【摘要】：[目的]通過檢測SNI模型大鼠脊髓背角中Cdh8蛋白,背根神經(jīng)節(jié)中TRPA1、TRPM8、Cdh8、PAR2蛋白及皮膚上皮細(xì)胞TRPA1蛋白表達(dá)的變化,探討“三法三穴”推拿干預(yù)對周圍神經(jīng)損傷模型大鼠冷感覺超敏反應(yīng)的影響。[方法]通過建立坐骨神經(jīng)損傷大鼠模型,并對其進(jìn)行“三法三穴”推拿干預(yù),運(yùn)用免疫組織化學(xué)、WesternBlot技術(shù),對大鼠脊髓背角中Cdh8、背根神經(jīng)節(jié)中TRPA1、TRPM8、Cdh8、PAR2以及足部皮膚的上皮細(xì)胞中TRPA1進(jìn)行定性、定量研究。從脊髓背角神經(jīng)元中Cdh8蛋白、背根節(jié)神經(jīng)元細(xì)胞中TRPA1、TRPM8、Cdh8、PAR2蛋白及皮膚上皮細(xì)胞TRPA1蛋白表達(dá)的層面,結(jié)合冷板實(shí)驗(yàn)評價(jià)坐骨神經(jīng)損傷模型大鼠冷感覺超敏性,探究“三法三穴”推拿干預(yù)對SNI大鼠模型中冷超敏反應(yīng)的影響。[結(jié)果]1.冷板實(shí)驗(yàn)結(jié)果造模前1天各組大鼠患側(cè)后足在冷板上的抬足次數(shù)無明顯不同(P0.05);推拿干預(yù)0次后,正常組與假手術(shù)組大鼠患側(cè)后足抬足次數(shù)比較無明顯不同(P0.05);與假手術(shù)組比較,模型組和推拿干預(yù)組大鼠患側(cè)后足抬足次數(shù)明顯增多(P0.01)。推拿干預(yù)20次后,與模型組比較,推拿干預(yù)組大鼠患側(cè)后足在冷板上的抬足次數(shù)明顯減少(P0.01)。2.脊髓背角神經(jīng)元Cdh8的表達(dá)結(jié)果免疫組化法與WesternBlot法檢測脊髓背角神經(jīng)元中Cdh8蛋白表達(dá)結(jié)果顯示,推拿干預(yù)0天后,正常組與假手術(shù)組之間脊髓背角Cdh8的表達(dá)無明顯不同(P0.05);與假手術(shù)組比較,模型組脊髓背角Cdh8的表達(dá)明顯增多(P0.05)。推拿干預(yù)20天后,與模型組比較,推拿干預(yù)組脊髓背角Cdh8的表達(dá)有所減少,但變化不顯著。3.背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元中TRPA1、TRPM8、PAR2、Cdh8的表達(dá)結(jié)果免疫組化法與Western Blot法檢測背根節(jié)神經(jīng)元中TRPA1、TRPM8、PAR2、Cdh8蛋白表達(dá)結(jié)果顯示,推拿干預(yù)0天,正常組與假手術(shù)組之間背根神經(jīng)節(jié)中TRPA1、TRPM8、PAR2、Cdh8的表達(dá)無明顯不同(P0.05);模型組與假手術(shù)組比較,背根神經(jīng)節(jié)中的TRPA1、TRPM8、PAR2、Cdh8表達(dá)均顯著增多(P0.05)。推拿干預(yù)20天后,與模型組比較,推拿干預(yù)組背根神經(jīng)節(jié)TRPA1、PAR2的表達(dá)均減少(P0.05),而Cdh8、TRPM8蛋白減少不顯著。4.皮膚上皮細(xì)胞TRPA1的表達(dá)結(jié)果免疫組化法檢測皮膚上皮細(xì)胞TRPA1的表達(dá)結(jié)果顯示,推拿干預(yù)0天后正常組與假手術(shù)組之間皮膚上皮細(xì)胞TRPA1的表達(dá)無明顯不同(P0.05);與假手術(shù)組比較,模型組和推拿干預(yù)組皮膚上皮細(xì)胞TRPA1蛋白表達(dá)均增多(P0.05)。推拿干預(yù)20天后,推拿干預(yù)組與模型組比較,皮膚上皮細(xì)胞TRPA1表達(dá)明顯減少(P0.05)。WesternBlot未檢測出結(jié)果。[結(jié)論]1.“三法三穴”推拿干預(yù)可顯著改善SNI模型大鼠的冷感覺超敏反應(yīng)。2.“三法三穴”推拿干預(yù)對SNI模型大鼠的冷感覺超敏反應(yīng)的恢復(fù)機(jī)制與調(diào)節(jié)TRPA1冷感受器通路中相關(guān)蛋白有關(guān)。3.“三法三穴”推拿干預(yù)通過抑制背根神經(jīng)節(jié)中TRPA1、PAR2及皮膚上皮細(xì)胞中TRPA1蛋白的表達(dá)起到促進(jìn)冷感覺超敏反應(yīng)恢復(fù)的作用。
【圖文】：

