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慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺組織誘導(dǎo)骨髓間充干細(xì)胞向肺泡上皮細(xì)胞分化的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-23 01:52
【摘要】:目的:參照Poppov的方法,構(gòu)建COPD大鼠模型肺組織單細(xì)胞懸液和大鼠BMSCs的體外非接觸共培養(yǎng)模型(如圖1所示)。觀察COPD大鼠模型肺組織對(duì)BMSCs向肺泡上皮細(xì)胞分化的影響,為BMSCs移植修復(fù)COPD病理損傷奠定理論依據(jù)。方法:將大鼠肺組織單細(xì)胞懸液與P3BMSCs在Transwell小室中共培養(yǎng)。如圖1所示,BMSCs置于下室,實(shí)驗(yàn)分組設(shè)計(jì):實(shí)驗(yàn)組A:COPD大鼠模型肺組織單細(xì)胞懸液+BMSCs;實(shí)驗(yàn)組B:正常大鼠肺組織單細(xì)胞懸液+BMSCs;對(duì)照組:BMSCs單獨(dú)靜置培養(yǎng)。共培養(yǎng)10天后,檢測(cè)BMSCs的SP-C、AQP-5蛋白和m RNA表達(dá)情況。結(jié)果:1.COPD造模組大鼠不喜動(dòng),可聞及喘鳴,肺組織外觀膨脹且蒼白,彈性差,指壓后有壓痕。支氣管黏膜上皮部分脫落,炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯;肺泡腔不規(guī)則擴(kuò)大,間隔變窄、斷裂,可見肺大皰;肺血管壁增厚。單位面積內(nèi),COPD造模組的MAN小于健康對(duì)照組,而MLI大于健康對(duì)照組,差異均具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。2.實(shí)驗(yàn)組A下室中BMSCs形態(tài)由長(zhǎng)梭形逐漸發(fā)生鋪路石樣改變,類似于上皮細(xì)胞形態(tài)。實(shí)驗(yàn)組B和對(duì)照組的BMSCs仍呈長(zhǎng)梭形。3.與實(shí)驗(yàn)組B及對(duì)照組比較,實(shí)驗(yàn)組A中BMSCs的SP-C、AQP-5的蛋白和m RNA表達(dá)均升高,差異均具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。4.隨著共培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)組A中BMSCs的SP-C、AQP-5蛋白和m RNA表達(dá)均呈增長(zhǎng)趨勢(shì),差異均具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:1.LPS氣管注入法結(jié)合熏煙的方法可構(gòu)建COPD大鼠模型。2.本實(shí)驗(yàn)成功建立COPD大鼠模型肺組織與BMSCs的非接觸共培養(yǎng)模型。3.COPD大鼠模型肺組織體外可誘導(dǎo)BMSCs分化為肺泡上皮細(xì)胞。
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R563.9;R-332
【圖文】:

模型圖,模型圖,肺泡,肺組織


體外共培養(yǎng)模型圖MSCs單獨(dú)靜SP-C

大鼠,肺臟,對(duì)照組


對(duì)照組大鼠(左)和造模組大鼠(右)肺臟

對(duì)照組,HE染色,大鼠,肺臟


對(duì)照組大鼠肺組織HE染色(x400)

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