本文關(guān)鍵詞：Mipu1對(duì)巨噬細(xì)胞泡沫化的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的]分析Mipu1結(jié)構(gòu)、功能以及研究過(guò)表達(dá)Mipu1對(duì)巨噬細(xì)胞泡沫化的影響。[方法與結(jié)果]通過(guò)生物信息學(xué)分析軟件和網(wǎng)站對(duì)Mipu1的結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行生物信息學(xué)分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)Mipu1可能與氧化應(yīng)激與脂質(zhì)代謝相關(guān),CD36啟動(dòng)子區(qū)含兩個(gè)潛在Mipu1結(jié)合元件;采用熒光定量PCR和Western blot等方法,從整體動(dòng)物水平和細(xì)胞水平探討高膽固醇刺激時(shí)Mipu1和CD36的表達(dá)模式,結(jié)果發(fā)現(xiàn)ox LDL能誘導(dǎo)Mipu1和CD36表達(dá),并成濃度和時(shí)間依賴性;采用高效液相色譜法、熒光標(biāo)記法(Dil-ox LDL)和油紅O染色探討過(guò)表達(dá)Mipu1(轉(zhuǎn)染Mipu1表達(dá)質(zhì)粒)對(duì)ox LDL處理的巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇蓄積的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)Mipu1能夠抑制巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇蓄積;采用熒光定量PCR和Western blot檢測(cè)過(guò)表達(dá)Mipu1對(duì)ABCA1,ABCG1,SR-B1和CD36表達(dá)的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)Mipu1能明顯抑制CD36表達(dá)而對(duì)ABCA1,ABCG1,SR-B1的表達(dá)影響不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。[結(jié)論]Mipu1能夠抑制ox LDL誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞泡沫化,其作用機(jī)制可能與其調(diào)控CD36的表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：心肌缺血預(yù)適應(yīng)上調(diào)蛋白1 CD36 RAW264.7細(xì)胞 氧化低密度脂蛋白
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R363
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-11
• 第1章 緒論11-13
• 第2章 實(shí)驗(yàn)材料13-17
• 2.1 主要試劑和耗材13-14
• 2.2 主要儀器設(shè)備14
• 2.3 細(xì)胞株14-15
• 2.4 數(shù)據(jù)處理和分析15-17
• 第3章 實(shí)驗(yàn)方法17-27
• 3.1 生物信息學(xué)分析17
• 3.2 常用液體的配制17
• 3.3 動(dòng)物模型制備17-18
• 3.4 血脂水平的檢測(cè)18
• 3.5 油紅O染色18
• 3.6 動(dòng)脈粥樣硬化損害分析18
• 3.7 細(xì)胞培養(yǎng)18-19
• 3.7.1 細(xì)胞復(fù)蘇18
• 3.7.2 細(xì)胞傳代18-19
• 3.7.3 細(xì)胞凍存19
• 3.8 Mipu1表達(dá)質(zhì)粒和干擾質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化和擴(kuò)增19-20
• 3.8.1 溶液的配制19-20
• 3.8.2 受體菌的培養(yǎng)20
• 3.8.3 感受態(tài)細(xì)胞的制備(CaCl_2法)20
• 3.8.4 質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化20
• 3.9 質(zhì)粒的提取20-21
• 3.10 Western Blot檢測(cè)21-25
• 3.10.1 蛋白質(zhì)提取21-22
• 3.10.2 BCA蛋白定量22-23
• 3.10.3 Western Blot23-25
• 3.11 脂質(zhì)聚積的檢測(cè)25
• 3.12 實(shí)驗(yàn)分組25-27
• 第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-45
• 4.1 Mipu1的生物信息學(xué)分析27-33
• 4.1.1 核酸序列分析27-29
• 4.1.2 Mipu1的氨基酸序列29-30
• 4.1.3 Mipu1二級(jí)結(jié)構(gòu)30-31
• 4.1.4 Mipu1三級(jí)結(jié)構(gòu)31
• 4.1.5 Mipu1功能預(yù)測(cè)31-32
• 4.1.6 啟動(dòng)子區(qū)含Mipu1結(jié)合位點(diǎn)的清道夫受體32
• 4.1.7 改變Mipu1表達(dá)水平對(duì)清道夫受體mRNA表達(dá)的影響32-33
• 4.2 Mipu1在AS新西蘭兔主動(dòng)脈中的表達(dá)情況33-36
• 4.2.1 高脂喂養(yǎng)對(duì)新西蘭兔血脂水平的影響33-34
• 4.2.2 高脂喂養(yǎng)促使新西蘭兔主動(dòng)脈AS斑塊的形成34
• 4.2.3 高脂喂養(yǎng)對(duì)新西蘭兔主動(dòng)脈Mipu1和CD36表達(dá)的影響34-36
• 4.3 oxLDL處理RAW264.7 細(xì)胞對(duì)Mipu1和CD36表達(dá)的影響36-39
• 4.3.1 不同濃度oxLDL處理RAW264.7細(xì)胞后Mipu1和CD36的表達(dá)36-37
• 4.3.2 75mg/L oxLDL處理RAW264.7細(xì)胞不同時(shí)間后Mipu1和CD36的表達(dá)37-39
• 4.4 Mipu1過(guò)表達(dá)抑制oxLDL誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞脂質(zhì)聚積39-41
• 4.4.1 轉(zhuǎn)染Mipu1對(duì)RAW264.7細(xì)胞Mipu1表達(dá)的影響39
• 4.4.2 過(guò)表達(dá)Mipu1對(duì)RAW264.7細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量的影響39-40
• 4.4.3 過(guò)表達(dá)Mipu1對(duì)RAW264.7細(xì)胞脂質(zhì)攝取的影40
• 4.4.4 油紅O染色觀察過(guò)表達(dá)Mipu1對(duì)RAW264.7 細(xì)胞內(nèi)脂滴的影響40-41
• 4.5 Mipu1過(guò)表達(dá)對(duì)oxLDL處理的巨噬細(xì)胞ABCA1，ABCG1，SR-B1及CD36表達(dá)的影響41-45
• 4.5.1 過(guò)表達(dá)Mipu1對(duì)RAW264.7細(xì)胞ABCA1 mRNA表達(dá)的影響41-42
• 4.5.2 過(guò)表達(dá)Mipu1對(duì)RAW264.7細(xì)胞ABCG1 mRNA表達(dá)的影響42
• 4.5.3 過(guò)表達(dá)Mipu1對(duì)RAW264.7細(xì)胞SR-B1 mRNA表達(dá)的影響42-43
• 4.5.4 過(guò)表達(dá)Mipu1對(duì)RAW264.7細(xì)胞CD36表達(dá)的影響43-45
• 第5章 討論45-47
• 第6章 結(jié)論47-49
• 參考文獻(xiàn)49-52
• 綜述52-65
• 參考文獻(xiàn)60-65
• 攻讀學(xué)位期間的科研成果65-67
• 致謝67-69
• 附錄69

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  本文關(guān)鍵詞：Mipu1對(duì)巨噬細(xì)胞泡沫化的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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