【摘要】：磷酸鈣納米顆粒憑借其良好的安全性和生物學特性,被廣泛地用于醫(yī)學治療和診斷領(lǐng)域。為了探索磷酸鈣納米顆粒作為疫苗佐劑的效果,本研究首先利用共沉淀的方式制備了八種不同磷鈣比(P/Ca=0.15/0.30/0.45/0.60/0.75/0.90/1.00/1.10)的磷酸鈣納米顆粒,這些顆粒的大小均在10 nm～100 nm之間,并且隨著P/Ca的增加,顆粒形態(tài)從近似球形狀逐漸變成長條的棒狀。其次,以VZVgE作為免疫原,在小鼠體內(nèi)證實了磷酸鈣納米顆粒具有佐劑效應(yīng)。同時通過體外細胞實驗初步認為其可能是通過促進抗原提呈細胞-樹突狀細胞的增殖和吞噬抗原的能力,或者是通過促進巨噬細胞產(chǎn)生TNF-α來發(fā)揮佐劑效果。緊接著,為了提升磷酸鈣納米顆粒的佐劑效應(yīng),使其引發(fā)的免疫應(yīng)答類型偏向于細胞免疫反應(yīng),本研究改變了磷酸鈣納米顆粒制備方法中磷元素的來源,用雙膦酸鹽(唑來膦酸和利塞膦酸)替代了 Na2HPO4·12H2O,制備了兩種新型的顆粒:唑來膦酸鈣和利塞膦酸鈣。在小鼠體內(nèi)評估實驗中也證明了這兩種顆粒具有更優(yōu)的佐劑效應(yīng)。最后,為了考察磷酸鈣納米顆粒作為佐劑在吸附顆�？乖瓡r是否會影響抗原的表位結(jié)構(gòu),本研究以HPV45 VLP作為模擬抗原進行考察,因此,本研究針對HPV45 VLP建立了一套免疫化學質(zhì)量分析方法用于抗原表位的檢測。實驗結(jié)果表明磷酸鈣納米顆粒、利塞膦酸鈣和唑來膦酸鈣顆粒作為疫苗佐劑吸附HPV45 VLP抗原后,幾乎不會影響HPV45 VLP表位的完整性。綜上所述,經(jīng)過一系列的實驗驗證,我們對磷酸鈣納米顆粒作為疫苗佐劑有了更深入的認識,這也為今后對其進行更加充分的研究和改造提供一定的基礎(chǔ)。
【學位授予單位】：廈門大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R392
【圖文】：

邐ＩＴｓ邐逡逑如硝酸鈣溶液），另一種是含有磷酸根離子的水溶液（例如淲酸氫二胺）。為了使逡逑最終制備得到的磷酸鈣納米顆粒在各項性質(zhì)中均具有較好的一致性（比如大小相逡逑近、形狀相似，以及晶體或非晶體的性質(zhì)保持一致），在兩種反應(yīng)試劑有效地混逡逑合時，控制好最適的反應(yīng)條件（比如混合時環(huán)境的ｐＨ、溫度、鈣離子及磷酸根逡逑離子的濃度、攪拌速度和攪拌時間）１２＇圖２顯示的是磷酸鈣納米顆粒常用的制逡逑備工藝的簡單示意圖。這種制備工藝的一大優(yōu)勢就是在生產(chǎn)過程中不需要添加有逡逑機溶劑。最近，Ｃａｓｔｒｏ等人１５４１在一個規(guī)模較大的內(nèi)消旋振蕩流反應(yīng)器中利用連續(xù)逡逑流沉淀法成功制備出了納米大小的羥基磷灰石（主要成分為磷酸鈣）。這種利用逡逑連續(xù)模式的制備方法有希望用于規(guī)模化的納米大小、物理化學性質(zhì)可控的羥基磷逡逑灰石的生產(chǎn)。邐？逡逑（邐＾邐ｒ邐＾逡逑

ＡＰＣｓ）攝取并遞呈，隨后促進抗原被運輸?shù)揭髁馨徒Y(jié)。雖然以磷酸鈣納米顆逡逑粒作為疫苗佐劑已經(jīng)被廣泛開發(fā)和測試，但是人們對其作為佐劑發(fā)揮作用的途徑逡逑仍然不是很清楚。圖３闡述的是磷酸鈣納米顆粒作為疫苗佐劑可能涉及的三種作逡逑用機制。逡逑３．１儲存庫效應(yīng)逡逑對于疫苗佐劑的作用機制研宄，儲存庫效應(yīng)應(yīng)該是最早被提出來的一個說法。逡逑Ｇｌｅｎｎｙ等人［７＜］首先提出了鋁鹽佐劑發(fā)揮佐劑效應(yīng)的作用機制是因為鋁鹽佐劑的逡逑儲存庫效應(yīng)。顆粒樣的材料基本上都能為抗原提供一個儲存空間，隨后不斷釋放逡逑出抗原，使抗原可以持續(xù)刺激機體的免疫系統(tǒng)，發(fā)揮更持久的免疫保護作用１７５］。逡逑目前也有許多佐劑，包括油包水乳液和納米樣顆粒，均被報道稱其能協(xié)助抗原刺逡逑１０逡逑

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1 ;訊快[J];國外醫(yī)學(微生物學分冊);1989年05期

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3 金人一;;瘧疾疫苗佐劑能改進rDNA疫苗[J];生物技術(shù)通報;1989年01期

4 那君;胡婧雯;楊小茜;胡敏娟;衡宇;路麗明;;細胞因子作為人類疫苗佐劑的研究進展[J];現(xiàn)代免疫學;2016年04期

5 羅燕;谷新利;李星艷;;中藥作為疫苗佐劑的研究概況[J];中國獸醫(yī)雜志;2009年08期

6 王妍,曹淑桂;人用疫苗佐劑的發(fā)展和應(yīng)用[J];中國生物制品學雜志;2005年03期

7 管孝鞠,吳玉章;人用疫苗佐劑的研究現(xiàn)狀[J];藥學進展;2001年04期

8 成學儉;;蜂膠——一種優(yōu)質(zhì)的動物疫苗佐劑[J];中國動物保健;2014年03期

9 劉芳;;疫苗佐劑的安全性評價[J];中國藥事;2010年06期

10 王曉娟;廖雪雁;;疫苗佐劑的研究進展[J];微生物學免疫學進展;2008年03期

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8 張?zhí)煨?王秀利;袁野;;DNA疫苗佐劑研究進展[A];2007年全國生化與生物技術(shù)藥物學術(shù)年會論文集[C];2007年

9 景志忠;蒙學蓮;房永祥;竇永喜;陳國華;才學鵬;;CpG DNA重組質(zhì)粒作為疫苗佐劑的生物安全性評價[A];中國畜牧獸醫(yī)學會畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學分會暨中國免疫學會獸醫(yī)免疫分會第七次研討會論文集[C];2008年

10 單俊杰;姜威;朱婷;王玉霞;;多糖佐劑在疫苗中的應(yīng)用[A];2011年中國藥學大會暨第11屆中國藥師周論文集[C];2011年

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10 吳晶晶;殼聚糖微球作為疫苗佐劑的免疫學機制和安全性評價[D];江南大學;2016年

本文編號：2730330