【摘要】：目的:目的:以“腎腦相濟(jì)”理論為指導(dǎo),觀察電針療法對圍絕經(jīng)期抑郁癥模型大鼠行為學(xué)改變、大鼠海馬內(nèi)環(huán)境中GR、MR水平變化以及海馬CA3區(qū)神經(jīng)細(xì)胞、核仁變化情況,探索尋求電針療法對圍絕經(jīng)期抑郁癥的作用機(jī)制,為臨床針灸治療本病提供相應(yīng)的理論支持與依據(jù)。材料與方法:1.動物及分組選用SPF級雌性SD大鼠,所有動物進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后進(jìn)行3w適應(yīng)性飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)過程中對動物的處置符合《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動物的指導(dǎo)性意見》的規(guī)定。用隨機(jī)數(shù)字表法將40只大鼠隨機(jī)分為4組:空白組、模型組、西藥組、電針組每組10只。2.造模方法選擇去勢(OVX)聯(lián)合慢性不可預(yù)見性刺激(CUMS)建立圍絕經(jīng)期抑郁癥大鼠模型。具體方法:除去空白組其余各組大鼠先經(jīng)水合氯醛腹腔注射麻醉,行雙側(cè)卵巢切除術(shù)。之后進(jìn)行抑郁癥模型復(fù)制,采用改良P.Willner傳統(tǒng)慢性不可預(yù)見性刺激造模方法進(jìn)行抑郁癥模型復(fù)制。干預(yù)措施空白組大鼠正常飼養(yǎng),不接受刺激。模型組大鼠進(jìn)行抓取并用布袋包覆固定20min。西藥組大鼠使用鹽酸氯米帕明片灌胃治療,將藥片用研缽研碎后溶于0.9%生理鹽水中,按20mg/kg·d-1用量灌胃,連續(xù)28d。電針組大鼠用布袋包覆固定大鼠行針刺后加電針,針刺穴位定位參照《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》,針刺雙側(cè)“腎俞”(位于大鼠背部,第二腰椎下旁開5mm之兩旁肋間,直刺6mm),雙側(cè)“三陰交”(后肢內(nèi)踝尖直上10mm,直刺5mm),頭頂“百會”(頂骨正中,平刺2mm);兩對電極接大鼠同側(cè)三陰交及腎俞,第三對電極接鼠尾和百會,電極(負(fù)載250Ω)0~18V,疏密波型,疏波4Hz,密波20Hz,強(qiáng)度以局部皮膚肌肉輕微顫動為度,留針20min,每日1次,連續(xù)28d。3.指標(biāo)檢測治療后,觀察大鼠一般情況、動情周期,分別在造模前、造模后、治療后對大鼠進(jìn)行行為學(xué)檢測,包括曠場實(shí)驗(yàn)、糖水實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn);尼氏染色條件下觀察,測定海馬CA3區(qū)神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目及核仁數(shù)目、總面積、積分光密度及平均黑度;酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定海馬內(nèi)環(huán)境中糖皮質(zhì)激素受體(GR)、鹽皮質(zhì)激素受體(MR)水平。結(jié)果:1.行為學(xué)檢測1.1曠場實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:治療后模型組與空白組比較P0.05,西藥組與模型組相比P0.05,電針組與模型組比較P0.05,電針治療后大鼠180s中央格停留時(shí)間和運(yùn)動距離都有所增加,結(jié)果近似西藥組。1.2糖水實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:治療后模型組與空白組比較P0.05,西藥組與模型組比較P0.05,電針組與模型組比較P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,電針治療后大鼠糖水偏嗜率有所增加,結(jié)果近似西藥組。1.3強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:治療后模型組與空白組比較P0.05,西藥組與模型組比較P0.05,電針組與模型組比較P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,電針治療后大鼠強(qiáng)迫游泳180s不動時(shí)間減少,結(jié)果近似西藥組。1.4懸尾實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:治療后模型組與空白組比較P0.05,西藥組與模型組比較P0.05,電針組與模型組比較P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,電針后大鼠懸尾不動時(shí)間減少,結(jié)果與西藥組相似。2.形態(tài)學(xué)指標(biāo)觀察檢測海馬CA3區(qū)尼氏染色:神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量及胞內(nèi)核仁在數(shù)量、面積、積分光密度、平均黑度方面均顯示治療后模型組與空白組比較P0.05,西藥組與模型組比較P0.05,電針組與模型組比較P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,電針治療后神經(jīng)細(xì)胞活性有所提高,與西藥組結(jié)果相似。3.分子生物學(xué)指標(biāo)檢測海馬區(qū)ELISA測定海馬內(nèi)環(huán)境中糖皮質(zhì)激素受體(GR)、鹽皮質(zhì)激素受體(MR)含量:結(jié)果顯示治療后模型組與空白組比較P0.05,西藥組與模型組比較P0.05,電針組與模型組比較P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,電針治療后結(jié)果與西藥組相似。結(jié)論:1.電針治療與氯米帕明干預(yù)均能有效改善模型大鼠行為學(xué)指標(biāo),說明電針對圍絕經(jīng)期抑郁癥模型大鼠的治療作用可以通過大鼠行為學(xué)變化來體現(xiàn)。2.電針“百會”、“腎俞”和“三陰交”穴能夠增加海馬CA3區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量,提高其功能活性,其對圍絕經(jīng)期抑郁癥模型大鼠的改善作用可能與電針療法對海馬內(nèi)環(huán)境的良性調(diào)整作用有關(guān)。3.本研究認(rèn)為,圍絕經(jīng)期抑郁癥模型大鼠的基本病機(jī)在于腎虛所致的腦神失養(yǎng),“腎腦相濟(jì)”電針療法的“補(bǔ)腎益腦,安神解郁”治則通過對海馬內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)激素水平的調(diào)節(jié)來體現(xiàn)。
【圖文】：

