下的小鼠胚胎神經(jīng)干細胞,自我更新增殖能力獲得明顯提高。第三部分2-溴棕櫚酸影響小鼠胚胎神經(jīng)干細胞分化的表觀遺傳學研究由第二部分實驗得知,在神經(jīng)干細胞分化過程中,2-溴棕櫚酸處理組中分化相關CKIs因子的mRNA表達減少,這表明2-溴棕櫚酸是通過在轉錄水平上抑制分化相關因子的表達,從而抑制神經(jīng)干細胞的分化并促進其干性維持。在本質上,細胞內基因在轉錄水平上表達的強弱,與其染色質的開放程度有密切關聯(lián),即DNA的雙鏈結構與組蛋白結合的緊密程度有關。因此,首先利用透射電鏡(Transmission Electron Microscope,TEM,用于觀察細胞內的超微結構),觀察細胞核內染色質的形態(tài)變化,結果顯示,對照組中神經(jīng)干細胞的核內染色質結構較為松散,為處于轉錄活躍狀態(tài)的常染色質形態(tài),而2-溴棕櫚酸組中染色質卷曲折疊成致密的團塊,為處于轉錄抑制狀態(tài)的異染色質形態(tài)。利用DNase Ⅰ酶切法檢測染色質的開放程度及其與DNA的結合能力,結果發(fā)現(xiàn)2-漠棕櫚酸處理組中與分化相關的NeuroD1、GFAP與0lg2啟動子片段完整性較好,而與增殖相關的Sox2啟動子片段與對照組沒有顯著差異。暗示2-溴棕櫚酸抑制分化過程中染色質的重塑過程與分化相關基因(NeuroDl、GFAP與Olg2)的轉錄激活。目前研究發(fā)現(xiàn),染色質的開放程度與組蛋白的翻譯后修飾加工水平有關,主要涉及組蛋白的甲基化和乙酰化程度。利用Western Blot技術對分化期小鼠胚胎神經(jīng)干細胞內,組蛋白H3的甲基化和乙酰化水平同時進行檢測,結果顯示,與對照組相比,2-溴棕櫚酸處理組神經(jīng)干細胞中組蛋白H3的甲基化水平,沒有出現(xiàn)明顯的差異;而對于組蛋白H3的乙�；絹碚f,卻出現(xiàn)了顯著下降的情形。進一步采用免疫熒光染色的實驗技術、染色質免疫共沉淀的實驗技術(ChIP,chromatinimmunoprecipitation)等,印證 2-溴棕櫚酸對分化階段神經(jīng)干細胞內組蛋白H3(具有HAT活性的CBP/P300修飾的下游目標物)乙酰化水平的影響作用。結果發(fā)現(xiàn),2-溴棕櫚酸處理組中,組蛋白H3乙酰化陽性的神經(jīng)干細胞數(shù)與組蛋白H3的乙�；矫黠@降低,乙酰化的組蛋白H3與命運決定因子NeuroD1、GFAP、0lig2轉錄復合物水平亦受到明顯抑制,但是Sox2卻沒有明顯變化。已知,P300與CBP是乙酰化轉移酶的主要執(zhí)行者,并且參與調控多種多潛能干細胞的命運決定過程。因此,首先檢測2-溴棕櫚酸對細胞內CBP/p300蛋白表達量的影響,Western blot結果顯示,實驗組與對照組沒有明顯的統(tǒng)計學差異。把細胞裂解后,針對P300與CBP,分別使用P300與CBP乙�；贵w,利用免疫共沉淀技術,檢測其HAT活性,分析發(fā)現(xiàn),與對照組相比,2-溴棕櫚酸處理組中P300與CBP的HAT活性均受到顯著抑制。這些結果進一步證實2-溴棕櫚酸通過下調P300和CBP的乙�；D移酶活性從而維持小鼠胚胎神經(jīng)干細胞增殖潛能并抑制其分化進程。第四部分2-溴棕櫚酸影響組蛋白乙�；D移酶CBP/P300活性的分子機制研究2-溴棕櫚酸作為棕櫚酰轉移酶抑制劑,尚未發(fā)現(xiàn)其對乙酰化轉移酶活性的直接調控作用。因此,首先從棕櫚�；揎椊嵌妊芯�2-溴棕櫚酸對P300和CBP乙酰轉移酶活性的調節(jié)作用機制。經(jīng)CSS-Pa14.0軟件分析發(fā)現(xiàn),P300和CBP并沒有典型的棕櫚酰化修飾位點,暗示2-溴棕櫚酸可能并不是直接參與調控其功能。