造模前１天各組大鼠抬足次數(shù)無明顯的不同（Ｐ＞０．０５）；造模后７天（推拿干預(yù)０逡逑天），正常組與假手術(shù)組之間抬足次數(shù)無明顯差異（Ｐ＞０．０５）；與假手術(shù)組比較，模型逡逑組和推拿干預(yù)組大鼠抬足次數(shù)明顯增多，，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ＰＣ０．０１）。推拿干預(yù)２０逡逑天后，與模型組比較，推拿干預(yù)組抬足次數(shù)顯著減少，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ＰＣ０．０１邋），逡逑說明“三法三穴”推拿干預(yù)能有效改善坐骨神經(jīng)損傷大鼠在冷板上的冷感覺超敏反應(yīng)的逡逑次數(shù)。（見表１０、圖１）。逡逑邐表１０大鼠右側(cè)冷板實(shí)驗(yàn)測定結(jié)果茂趙）（單位：次）邐逡逑組別邐樣本量邐冷板抬足次數(shù)逡逑邐Ｎ邐基線邐干預(yù)０天邐干預(yù)２０天邐＿逡逑正常組邐８邐６．６０＋３．５０邐７．６０±２．８０邐１０．６０±２．７０逡逑假手術(shù)組邐８邐８．１０邋土邋４．１０邐８．００±２．００邐９．１０±３．８０逡逑模型組邐８邐７．３０邋＋邋５．００邐３０．００±４．８０ａ邋２１．１０±５．１０ａ逡逑推拿組邐８邐６．９０±３＿５０邐３１．００±２．９０ａ邐１２．００土邋４．１０＊逡逑注：Ａ表示與假手術(shù)組比較／＊＜０．０５；邋４表示與模型組比較＿Ｐ＜0．0ｌ。逡逑■正栤逡逑

邐“三法三穴”推拿干預(yù)對坐骨神經(jīng)損傷模型大鼠冷超敏反應(yīng)的影響邐逡逑免疫組化法與Ｗｅｓｔｅｒｎ邋Ｂｌｏｔ法檢測脊髓背角ｃｄｈ８光密度值和蛋白表達(dá)結(jié)果顯不：與逡逑假手術(shù)組比較，模型組脊髓背角Ｃｄｈ８的表達(dá)明顯增多（Ｐ＜0．0５）。推拿干預(yù)２０天后，逡逑推拿干預(yù)組與模型組比較，推拿干預(yù)組大鼠脊髓背角中Ｃｄｈ８的表達(dá)稍有所減少，但差逡逑異不顯著（見表１１、１２、圖２、３、４）。逡逑邐表１１大鼠脊髓背角Ｃｄｈ８光密度值測量結(jié)果邐逡逑組別邐樣品量邐邐平均值土標(biāo)準(zhǔn)差邐逡逑Ｎ邐干預(yù)０天邐干預(yù)２０天逡逑正常組邐８邐０．１４±０．０１邐０．１４±０．００逡逑假手術(shù)組邐８邐０．１４士邋０．０１邐０．１４±０．００逡逑模型組邐８邐０．２１±０．０３ａ邐０．２１±0．0３ａ逡逑推拿組邐８邐０．２２±０．Ｑ２ａ邐０．２０±０．０３ａ逡逑注：＆表示與假手術(shù)組比較尸＜0．0５。逡逑四正常組逡逑
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R244.1;R-332

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2690440