1 一般情況觀察圍絕經(jīng)期抑郁癥造模結(jié)束后，除了空白組大鼠以外，其他組大鼠反應(yīng)遲緩、對外界事物淡漠、普遍表現(xiàn)為食欲下降、活動度減少、皮毛缺乏光澤、倦怠嗜睡、便質(zhì)稀溏。治療后，西藥組、電針組上述一般情況明顯改善；模型組一般情況略有好轉(zhuǎn)，但相比于空白組、西藥組和電針組仍較差。2 動情周期檢測圖 1a 可見，空白組在顯微鏡下放大 200 倍觀察，動情前期大部分為有核上皮細(xì)胞，偶有白細(xì)胞和角化細(xì)胞，有動情周期；動情中期全部是角化上皮細(xì)胞間或有少量上皮細(xì)胞；動情后期三者均有。圖 1b 可見，模型組在顯微鏡下放大 200 倍觀察，有大量白細(xì)胞及少量有核退化上皮細(xì)胞和黏液，說明模型大鼠動情周期不規(guī)則，證明去勢模型造模成功，，大鼠圍絕經(jīng)期模型復(fù)制成功。

圖 1b 模型組3 電針干預(yù)對圍絕經(jīng)期抑郁癥大鼠行為學(xué)指標(biāo)的影響在造模前，造模后及治療后三個(gè)時(shí)間點(diǎn)對實(shí)驗(yàn)動物進(jìn)行曠場實(shí)驗(yàn)、糖水偏嗜實(shí)驗(yàn)及強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)。3.1 曠場實(shí)驗(yàn)表 3、圖 2 可見：實(shí)驗(yàn)動物 180s 內(nèi)中央格停留時(shí)間及運(yùn)動距離在造模前各組沒有比較意義 (P＞0.05)，而 CUMS 造模后除空白組外其他組中央格停留時(shí)間降低（P＜0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；給予不同療法治療后，治療組動物在中央格停留時(shí)間與模型組相比變長（P＜0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表 3 各組曠場實(shí)驗(yàn) 3 分鐘中央格停留時(shí)間實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)（ ±S,s）組 別 n(只) 造模前 造模后 治療后
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R245.97;R-332

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本文編號：2707589