據(jù)相關研究已知核蛋白EID1,可以與P300/CBP結合并抑制其乙酰轉移酶活性,因此,轉而檢測EID1的相關指標。Western blot結果顯示,在2-溴棕櫚酸處理組中EID1表達顯著上調,并且免疫共沉淀結果亦顯示,2-溴棕櫚酸組中P300和CBP與EID1的復合物量明顯增多。轉染EIDlshRNA實驗結果挽救了 2-溴棕櫚酸介導的神經(jīng)分化抑制作用,分化相關因子(NeuroDl、GFAP、0lig2)表達增多。這些結果表明,2-溴棕櫚酸在神經(jīng)干細胞命運決定過程中通過上調EID1的蛋白水平從而降低P300和CBP乙酰轉移酶活性并抑制細胞分化進程。然而通過RT-PCR進一步分析發(fā)現(xiàn)2-溴棕櫚酸處理組EID1的mRNA水平?jīng)]有增加,EID1 mRNA在細胞質、細胞核的分布也無明顯差異,暗示2-溴棕櫚酸可能是通過維持EID1蛋白穩(wěn)定從而提高其蛋白水平。為了從棕櫚酰化修飾的角度揭示2-溴棕櫚酸的作用機制,利用CSS-Pal4.0軟件分析EID1的潛在棕櫚�；揎椢稽c,發(fā)現(xiàn)EID1擁有3個較為保守的棕櫚酸化修飾位點,分別為氨基酸8、123和152位置,因此,2-溴棕櫚酸可能通過調節(jié)其棕櫚�；揎椝綇亩绊懫渥罱K蛋白水平。(1)由于核蛋白EID1第123位的棕櫚�；揎椢稽c,緊鄰其第125位的泛素化修飾位點。因此,猜測可能是由于核蛋白EID1的棕櫚�；揎椨绊懥似浞核鼗男揎椝�,從而調控了其蛋白水平的高低。采用免疫共沉淀技術檢測EID1的泛素化水平,實驗結果發(fā)現(xiàn)內源性EID1在神經(jīng)分化階段會發(fā)生高水平的泛素化,而體外泛素化重構檢測發(fā)現(xiàn)2-溴棕櫚酸雖然改變了 EID1的泛素化水平,卻沒有明顯的影響EID1泛素化的發(fā)生。通過Western blot技術檢測加入蛋白酶體抑制劑MG132后神經(jīng)干細胞中EID1的表達量,結果EID1的表達量明顯增多,表明EID1的降解是通過蛋白酶體途徑實現(xiàn)的。(2)已知,作為脂質化修飾方式之一的棕櫚酰化修飾,可以在亞細胞水平(即細胞內各細胞器)調節(jié)底物蛋白的分布。利用免疫熒光技術檢測2-溴棕櫚酸對EID1在細胞內分布的影響,結果發(fā)現(xiàn)對照組中EID1主要分布在蛋白酶體,核內很少;而2-溴棕櫚酸處理組中,發(fā)現(xiàn)在細胞質、細胞核內均有大量的核蛋白EID1的分布。以上結果提示,2-溴棕櫚酸抑制了EID1降解的泛素化過程,提高其蛋白水平,并提高了 EID1的核轉移分布。2-溴棕櫚酸作為已知的蛋白質棕櫚�；种苿�,有可能是通過抑制核蛋白EID1的棕櫚酰化位點,從而影響其蛋白水平和亞細胞分布。接下來通過ABE法檢測神經(jīng)干細胞中核蛋白EID1的棕櫚酰化修飾水平,結果發(fā)現(xiàn)2-溴棕櫚酸導致EID1的棕櫚�；斤@著降低。綜和以上實驗結果,2-溴棕櫚酸通過抑制EID1的棕櫚�；�,降低其泛素化水平,減少降解,從而提高EID1的蛋白水平并促進其核轉移分布,導致CBP/P300的HAT活性降低,最終抑制了神經(jīng)分化的發(fā)生。結論神經(jīng)干細胞,作為一種具有多潛能功能的干細胞,其增殖、分化、發(fā)育與成熟是現(xiàn)代神經(jīng)生物學中的研究熱點問題之一。作為細胞內蛋白翻譯后的脂質化修飾加工方式之一,棕櫚�；�,在神經(jīng)發(fā)育過程中的作用及其內在的分子機制尚不清楚。本實驗通過建立體外的,小鼠胚胎神經(jīng)干細胞模型,利用2-溴棕櫚酸(一種小分子化合物,作為常用的棕櫚酰轉移酶抑制劑),來探討棕櫚�；揎椉庸ぴ谂咛ピ缙谏窠�(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程中的作用及其內在的分子機制。