本文關(guān)鍵詞：磷霉素對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌生物被膜干預(yù)作用的體外研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分鮑曼不動(dòng)桿菌生物被膜體外模型的建立和分析目的建立鮑曼不動(dòng)桿菌(Acinetobacter baumannii, Ab)的體外生物膜(biofilm, BF)模型,觀察和定量分析鮑曼不動(dòng)桿菌BF形成的動(dòng)態(tài)過程。方法采用生物膜定性陽性的臨床分離的Ab菌株(編號(hào)2814)為實(shí)驗(yàn)菌株,以載玻片為載體,建立Ab體外靜止生物膜模型,分別于建模第4、12、24、48、72、96h,以結(jié)晶紫染色法定量載體表面BF的量,電子掃描顯微鏡(scanning electron microscope, SEM)觀察載體表面BF的形態(tài)及結(jié)構(gòu)。結(jié)果Ab臨床菌株能夠在玻片載體上形成BF,建模12h、24h、48h、72h、96h時(shí),載體表面BF結(jié)晶紫定量結(jié)果分別是0.16±0.04、0.61±0.09、1.58±0.92、2.09±±0.17和1.46±0.49；而SEM可見24h時(shí)載體表面Ab成團(tuán)聚集,菌體外可見少量黏液樣物質(zhì)包裹,細(xì)菌輪廓依稀可見。72h時(shí)載體表面黏液樣物質(zhì)稠密,呈立體樣結(jié)構(gòu),不見細(xì)菌輪廓。結(jié)論鮑曼不動(dòng)桿菌可在無生命的玻片載體上形成BF,BF的形成是一個(gè)動(dòng)態(tài)的過程。24h形成早期BF,72h形成成熟BF。第二部分磷霉素對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌生物被膜形成的抑制作用目的觀察磷霉素抑制鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)載體表面黏附作用及其對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌生物被膜形成的抑制作用。方法采用微量肉湯稀釋法分別測定磷霉素(FOS)和紅霉素(EM)對(duì)Ab的最低抑菌濃度(MIC)。建立Ab生物被膜體外模型,分為空白對(duì)照組、FOS組、EM組,于開始建模時(shí)就加入FOS(1/2MIC)和EM(1/4MIC).第一組于建模24小時(shí)后,SEM聯(lián)合連續(xù)稀釋法活菌計(jì)數(shù)來檢測載體表面Ab黏附量；另一組于建模第三天,采用結(jié)晶紫染色法定量載體表面BF的量、SEM觀察載體表面BF的形態(tài)、連續(xù)稀釋法檢測載體表面BF內(nèi)活菌數(shù)。結(jié)果FOS.EM對(duì)Ab的MIC分別是128μg/ml.256μg/ml.各組載體表面Ab的黏附量：電鏡下觀察：空白對(duì)照組可見Ab相互聚集,并被薄層黏液樣物質(zhì)包裹,而FOS組及EM組僅見少量散在游離的Ab；載體表面的活菌計(jì)數(shù)結(jié)果顯示：FOS組與EM組均少于空白對(duì)照組(P0.01),且FOS組少于EM組(P0.05)。建模3天后,SEM觀察：空白對(duì)照組可見濃厚的黏液樣物質(zhì),而FOS組及EM組僅見稀薄的黏液樣物質(zhì)；結(jié)晶紫染色法半定量BF:FOS組及EM組均少于空白對(duì)照組(P0.01),且FOS組少于EM組(P0.01)；BF內(nèi)活菌計(jì)數(shù)：FOS組與EM組均少于空白對(duì)照組(P0.01),且FOS組少于EM組(P0.01)。結(jié)論FOS可以抑制Ab對(duì)載體的黏附,進(jìn)而抑制其BF的形成及成熟,且其抑制作用強(qiáng)于EM。第三部分磷霉素對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌生物被膜的破壞作用及其與左氧氟沙星的協(xié)同殺菌作用目的觀察磷霉素與左氧氟沙星聯(lián)合應(yīng)用對(duì)30株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌(MDR-Ab)的體外抗菌活性,同時(shí)探討磷霉素對(duì)Ab生物被膜的破壞作用及其與左氧氟沙星聯(lián)合對(duì)BF內(nèi)Ab的殺菌作用。方法 (1)采用棋盤法分別測定不同濃度組合的抗菌藥物對(duì)30株MDR-Ab的最低抑菌濃度,并計(jì)算出部分抑菌濃度指數(shù)(FICI),判定聯(lián)合效應(yīng)。(2)測定左氧氟沙星(LFX)對(duì)Ab(編號(hào)2814)的MIC。(3)建立Ab體外生物被膜模型,分為空白對(duì)照組、磷霉素組、紅霉素組、左氧氟沙星組、磷霉素+左氧氟沙星組、紅霉素+左氧氟沙星組。于建模第三天分別加入上述對(duì)應(yīng)的抗生素及組合,各組分別于抗生素作用0小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)、24小時(shí)后,采用結(jié)晶紫染色法定量載體表面BF的量、連續(xù)稀釋法進(jìn)行載體表面BF內(nèi)活菌計(jì)數(shù),另外,各組載體均于24小時(shí)后于SEM下觀察載體表面BF的形態(tài)結(jié)構(gòu)。