【摘要】：【目的】 Th17細(xì)胞因子可誘導(dǎo)氣道內(nèi)HBD-2高表達(dá)而發(fā)揮廣譜抗菌活性。本研究探討IL-22能否調(diào)節(jié)肺泡II型上皮細(xì)胞系A(chǔ)549表達(dá)HBD-2及其相關(guān)的信號(hào)通路。 【方法】1.流式細(xì)胞技術(shù)(FCM)檢測(cè)A549細(xì)胞膜表面IL-22R表達(dá)水平。2.逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)測(cè)試IL-22刺激A549細(xì)胞HBD-2mRNA的動(dòng)力學(xué)表達(dá)。3.逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)和酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)分析兩條信號(hào)通路(STAT3通路和NF-κB通路)的抑制劑AG490和JSH-23對(duì)IL-22誘導(dǎo)A549細(xì)胞HBD-2表達(dá)及釋放的影響。4.免疫印跡法(Western Blotting)測(cè)定IL-22刺激A549細(xì)胞后STAT3磷酸化水平。5.免疫熒光法(Immunofluorescence)檢測(cè)IL-22刺激A549細(xì)胞后p-STAT3和NF-κB核轉(zhuǎn)位情況。 【結(jié)果】1.肺泡II型上皮細(xì)胞系A(chǔ)549高度表達(dá)IL-22R，陽性率達(dá)(99.90±0.13)%。2.IL-22誘導(dǎo)A549細(xì)胞HBD-2mRNA表達(dá)具有時(shí)間和劑量依賴關(guān)系。3.STAT3通路阻滯劑AG490顯著抑制IL-22誘導(dǎo)的A549細(xì)胞HBD-2生成，而NF-κB通路阻滯劑JSH-23對(duì)此無抑制作用。4.同時(shí)IL-22可顯著誘導(dǎo)A549細(xì)胞STAT3磷酸化，且刺激p-STAT3核轉(zhuǎn)位，而未見NF-κB核轉(zhuǎn)位。 【結(jié)論】 IL-22通過STAT3信號(hào)途徑顯著誘導(dǎo)肺泡II型上皮細(xì)胞系A(chǔ)549表達(dá)及釋放HBD-2。IL-22這一生物學(xué)效應(yīng)對(duì)于肺泡局部抗感染將發(fā)揮重要作用。
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R363

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