經(jīng)低濃度(10 μM濃度)的2-溴棕櫚酸處理后,小鼠胚胎神經(jīng)干細胞的增殖命運沒有發(fā)生明顯改變。但是,在小鼠胚胎神經(jīng)干細胞分化階段,實驗結果發(fā)現(xiàn),經(jīng)2-溴棕櫚酸(10μM濃度)處理后,處于分化狀態(tài)的神經(jīng)干細胞,因為細胞周期的退出受阻,進而導致神經(jīng)分化的過程受到抑制,而神經(jīng)干細胞的增殖情況卻保持在一定的高水平狀態(tài)。進一步的檢測結果顯示,與分化相關的細胞周期調節(jié)因子CKIs家族中P21、P27和P57的表達顯著降低。據(jù)已知研究結果發(fā)現(xiàn),在神經(jīng)干細胞的神經(jīng)分化過程中相關的CKIs家族因子的表達,取決于細胞內組蛋白H3和H4翻譯后的乙�；揎椉庸に�。經(jīng)過一系列關于組蛋白H3的乙�；瘷z測實驗、關于具有乙酰轉移酶活性CBP/p300的檢測實驗、關于可與CBP/p300結合并抑制其乙酰轉移酶活性的核蛋白EID1檢測實驗,結果顯示,2-溴棕櫚酸可能是通過抑制神經(jīng)干細胞核蛋白EID1的降解,從而提高其蛋白水平,高水平的EID1通過與CBP/p300結合進而抑制了CBP/p300的乙酰轉移酶活性。最終,研究表明,在小鼠胚胎神經(jīng)干細胞分化階段,2-溴棕櫚酸處理后,由于核蛋白EID1降解的減少,從而抑制細胞內CBP/p300的HAT(乙酰轉移酶)活性,降低了組蛋白H3的乙�；揎椝�,進而導致細胞核內,與分化相關的轉錄水平降低,CKIs家族因子表達減少,細胞周期的退出受到抑制,致使神經(jīng)分化命運決定因子的表達減少,而增殖相關命運決定因子表達增多,從而抑制了小鼠胚胎神經(jīng)干細胞的分化,提高其自我更新能力。這項研究證實了 2-溴棕櫚酸(一種小分子化合物)在小鼠胚胎神經(jīng)干細胞分化命運轉換過程中的作用,并深入揭示了其調控CBP/P300乙�；D移酶活性的分子機制。從組蛋白翻譯后修飾加工的角度,認識小分子化合物2-溴棕櫚酸對胚胎神經(jīng)干細胞自我更新及分化命運決定的內在調控機制。建立了多潛能因子、命運決定因子、表觀遺傳因子及蛋白修飾等在NSCs分化命運轉換階段的相互作用網(wǎng)絡。本研究為認識和研究NSCs的命運調控機制的基礎研究提供了新的線索,加深了對NSCs發(fā)育信號分子調控網(wǎng)絡的理解。并使得未來通過使用多種小分子化合物,來改變體內、體外細胞的命運,并且重塑所需細胞的功能成為可能,為多種疾病的治療提供幫助。創(chuàng)新性:1、本課題首次發(fā)現(xiàn)2-溴棕櫚酸抑制神經(jīng)干細胞向神經(jīng)元和神經(jīng)膠質分化。2、首次發(fā)現(xiàn)2-溴棕櫚酸通過抑制EID1的棕櫚�；�,降低其泛素化水平并減少蛋白降解,從而提高EID1的蛋白水平并促進其核轉移分布,EID1表達升高導致CBP/P300的HAT活性降低,最終抑制了神經(jīng)干細胞分化的發(fā)生。3.首次發(fā)現(xiàn)2-溴棕櫚酸調控神經(jīng)干細胞分化的直接作用靶點——EID1,為將來使用小分子化合物重塑細胞功能成為可能。示意圖如下:圖1:2-溴棕櫚酸通過抑制EID1的棕櫚�；�,降低其泛素化水平并減少蛋白降解,從而提高EID1的蛋白水平并促進其核轉移分布,a.EID1表達升高致使CBP/P300的HAT活性降低,最終抑制了神經(jīng)干細胞神經(jīng)分化的發(fā)生;b.正常情況下,EID1蛋白若被降解則對CBP/P300的HAT活性無影響,神經(jīng)干細胞將進行正常分化過程。
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R338
【圖文】：

