【摘要】：DISC1(Disrupted-in-Schizophrenia-1),即精神分裂癥斷裂基因1,是精神分裂癥、雙相情感障礙和抑郁癥等神經(jīng)精神疾病共同的易感基因。這類疾病的病因目前尚不清楚,通常被認為是由遺傳易感因素(基因突變)和環(huán)境危險因素(如流感、創(chuàng)傷以及壓力等)相互作用的結(jié)果。青春期是多個腦區(qū)(包括前額葉皮層、海馬和杏仁核等)神經(jīng)環(huán)路發(fā)育成熟和可塑性變化的敏感時期。研究證明,青春期的不良經(jīng)歷會影響大腦的成熟,并增加成年后發(fā)生與壓力相關(guān)的精神疾病的風險。特別是青春期的社會應(yīng)激壓力會導(dǎo)致神經(jīng)精神障礙,包括抑郁、焦慮、精神分裂和成癮等。在之前的研究中,我們發(fā)現(xiàn)DISC1 L100P點突變小鼠存在物體識別記憶障礙,但是它們的社交能力和社交記憶均相對正常。因此,本次實驗以DISC1 L100P點突變小鼠為模型,研究青春期應(yīng)激與DISC1 L100P點突變之間的相互作用是否會影響成年后小鼠的社交記憶并探討其可能的機制。主要的研究結(jié)果有:1.社會交往和社會新奇偏好實驗結(jié)果顯示青春期社交隔離(5周至8周)會特異性損害成年DISC1 L100P小鼠的社交記憶,而對WT小鼠的社交記憶無影響。WT組、WT-iso組和L100P組的小鼠均沒有產(chǎn)生社交記憶障礙,但L100P-iso組的小鼠無法識別熟悉和陌生的切卵巢小鼠,呈現(xiàn)出社交記憶障礙。2.高架十字迷宮和強迫游泳實驗結(jié)果顯示青春期社交隔離對成年DISC1 L100P小鼠的焦慮和抑郁狀態(tài)無影響。WT組、WT-iso組、L100P組和L100P-iso組小鼠在開放臂上的停留時間和在水中不動的時間沒有明顯差異。3.免疫熒光實驗顯示青春期社交隔離會加重成年DISC1 L100P小鼠海馬齒狀回顆粒下區(qū)神經(jīng)發(fā)生障礙,但對WT小鼠并無影響。即青春期社交壓力和DISC1 L100P點突變對損害成年神經(jīng)發(fā)生和神經(jīng)元的分化是具有協(xié)同作用的,但對神經(jīng)元的成熟并無影響。4.全細胞膜片鉗結(jié)果顯示,青春期社交隔離會對DISC1 L100P小鼠海馬神經(jīng)環(huán)路的突觸傳遞產(chǎn)生持久的影響。青春期社交隔離和L100P點突變的相互作用可能導(dǎo)致或加重了DG區(qū)顆粒細胞和海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元抑制性突觸傳遞的異常,以及DG區(qū)顆粒細胞興奮性突觸活動的異常,并引起了AMPA電流的減少和/或NMDA電流的增加。以上幾點可能是導(dǎo)致L100P-iso小鼠產(chǎn)生社交記憶障礙的原因。5.海馬腦片場電位(fEPSCs)記錄結(jié)果顯示,青春期社交隔離抑制了DISC1L100P小鼠海馬神經(jīng)環(huán)路的突觸可塑性調(diào)節(jié)。青春期社交隔離所造成LTP受損可能是由突觸后機制引起的,而L100P點突變則可能涉及突觸前和突觸后兩方面機制的影響。綜上所述,我們的結(jié)果提示,DISC1 L100P與青春期社交應(yīng)激壓力之間存在特定的相互作用,而這種作用可以特異地損害成年海馬的突觸功能和社交記憶的形成。
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R338
【圖文】：

圖1 DISC1 L100P小鼠基因型鑒定結(jié)果圖Fig.1 Mice Genotype identification420bp，WT=~420bp，Marker為100bp~1000bp大小的標準化DNA條帶。社交隔離的 DISC1 L100P 小鼠表現(xiàn)出社交記憶障礙錄小鼠對社交對象的嗅聞時間的長短，可以評價小鼠的社交意新舊社交對象的嗅聞時間的不同，可以反映小鼠的社交記憶能映出小鼠的社交意愿，即實驗小鼠是否愿意和其他小鼠進行交映的是小鼠的社會識別記憶能力，即是否能記住曾經(jīng)見過的小前期研究結(jié)果表明[21]，L100P 小鼠對物體認知存在障礙，但社。但越來越多的實驗研究顯示，精神分裂癥發(fā)病是一種多因素中遺傳因素與環(huán)境因素的共同作用，是造成精神分裂癥發(fā)病的重出青春期社交隔離 3 周會導(dǎo)致成年的 DISC1-DN-Tg-PrP 轉(zhuǎn)基因陷，其他行為正常[7]。因此我們想考察一下青春期應(yīng)激是否會造

然后四周后（超過 12 周）進行行為學實驗（圖 2A），考察小鼠的社交能力、焦慮和抑郁狀態(tài)。我們發(fā)現(xiàn)青春期 3 周隔離并不影響野生成年的 WT 小鼠和L100P 小鼠的社會交往，L100P 組、WT-iso 組和 L100P-iso 組與 WT 組相比，與切卵巢小鼠的互動時間并沒有明顯差別（圖 2B，one-way ANOVA，F(xiàn)(3,31)=0.876，P>0.05）但社會新奇偏好實驗中，與其他 3 組（WT-iso、L100P、WT）小鼠的行為表現(xiàn)相比，L100P-iso 組小鼠對新舊社交對象（去卵巢鼠）的嗅聞時間無明顯差別，表明這一組的小鼠出現(xiàn)了社交記憶障礙（圖 2C，two-way ANOVA，F(xiàn)(1,56)=49.61，P<0.001，Bonferroni post-tests，stranger versus familiar，t=0.09，P>0.05）。而其他三組小鼠則在陌生小鼠上花費了更多的互動時間（圖 2C，Bonferroni post-tests，t=6.07 for WT，P<0.001；t=4.2 for WT-iso，P<0.001；t=3.91 for L100P，P<0.01）。且發(fā)現(xiàn)四組小鼠對社交對象（去卵巢鼠）的總探尋時間無明顯差別，這表明 L100P-iso 組小鼠的社會記憶障礙并不是由隔離可能引起的社交力損傷所致。在我們之前的研究中[21]，L100P 組小鼠和 WT 組小鼠在社交能力和社會記憶測試方面的表現(xiàn)是相似的。因此，我們的結(jié)果提示青春期社交隔離只有在與 DISC1 L100P 點突變基因共同作用的情況下才會影響成年后的社會記憶。

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本文編號：2719747