【摘要】：幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是消化性潰瘍及慢性胃炎的主要致病因子,與胃癌和胃黏膜相關淋巴組織(mucosa-associated lymphoid tissue,MALT)淋巴瘤的發(fā)生也具有一定的關系。H.pylori感染還會引起胃腸以外的疾病,如不明原因的缺鐵性貧血和血小板減少性紫癜。本研究成功分離到H.pylori 69株,陽性率為23.1%。標本依據(jù)患者病理診斷結果分為3組,消化性潰瘍組,包括胃潰瘍和十二指腸潰瘍,分離菌株29株;非潰瘍性消化不良組,包括十二指腸炎、淺表性胃炎、萎縮性胃炎、非萎縮性胃炎以及糜爛性胃炎等疾病,分離29株;胃癌患者組,分離11株。采用隨機擴增多態(tài)性DNA(RAPD)的方法對分離的69株H.pylori基因組進行分析,發(fā)現(xiàn)共有6種不同基因型,其中9株幽門螺桿菌具有1條條帶,且主要集中在消化性潰瘍和非潰瘍性消化不良這兩種疾病中;2~4條條帶所占比例最高,為75.4%。胃癌疾病患者主要以4~6條條帶為主,且具有6條條帶的菌株僅在胃癌疾病中存在。結果表明胃腸道疾病的嚴重程度與RAPD的基因型數(shù)目具有相關性(P0.05),這為H.pylori感染胃腸道疾病的診治提供了參考。本研究運用瓊脂稀釋法對H.pylori菌株進行七種常用的抗生素耐藥性進行檢測,結果顯示,69株菌株中有36株菌株對克拉霉素耐藥,其耐藥率為52.2%,硝唑類的藥物如甲硝唑和替硝唑的耐藥率也相對較高,分別為21株(30.4%)和33株(47.8%),左氧氟沙星的耐藥率37.7%(26/69),鹽酸四環(huán)素和呋喃唑酮的耐藥率分別為33.3%(23/69)和30.4%(21/69)。阿莫西林的耐藥率最低為5.8%(4/69),可繼續(xù)作為一線抗菌藥物繼續(xù)使用。且研究發(fā)現(xiàn)本地區(qū)存在多重耐藥菌株,69株H.pylori,對七種抗生素均敏感的有17株(24.6%)。耐藥的菌株中,對一種抗生素耐藥的菌株有16株(23.2%),對三種抗生素及以上的多重耐藥菌株有36株(52.17%),這為臨床使用一線三聯(lián)療法根除感染提供指導。通過對H.pylori毒力基因和耐藥性的關系分析,發(fā)現(xiàn)cag A基因與抗生素耐藥性之間無相關性,而vac A與ice A兩個毒力基因在抗生素耐藥和敏感菌株間的分布差異顯示:vac A s1a陽性菌株對甲硝唑的耐藥率更高(P=0.034)。vac A s1c陽性菌株對甲硝唑、克拉霉素和左氧氟沙星三種抗生素更敏感(P=0.013、P=0.009、P=0.008)。vac A m1a陽性菌株對鹽酸四環(huán)素更敏感(P=0.017),vac A i1陽性菌株對替硝唑更敏感(P=0.018)。毒力基因ice A1在克拉霉素、呋喃唑酮、替硝唑的耐藥和敏感菌株間的分布有統(tǒng)計學差異(P=0.003、0.042、0.047),即ice A1陽性對克拉霉素和替硝唑耐藥率較高,而對呋喃唑酮更敏感。對克拉霉素耐藥測序成功的菌株中共發(fā)現(xiàn)8個突變位點:A1821G、G1826A、T1830C、G1940A、C1953T、A2143G、T2182C、A2223G。A2143G位點突變占54.2%,導致菌株對克拉霉素耐藥,是本地區(qū)的主要突變位點。綜上所述,本文研究了幽門螺桿菌的基因組多態(tài)性與消化系統(tǒng)疾病的關系,以及對抗生素耐藥性及其耐藥機制進行了分析,這為臨床患者提供個體化、合理化治療從而根除H.pylori感染奠定了基礎。
【圖文】：

圖 2.1 PCR 擴增 ureA 基因瓊脂糖凝膠電泳（M：DL2000，line1：陰性對照，line 2-9：ureA 陽性株 PCR 擴增 16S rRNA 基因檢測PCR 擴增 16S rRNA 基因，產(chǎn)物片段大小為 522bp，電泳結果

圖 2.1 PCR 擴增 ureA 基因瓊脂糖凝膠電泳（M：DL2000，line1：陰性對照，，line 2-9：ureA 陽性株）CR 擴增 16S rRNA 基因檢測CR 擴增 16S rRNA 基因，產(chǎn)物片段大小為 522bp，電泳結果見
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R378.2

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 胡素俠;楊立新;程龍強;蔡霞;張榮波;;隨機擴增多態(tài)性DNA分析法在幽門螺桿菌鑒定中的應用[J];檢驗醫(yī)學與臨床;2014年12期

2 胡素俠;張榮波;楊立新;程龍強;;幽門螺桿菌基因多態(tài)性及其致病機制研究進展[J];齊齊哈爾醫(yī)學院學報;2013年23期

3 Jan Bure;Marcela Kopáová;Ilona Koupil;Bohumil Seifert;Miluka kodová Fendrichová;Jana pirková;Viktor Voíek;Stanislav Rejchrt;TomáDouda;Norbert Král;Ilja Tachecí;;Significant decrease in prevalence ofHelicobacter pylori in the Czech Republic[J];World Journal of Gastroenterology;2012年32期

4 謝國艷;高志生;胡嘉波;周建華;蔡志昌;黃敏;;耐甲硝唑幽門螺桿菌cagA基因檢測與rdxA基因突變研究[J];臨床檢驗雜志;2010年03期

5 zlem Yilmaz;Ebru Demiray;;Clinical role and importance of fluorescence in situ hybridization method in diagnosis of H pylori infection and determination of clarithromycin resistance in H pylori eradication therapy[J];World Journal of Gastroenterology;2007年05期

6 張萬岱 ,蕭樹東 ,胡伏蓮;對幽門螺桿菌若干問題的共識意見(2003·中國)[J];中華醫(yī)學雜志;2004年06期

7 ;Apoptosis,proliferation and p53 gene expression of H.pylori associated gastric epithelial lesions[J];World Journal of Gastroenterology;2001年06期

8 ;Effect of Helicobacter pylori infection on gastric epithelial cell proliferation[J];World Journal of Gastroenterology;2000年03期

9 ;Research of Helicobacter pylori infection in precancerous gastric lesions[J];World Journal of Gastroenterology;2000年03期

10 Vandenplas Y;;Helicobacter pylori infection[J];World Journal of Gastroenterology;2000年01期

本文編號：2670494