圖１－１增殖培養(yǎng)條件下２－溴棕櫚酸對小鼠胚胎神經(jīng)干細胞的影響作用。Ａ倒逡逑置相差顯微鏡下神經(jīng)球的變化，與對照組相比，２－溴棕櫚酸組中神經(jīng)球的大體逡逑形態(tài)和致密度改變不明顯。標尺，２００咖。Ｂ邋ＭＴＴ實驗技術檢測增殖培養(yǎng)１天、逡逑２天、３天、５天的神經(jīng)干細胞的細胞活性變化，實驗組與對照組的細胞活力，逡逑在統(tǒng)計學上差異不明顯。ＣＮＳＣｓ免疫熒光染色結果顯示，２－溴棕櫚酸組中ＮＳＣｓ逡逑標記物Ｎｅｓｔｉｎ和千細胞特性維持標記物Ｓ0Ｘ２的表達與對照組沒有明顯的統(tǒng)計逡逑學差異。標尺，２０ｒｔｎ。Ｄ細胞增殖培養(yǎng)３天后，利用Ｗｅｓｔｅｒｎ邋ｂｌｏｔ實驗技術檢逡逑測神經(jīng)干細胞中干性標記物Ｎｅｓｔｉｎ和Ｓｏｘ２的蛋白表達水平變化，結果顯示，逡逑與對照組相比，２－溴棕櫚酸組Ｎｅｓｔｉｎ和Ｓｏｘ２的蛋白表達量均沒有明顯的統(tǒng)計逡逑學差異。逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１－１邋Ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋２ＢＲ０邋ｏｎ邋ｔｈｅ邋ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ＮＳＣｓ．邋（Ａ）逡逑

