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不同胎牛血清濃度對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-05-16 05:48
【摘要】:研究背景及目的:骨髓中包含多種不同的細(xì)胞,有造血干細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、骨原細(xì)胞及脂肪細(xì)胞。近年來,另一種類型的具有增殖及自我更新能力,并可以分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及脂肪細(xì)胞的間質(zhì)細(xì)胞在骨髓中被發(fā)現(xiàn),被稱為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs),由于該類細(xì)胞在治療各種疾病方面開啟了新的道路,例如:急性心肌梗死及心血管疾病、糖尿病、中風(fēng)、腎臟疾病、自身免疫類疾病如移植物抗宿主病(GvHD),使對它的研究成為了熱點(diǎn)。 方法:用全骨髓接種貼壁培養(yǎng)法分離大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,然后分別以體積分?jǐn)?shù)為0.15和0.10胎牛血清的L-DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行原代培養(yǎng),傳代后均以體積分?jǐn)?shù)為0.10胎牛血清的L-DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),觀察原代及傳代細(xì)胞生長形態(tài)及生長特征,繪制細(xì)胞生長曲線,流式細(xì)胞儀測定MSCs表面標(biāo)記CD44,CD45和CD90的表達(dá)。 結(jié)果:原代培養(yǎng)采用含體積分?jǐn)?shù)為0.15胎牛血清培養(yǎng)基培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖較快,原代(平均為8d)及P1代(平均為5d)傳代時(shí)間較短,兩組骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞P3代的生長曲線相似,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),兩組骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞均流式細(xì)胞儀檢測均呈CD44及CD90陽性表達(dá),CD45陰性表達(dá)。 結(jié)論:用全骨髓接種貼壁培養(yǎng)法,原代培養(yǎng)在含體積分?jǐn)?shù)為0.15胎牛血清的L-DMEM培養(yǎng)液中可減少M(fèi)SCs培養(yǎng)至第3代時(shí)所需時(shí)間。
【學(xué)位授予單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號】:R329

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5 胡e,

本文編號:2666263


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