【摘要】：目的:探究日本血吸蟲(Schistosoma japonicum,SJ)可溶性蟲卵抗原(Soluble Egg Antigen,SEA)感染鼠樹突狀細(xì)胞不同亞型對卵白蛋白誘導(dǎo)的過敏性哮喘的抑制作用及其作用機制。方法:各取5只SEA感染小鼠和PBS對照小鼠,頸椎脫臼處死,取脾,采用磁珠分選的方法提取分離脾臟CD8α~+和CD8α~-樹突狀細(xì)胞,分別標(biāo)記為:SEA-CD8α~+DCs,SEA-CD8α~-DCs,PBS-CD8α~+DCs,PBS-CD8α~-DCs。另取30只BALB/c品系雌性小鼠,隨機分為6組:正常對照組小鼠,不做任何處理(Normal組),單純OVA誘導(dǎo)組,不做過繼轉(zhuǎn)移DCs處理,僅以O(shè)VA誘發(fā)哮喘(OVA組),過繼轉(zhuǎn)移PBS對照小鼠CD8α~+DCs并誘發(fā)哮喘組(PBS-CD8α~+DCs/OVA組),過繼轉(zhuǎn)移PBS對照小鼠CD8α~-DCs并誘發(fā)哮喘組(PBS-CD8α~-DCs/OVA組),過繼轉(zhuǎn)移SEA致敏小鼠CD8α~+DCs并誘發(fā)哮喘組(SEA-CD8α~+DCs/OVA組),過繼轉(zhuǎn)移SEA致敏小鼠CD8α~-DCs并誘發(fā)哮喘組(SEA-CD8α~-DCs/OVA組),在成功誘發(fā)哮喘后,處死各組小鼠。1.肺組織病理學(xué)檢查:解剖小鼠肺組織,制作切片,通過HE染色后,鏡下觀察小鼠肺組織病理改變程度。2.收集各組小鼠支氣管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF),用ELISA法測定IL-4,IL-5,IL-10,TGF-β的含量。3.解剖小鼠脾臟,制備脾單個細(xì)胞懸液,通過OVA刺激后,放置于37℃孵箱中培養(yǎng)72h,收集脾細(xì)胞培養(yǎng)上清(Spleen culture supernatants,SCS),采用ELISA方法測定IL-4,IL-5,IL-10,TGF-β的含量。4.每組小鼠通過眼眶收集血液,離心得到血清,采用ELISA試劑盒檢測血清OVA特異性IgE的水平。結(jié)果:1.小鼠肺組織HE染色鏡下觀察結(jié)果顯示:與OVA處理組、PBS-CD8α~+DCs/OVA組、PBS-CD8α~-DCs/OVA組、SEA-CD8α~+DCs/OVA組相比較,SEA-CD8α~-DCs/OVA組炎癥反應(yīng)減輕,炎細(xì)胞浸潤減少,支氣管粘液分泌減少;肺組織病理評分SEA-CD8α~-DCs/OVA組為6.80±1.30分,與單純OVA組(14.00±1.00分)、PBS-CD8α~+DCs/OVA組(13.00±0.82分)、PBS-CD8α~-DCs/OVA組(12.75±0.50分)、SEA-CD8α~+DCs/OVA組(11.00±0.00分)相比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2.與單獨OVA處理組及過繼轉(zhuǎn)移其他DCs組相比。SEA-CD8α~-DCs/OVA組BALF和SCS中IL-4、IL-5細(xì)胞因子的水平顯著下降,且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.與單獨OVA處理組及過繼轉(zhuǎn)移其他DCs組相比較。SEA-CD8α~-DCs/OVA組BALF和SCS中IL-10、TGF-β細(xì)胞因子的水平顯著升高,且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4.與單獨OVA處理組及其他過繼轉(zhuǎn)移組相比較。SEA-CD8α~-DCs/OVA組血清OVA特異性IgE抗體的含量顯著下降,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.過繼轉(zhuǎn)移SEA感染鼠CD8α~-DCs抑制OVA誘導(dǎo)的過敏性哮喘的發(fā)生。2.過繼轉(zhuǎn)移SEA感染鼠CD8α~-DCs通過增加IL-10、TGF-β的水平,抑制過敏性哮喘的發(fā)生。3.過繼轉(zhuǎn)移SEA感染鼠CD8α~-DCs通過降低IL-4、IL-5的水平,減輕過敏性哮喘的炎癥水平。
【圖文】：

大學(xué)碩士學(xué)位論文 表 2 小鼠肺組織病理改變得分組別數(shù)目 病理總評分（分（n）正常對照組 5 7.00±2.2S-CD8α+DCs 組 5 13.00±0.82S-CD8α-DCs 組 5 12.75±0.50A-CD8α+DCs 組 5 11.00±0.00A-CD8α-DCs 組 5 6.80±1.30*單純 OVA 組 5 14.00±1.00轉(zhuǎn)移 SEA-CD8α-DCs/OVA 與其他組相比，*P<0.05

氣管/血管附近有大量中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤。氣管管壁明顯增厚，部分支氣管周圍可見纖維組織增生度較單純 OVA 誘導(dǎo)組，過繼轉(zhuǎn)移 PBS-CD8α+BS-CD8α-DCs/OVA 組小鼠略有減輕。泡結(jié)構(gòu)被破壞，肺泡壁增厚，肺泡腔萎縮，大量炎性細(xì)轉(zhuǎn)移 SEA-CD8α-DCs/OVA 組小鼠肺組織病理染色情況察，過繼轉(zhuǎn)移 SEA-CD8α-DCs/OVA 組小鼠肺組織病理未誘導(dǎo)組，過繼轉(zhuǎn)移PBS-CD8α+DCs/OVA 及 PBS-CD8α-DA-CD8α+DCs/OVA 組相比較炎癥水平顯著下降（圖 2f氣管未見明顯粘液潴留。支氣管及血管附近未見嗜酸性粒細(xì)胞，巨噬細(xì)胞等細(xì)胞支氣管管壁無明顯增厚，，病變程度較單純 OVA 誘導(dǎo)組PBS-CD8α+DCs/OVA，PBS-CD8α-DCs/OVA 及 SEA-CD組小鼠明顯減輕。肺泡結(jié)構(gòu)未見明顯異常。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R383.24

【參考文獻】

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5 林江濤;祝X≈

本文編號：2656854