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2 王倩;范文濤;賀又舜;;地黃飲子含藥血清對胎鼠海馬神經(jīng)干細胞遷移的影響[J];中醫(yī)藥學報;2015年01期

3 呂文龍;趙玉;徐鐵軍;;星形膠質細胞對神經(jīng)干細胞分化的影響實驗研究[J];中國醫(yī)藥指南;2015年18期

4 王軍;劉增良;秦向英;劉洋;于海明;;IGF-1誘導神經(jīng)干細胞向少突膠質細胞分化的機制研究[J];人人健康;2016年22期

5 ;德揭示腦神經(jīng)細胞產(chǎn)生機制[J];生物學教學;2017年01期

6 ;美發(fā)現(xiàn)神經(jīng)干細胞為RNA提供高速通道[J];生物學教學;2017年05期

7 吳劍涓;蘇心;;腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子誘導缺氧神經(jīng)干細胞分化的作用研究[J];中華老年心腦血管病雜志;2013年04期

8 王亞周;Jennifer M.Plane;江鵬;;靜息和活化內源性成年神經(jīng)干細胞:身份確認與特性分析[J];醫(yī)學爭鳴;2012年02期

9 趙曉輝;黃瑾;;神經(jīng)干細胞應用及護理進展[J];中國美容醫(yī)學;2012年08期

10 邱英;邢智偉;曹冉華;蘇烏云;云升;;神經(jīng)干細胞治療難治性癲癇臨床研究[J];內蒙古醫(yī)學院學報;2012年05期

相關會議論文 前10條

1 姜靖;;神經(jīng)干細胞有助找回遺失的記憶:或能取自皮膚[A];《科學與現(xiàn)代化》2017年第1期（總第070期）[C];2017年

2 孫一睿;胡錦;王爾松;奚才華;姚海軍;;單層黏附培養(yǎng)技術在哺乳動物神經(jīng)干細胞體外穩(wěn)定增殖和多向分化中的應用[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經(jīng)外科醫(yī)師分會第四屆全國代表大會論文匯編[C];2009年

3 劉佳梅;;腦內皮細胞與神經(jīng)干細胞共培養(yǎng)促進神經(jīng)干細胞的遷移[A];中國解剖學會第十一屆全國組織學與胚胎學青年學術研討會論文匯編[C];2009年

4 于龍剛;李娜;姜彥;解鳳陽;張曉雯;;貓胚胎源性神經(jīng)干細胞的分離、培養(yǎng)及鑒定的研究[A];全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學術會議論文匯編[C];2012年

5 夏立廣;李仲榮;劉淼清;王永飚;朱利斌;趙一鳴;;兩種不同來源神經(jīng)干細胞的神經(jīng)遞質表達研究[A];2013年浙江省醫(yī)學會小兒外科學學術年會暨分會成立30周年慶典論文匯編[C];2013年

6 司銀楚;朱培純;程龍;吳海霞;許紅;;去皮層血管對成年大鼠腦內神經(jīng)干細胞的影響[A];解剖學雜志——中國解剖學會2002年年會文摘匯編[C];2002年

7 李學坤;郭安臣;左萍萍;;胎鼠海馬神經(jīng)干細胞的培養(yǎng)、鑒定及亞克隆[A];中國藥理學會第十屆全國神經(jīng)學術會議暨浙江省藥理學會2002年年會論文摘要集[C];2002年

8 李力;萬琪;;小鼠神經(jīng)干細胞培養(yǎng)及缺血神經(jīng)元對其增殖、分化的影響[A];中華醫(yī)學會第七次全國神經(jīng)病學學術會議論文匯編[C];2004年

