本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)TrkC神經(jīng)干細(xì)胞聯(lián)合膠原支架對創(chuàng)傷性腦損傷大鼠模型治療作用的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景和目的外傷性腦損傷(traumatic brain injury, TBI)會造成嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙,目前仍沒有有效的臨床治療能逆轉(zhuǎn)TBI病理進(jìn)程。近年來很多臨床前研究表明干細(xì)胞移植治療在動物TBI中顯示出良好的效果。另一些研究認(rèn)為NT-3和生物支架能促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞增殖及神經(jīng)元分化。本研究嘗試用神經(jīng)干細(xì)胞聯(lián)合結(jié)合NT-3的膠原材料治療中度TBI大鼠,重點(diǎn)驗(yàn)證干細(xì)胞及膠原材料聯(lián)合移植的可行性,并觀察神經(jīng)干細(xì)胞在體內(nèi)增殖和分化成神經(jīng)元的情況。方法成年雄性SD大鼠,體重250 g,用Feeney自由落體打擊法造成中度TBI。將大鼠隨機(jī)分成四組：①TrkC-NSC+NT-3-collage組；②NSC+collage組；③NSC組；④生理鹽水組,每組6只大鼠。術(shù)后第7天移植神經(jīng)干細(xì)胞和膠原支架至大鼠腦損傷灶。用改良神經(jīng)功能缺失評分(mNSS)評價(jià)各組大鼠干細(xì)胞移植后1、7、14、21及28d的行為學(xué)表現(xiàn)。細(xì)胞移植前1d以及細(xì)胞移植后28d行micro-PET評估損傷灶代謝情況；細(xì)胞移植前2d以及細(xì)胞移植后27d行micro-MRI評估顱內(nèi)結(jié)構(gòu)；移植后2周行免疫組化GFP/bax/bcl-2/nestin/ki-67/βⅢ Tubulin。結(jié)果(1) TrkC基因重組腺病毒轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)的最適宜感染復(fù)數(shù)為100；轉(zhuǎn)TrkC神經(jīng)干細(xì)胞在體外TrkC基因明顯過表達(dá)。(2)神經(jīng)干細(xì)胞同膠原支架在體外共培養(yǎng)5d,熒光顯微鏡及掃描電鏡均顯示神經(jīng)干細(xì)胞同膠原支架附著良好,細(xì)胞間有突起連接。(3)在細(xì)胞移植14以后,TrkC-NSCs+NT-3-collagen組和NSCs+collage組行為學(xué)評分(mNSS)均比對照組明顯低(p0.05),TrkC-NSCs+NT-3-collagen組和NSCs+collage組之間評分無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。(4)大鼠腦外傷后4周,各組損傷灶代謝活性均降低,TrkC-NSCs+NT-3-collagen組損傷灶代謝活性最高。而NSCs+collage組損傷灶代謝活性也明顯較對照組/單純NSCs組高(p0.05)。(5)免疫組化結(jié)果：TrkC-NSCs+NT-3-collagen組GFP主要分布在損傷灶及周圍中,小部分向腦深部遷移；TrkC-NSCs+NT-3-collagen組損傷灶周圍bcl-2/nestin/ki-67/βⅢ Tubulin等染色陽性率均比對照組多。結(jié)論實(shí)驗(yàn)論證了TrkC-NSCs+NT-3-collagen在體外培養(yǎng)的可行性。對于遭受中度TBI的大鼠,TrkC-NSCs+NT-3-collagen聯(lián)合移植治療有效,可能同collage和NT-3促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞增殖及分化成神經(jīng)元有關(guān)。研究背景和目的多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(GBM)是最常見的原發(fā)惡性腦瘤,常規(guī)治療后預(yù)后較差,因此有必要探索新的治療手段來改善患者的預(yù)后。免疫療法,尤其是樹突狀細(xì)胞(DC)疫苗療法近幾年來發(fā)展迅速,有成為GBM患者新的輔助治療的潛力。我們對目前發(fā)表的相關(guān)臨床試驗(yàn)進(jìn)行了系統(tǒng)綜述。本研究的目的是探索DC疫苗治療有效性和安全性,主要關(guān)注并發(fā)癥、中位數(shù)總生存期(mOS)、中位無進(jìn)展生存期(mPFS)和生活質(zhì)量等方面。方法檢索Medline, Pubmed, CMCC, Google Scholar, Embase, Ovid, Cochrane等,追查所有納入研究的參考文獻(xiàn),檢索年限均從建庫檢索到2015年4月,將利用DC疫苗主動免疫治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤形成療效及安全性對比的臨床研究(CT)納入本項(xiàng)研究。評估參數(shù)為免疫反應(yīng)、影像學(xué)表現(xiàn)、中位PFS和中位OS。并發(fā)癥分為手術(shù)相關(guān)并發(fā)癥及疫苗相關(guān)并發(fā)癥。結(jié)果本綜述中共納入19個研究,共包含352名患者。自體腫瘤細(xì)胞致敏的DC疫苗能夠延長復(fù)發(fā)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(R-GBM) (71.6-138.0wks)及新診斷膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(N-GBM) (65.0-230.4 wks)患者的中位生存時間(mOS)。結(jié)論主動免疫治療,尤其是自體腫瘤細(xì)胞致敏的DC疫苗治療安全可行,具有延長GBM患者mOS和mPFS的潛力。需要更多的臨床試驗(yàn)進(jìn)一步揭示免疫療法作用。
【關(guān)鍵詞】：外傷性腦損傷 NT-3 神經(jīng)干細(xì)胞 膠原支架 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 免疫治療 樹狀突細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R651.15;R-332
【目錄】：

