【摘要】：背景雜合子reeler小鼠(reelin單倍體不足)與精神分裂癥患者有許多神經(jīng)化學(xué)和行為上的相似性,提供了一個可用的動物模型來研究精神分裂癥等神經(jīng)精神疾病。已有證據(jù)顯示reelin信號傳導(dǎo)缺陷以特定的方式影響中腦邊緣多巴胺能通路。我們研究了多巴胺(Dopamine,DA)對雜合子reeler小鼠海馬腦片CA3區(qū)γ振蕩的影響及可能的機(jī)制。目的探討雜合子reeler小鼠作為精神分裂癥的模型,在海馬是否存在DA系統(tǒng)功能的紊亂及其可能的機(jī)制,探討DA系統(tǒng)功能紊亂與reelin信號通路的關(guān)聯(lián),為揭示精神分裂癥DA系統(tǒng)功能障礙的病理機(jī)制及抗精神病藥物的研發(fā)提供新的思路。方法1.行為學(xué)實驗利用Y迷宮和Morris水迷宮對野生型和雜合子reeler小鼠進(jìn)行依賴于海馬的空間記憶功能的測試。2.離體海馬腦片的細(xì)胞外場電位記錄創(chuàng)建恒溫界面式浴槽灌流系統(tǒng),腹腔注射10%水合氯醛(0.3-0.4ml/100g)麻醉小鼠。逐層打開胸腔,暴露心臟,剪開右心耳,于左心室處灌注預(yù)冷(-4℃)的30ml切片腦脊液(pH:7.35~7.5),斷頭取腦。取出的腦組織用振動切片機(jī)水平切出含有海馬組織的腦片。切片完成后,將腦片放置于孵育槽上,循環(huán)灌流腦脊液孵育一小時左右。將腦片放置于記錄槽中,采用細(xì)胞外微電極方式記錄海馬腦片CA3區(qū)γ振蕩,達(dá)穩(wěn)態(tài)后加入不同通道受體的抑制劑或激動劑,觀察藥物對γ振蕩的影響,從而揭示其機(jī)制。3.統(tǒng)計分析所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計均使用IBM SPSS Statistics 22軟件進(jìn)行。經(jīng)Shapiro-Wilk檢驗數(shù)據(jù)正態(tài)性后,選擇參數(shù)檢驗或非參數(shù)檢驗。參數(shù)檢驗統(tǒng)計結(jié)果以均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差的方式表示。非參數(shù)檢驗統(tǒng)計結(jié)果以中位數(shù)±四分位數(shù)間距的方式表示。檢驗水準(zhǔn):α=0.05。結(jié)果(1)海馬依賴性的學(xué)習(xí)記憶無差異;(2)DA增強(qiáng)野生型小鼠γ振蕩,但雜合子reeler小鼠對DA反應(yīng)不敏感;(3)阻斷NMDA受體部分阻斷DA對野生型小鼠γ振蕩的增加作用,而阻斷NMDA受體部分恢復(fù)雜合子reeler小鼠對DA的反應(yīng);(4)阻斷PI3K之后DA對野生型小鼠的增加作用無影響,阻斷PI3K卻完全恢復(fù)雜合子reeler小鼠對DA的反應(yīng)。結(jié)論我們的研究結(jié)果揭示雜合子reeler小鼠存在DA系統(tǒng)功能的紊亂,而DA系統(tǒng)功能紊亂與NMDA受體的過度激活有關(guān)。
【圖文】：

程序為: 94℃預(yù)變性 5 min; 94℃變性 30 s, 53℃退火 30 s（Re40 個循環(huán); 72℃延伸 10 min.增產(chǎn)物直接進(jìn)行瓊脂糖電泳檢測。爾基因分離規(guī)律和自由組合規(guī)律，第 2 代小鼠可能具有以下合子 reeler 小鼠，雜合子 reeler 小鼠。由于 Reelin 純合子有 鑒定，因此只需鑒定 Reelin 雜合子和野型純合子。經(jīng) PCR 鑒帶的即為雜合子 reeler 小鼠，單一 265bp 條帶的即為野生elin +/+，reelin +/- 2 種基因型個體，用于后期實驗。 Master Mix (Dye Plus)*125μl1.5μl2μl

圖 2 WT、HRM 和純合子 reeler 小鼠海馬結(jié)構(gòu)及 CCH 誘導(dǎo)的海馬腦片 CA3 區(qū)γ 振蕩。（A1-C1）40×倍顯微鏡下 WT、HRM 和純合子 reeler 小鼠海馬結(jié)構(gòu)。（A2-C2）A1-C1 圖中紅色虛線方框的 400×倍顯微鏡觀。（A3-C3）WT、HRM 及純合子 reeler 小鼠海馬腦片應(yīng)用 CCH 誘導(dǎo) γ 振蕩，應(yīng)用 CCH 前后，，在海馬 CA3 區(qū)記錄到的 1s 場電位原始曲線。Fig.2 The hippocampal structure of WT, HRM and homozygous reeler mice andthe γ oscillation in CA3 region of hippocampal slices induced by CCH. (A1-C1)Hippocampal formation of Wild Type, Heterozygous Reeler Mouse and homozygous reelermice under 40 × magnification. (A2-C2) A1-C1 400 × magnification of the red dashed boxin the figure. (A3-C3) Wild Type, Heterozygous Reeler Mouse and homozygous reelermouse hippocampal slices using CCH induced γ oscillation, the application of CCH in thehippocampus CA3 area recorded 1s field potential of the original curve.
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R749.3;R-332

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 鄧錦波;王桂敏;趙善廷;范文娟;李明善;;Reeler小鼠海馬齒狀回形態(tài)結(jié)構(gòu)與組織化學(xué)研究[J];解剖學(xué)報;2009年04期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 孫雪;新型多巴胺D3受體阻斷劑Y-QA31抗精神分裂癥藥理學(xué)研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2015年

本文編號：2689949