9 戴毅;韓忠朝;;神經(jīng)干細胞研究進展及臨床前景展望[A];中國解剖學會第八屆組織學與胚胎學專業(yè)青年研討會論文集[C];2004年

10 徐群淵;;神經(jīng)干細胞的分離、純化和永生化[A];中國組織工程、干細胞與神經(jīng)再生學術會議論文集[C];2004年

相關重要報紙文章 前10條

1 記者 張建列 通訊員 黃博純;神經(jīng)干細胞分區(qū)分化調控機制研究獲進展[N];廣東科技報;2018年

2 記者 聶翠蓉;神經(jīng)干細胞為RNA提供高速通道[N];科技日報;2016年

3 記者 張建列 通訊員 朱丹萍;人尿可提取神經(jīng)干細胞[N];廣東科技報;2012年

4 孫國根;阻礙卒中后神經(jīng)干細胞再生的“元兇”被發(fā)現(xiàn)[N];中國醫(yī)藥報;2013年

5 特約記者 風云;我國科學家成功培養(yǎng)出體外神經(jīng)干細胞[N];北京科技報;2001年

6 鄭屠編譯;干細胞公司股票暴漲[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

7 孫國根　白毅;靈長類腦內神經(jīng)干細胞被發(fā)現(xiàn)[N];中國醫(yī)藥報;2011年

8 嚴志明 肖鑫;恢復腦神經(jīng)功能有望[N];新華每日電訊;2000年

9 時仲省 高思敏 溫廷勇;癱瘓病人重新站立不再遙遠[N];中國醫(yī)藥報;2001年

10 江山;腦發(fā)育不全癲癇病人有望獲治[N];中國醫(yī)藥報;2001年

相關博士學位論文 前10條

1 杜昭霞;2-溴棕櫚酸通過影響EID1蛋白表達調控神經(jīng)干細胞命運及機制研究[D];山東大學;2018年

2 于曉雯;神經(jīng)干細胞對缺血性卒中的保護機制研究[D];第二軍醫(yī)大學;2017年

3 沈雪莉;新生大鼠皮層神經(jīng)干細胞定向分化為神經(jīng)元過程中溶酶體與微管蛋白的相關性研究[D];中國醫(yī)科大學;2004年

4 姬西團;人與小鼠神經(jīng)干細胞生物學特性的比較研究[D];第四軍醫(yī)大學;2004年

5 林欣;大鼠骨髓基質細胞和神經(jīng)干細胞共同培養(yǎng)及顱內移植的實驗研究[D];天津醫(yī)科大學;2004年

6 趙慧英;神經(jīng)干細胞和皮膚干細胞的體外培養(yǎng)及誘導分化神經(jīng)細胞的研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2004年

7 胡昕華;Neurotrophin 3及其高親和力受體TrkC在神經(jīng)干細胞分化過程中的功能和機制研究[D];中國科學院研究生院（上海生命科學研究院）;2004年

8 張猛;VEGF基因修飾神經(jīng)干細胞在創(chuàng)傷性腦損傷中的作用[D];第三軍醫(yī)大學;2004年

9 邱克軍;Wnt-1、Pax-6在大鼠嘴側NSCs遷移流的發(fā)育學表達及對SVZa區(qū)NSCs體外分化的影響[D];第三軍醫(yī)大學;2004年

10 王德華;胚胎神經(jīng)干細胞移植防治骨骼肌失神經(jīng)萎縮的實驗研究[D];復旦大學;2004年

相關碩士學位論文 前10條

1 李冠沖;彌可保對缺氧狀態(tài)下神經(jīng)干細胞的影響及其機制的研究[D];山東大學;2018年

2 徐偉杰;關于CD133作為成纖維細胞轉分化為神經(jīng)干細胞篩選標記的研究[D];昆明理工大學;2017年

3 朱歡;小鼠神經(jīng)干細胞的分離與鑒定[D];廣西師范大學;2015年

4 陳龍;大鼠骨髓源神經(jīng)干細胞向血管內皮細胞樣細胞分化的實驗研究[D];青海大學;2017年

5 周秀;l（3）03670基因在果蠅神經(jīng)干細胞不對稱分裂中的分子機制研究[D];浙江大學;2013年

6 施嬋宏;神經(jīng)干細胞及bFGF對脊髓損傷的修復作用研究[D];蘇州大學;2004年

7 陳曦;神經(jīng)細胞攝取神經(jīng)干細胞外泌體途徑及其機制的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學;2015年

8 杜U

本文編號：2793003