結(jié)果(1) FICI≥0.5占57.5%；0.5FICI≤1占40.6%；1FICI≤2占1.9%；FICI2占0%。(2)左氧氟沙星對(duì)Ab的MIC是16μg/ml。(3)Ab成熟BF經(jīng)抗生素及其組合作用24小時(shí)后,SEM觀察發(fā)現(xiàn),磷霉素組與紅霉素組載體表面黏液樣物質(zhì)與空白對(duì)照組比較,BF結(jié)構(gòu)破壞明顯,且磷霉素組明顯于紅霉素組。左氧氟沙星組載體表面BF結(jié)構(gòu)與空白對(duì)照組比較,變化不大。磷霉素+左氧氟沙星組與紅霉素+左氧氟沙星組載體表面粘液樣物質(zhì)較空白對(duì)照組明顯減少。各組間載體表面BF的量的變化：左氧氟沙星組與空白對(duì)照組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；磷霉素組和紅霉素組與空白對(duì)照組比較,第24小時(shí)總體差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),吸光度值：磷霉素組紅霉素組空白對(duì)照組；磷霉素+左氧氟沙星組和紅霉素+左氧氟沙星組與空白對(duì)照組比較,從第8小時(shí)開始,總體差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),吸光度值：磷霉素+左氧氟沙星組紅霉素+左氧氟沙星組空白對(duì)照組。載體表面BF內(nèi)活菌計(jì)數(shù)：磷霉素組、紅霉素組與空白對(duì)照組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；左氧氟沙星組與空白對(duì)照組比較,第24小時(shí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),左氧氟沙星組空白對(duì)照組；磷霉素+左氧氟沙星組和紅霉素+左氧氟沙星組與空白對(duì)照組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的比較,總體差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而且磷霉素+左氧氟沙星組紅霉素+左氧氟沙星組空白對(duì)照組。結(jié)論(1)磷霉素與左氧氟沙星聯(lián)合應(yīng)用有協(xié)同和相加作用,二者無拮抗作用。(2)磷霉素可以破壞Ab已形成的BF,且破壞作用強(qiáng)于紅霉素；對(duì)于BF內(nèi)鮑曼不動(dòng)桿菌,磷霉素與左氧氟沙星有協(xié)同殺菌作用且其殺菌作用強(qiáng)于紅霉素聯(lián)合左氧氟沙星。
【關(guān)鍵詞】：鮑曼不動(dòng)桿菌 生物膜 磷霉素 左氧氟沙星 殺菌作用
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R378
【目錄】：

• 個(gè)人簡歷3-5
• 中文摘要5-9
• 英文摘要9-14
• 前言14-18
• 第一部分 鮑曼不動(dòng)桿菌生物膜體外模型的建立和分析18-26
• 材料與方法18-21
• 結(jié)果21-23
• 討論23-26
• 第二部分 磷霉素對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌生物被膜形成的抑制作用26-37
• 材料與方法26-30
• 結(jié)果30-33
• 討論33-37
• 第三部分 磷霉素對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌生物被膜形成的破壞作用及其與左氧氟沙星的協(xié)同殺菌作用37-51
• 材料與方法37-41
• 結(jié)果41-46
• 討論46-51
• 參考文獻(xiàn)51-57
• 附錄57-58
• 文獻(xiàn)綜述58-72
• 綜述參考文獻(xiàn)65-72
• 致謝72-73
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文73-74
• 附件74-76

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 楊志偉;季萍;張堅(jiān);;多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌16S rRNA甲基化酶基因及qacE△1-sul1基因檢測的研究[J];臨床檢驗(yàn)雜志;2010年05期

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  本文關(guān)鍵詞：磷霉素對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌生物被膜干預(yù)作用的體外研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：265651