• 第一部分 轉(zhuǎn)TrkC神經(jīng)干細(xì)胞聯(lián)合膠原支架對創(chuàng)傷性腦損傷大鼠模型治療作用的實(shí)驗(yàn)研究4-29
• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 前言8-9
• 材料與方法9-18
• 1 材料9-12
• 2 方法12-18
• 結(jié)果18-25
• 1 轉(zhuǎn)TrkC基因神經(jīng)干細(xì)胞轉(zhuǎn)染復(fù)數(shù)M0I18
• 2 TrkC基因在NSCs中的表達(dá)18-19
• 3 NSCs+collagen體外共培養(yǎng)鑒定19-20
• 4 行為學(xué)評分20-21
• 5 Micro-PET21-22
• 6 Micro-MRI22
• 7 免疫組化22-25
• 討論25-26
• 1 膠原支架與干細(xì)胞移植25
• 2 NT-3與神經(jīng)干細(xì)胞移植25-26
• 3 移植方式與時機(jī)26
• 4 對行為學(xué)評分及代謝的影響26
• 結(jié)論26-27
• 參考文獻(xiàn)27-29
• 第二部分 樹狀突細(xì)胞為基礎(chǔ)的主動免疫療法治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的系統(tǒng)綜述29-45
• 中文摘要29-30
• ABSTRACT30-31
• 前言31
• 材料與方法31-32
• 1 檢索策略31-32
• 2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)32
• 3 療效及副反應(yīng)判定指標(biāo)32
• 結(jié)果32-34
• 1 納入文獻(xiàn)32
• 2 臨床研究特點(diǎn)32-33
• 3 治療效果評估33
• 4 安全性及并發(fā)癥33-34
• 結(jié)論34-35
• 附件35-43
• 參考文獻(xiàn)43-45
• 綜述膠質(zhì)母細(xì)胞瘤免疫治療研究進(jìn)展45-52
• 參考文獻(xiàn)50-52
• 英文縮略詞52-55
• 致謝55

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 高燕,孫駿謨,田志雄,吳光耀;大鼠自由落體腦外傷模型的制作[J];浙江創(chuàng)傷外科;2004年05期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 代榮曉;神經(jīng)營養(yǎng)因子3對神經(jīng)干細(xì)胞移植治療腦外傷保護(hù)作用的研究[D];四川大學(xué);2005年

  本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)TrkC神經(jīng)干細(xì)胞聯(lián)合膠原支架對創(chuàng)傷性腦損傷大鼠模型治療作用的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：276187