本文關鍵詞：江蘇省HFMD病原譜研究及柯薩奇B3疫苗評價小鼠模型的初步建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)是一種嬰幼兒人群常見的急性傳染病,近年來在世界范圍特別是亞太地區(qū)廣泛流行。腸道病毒(Enterovirus,EV)為引起HFMD的主要病原體,其中人類腸道病毒71型(Enterovirus A71,EV-A71)和柯薩奇病毒A組16型(Coxsackievirus A16,CV-A16)因引發(fā)多個國家或地區(qū)的HFMD暴發(fā)而受到廣泛關注。然而HFMD病原譜以及主要病原的疫苗學研究仍存在諸多亟需解決的問題,主要表現為:1.目前缺乏HFMD發(fā)病率和基于發(fā)病率的病原譜資料,闡明HFMD發(fā)病率及病原譜對評估HFMD的疾病負擔,針對性的研發(fā)疫苗具有重要意義;2.腸道病毒的遺傳物質在流行中易發(fā)生變異,導致流行毒株及其引發(fā)的HFMD癥狀的復雜性,因此需明確EV-A71/CV-A16以及其他腸道病毒的分子流行特征,以確定有效的疫苗株;3.EV-B組病毒除引起HFMD外,易導致病毒性心肌炎、腦炎等重癥疾病,目前尚無針對CV-B組特別是CV-B3的疫苗,開展CV-B3動物模型和疫苗研究,可為研發(fā)防控病毒性心肌炎疫苗提供數據。針對上述HFMD病原學以及CV-B3的疫苗學研究方面存在的問題,本研究采用主動監(jiān)測和病例報告結合的方法對江蘇省HFMD的發(fā)病率和病原譜進行研究,同時分析HFMD主要病原的分子流行特征,初步建立CV-B3動物模型,開展了滅活疫苗免疫保護效果研究。1.對江蘇省EV-A71疫苗Ⅲ期臨床9442例對象進行為期兩年的前瞻性隊列研究,采用主動監(jiān)測方法獲得了2012-2013年該人群中HFMD的發(fā)病率為150.9/1000人年,前5位發(fā)病率(1000人年)的腸道病毒依次為CV-A16(54.5)、CV-B3(14.2)、CV-A10(8.5)、EV-A71(5.9)和CV-A6(5.7);2012-2013年該人群HFMD病原譜為CV-A16(36.1%)、CV-B3(9.3%)、CV-A10(5.6%)、CV-A6(3.7%)、E9(3.1%)、EV-A71(2.2%)、CV-A2/CV-A12/CV-A22/CV-A14/E16(1.9%)、CV-A8/CV-A9/E3/E11/E24(1.2%)、CV-A1/CV-A4/CV-B5/CV-A21/E6/E18/E19(0.6%)、未分型腸道病毒(8.6%)和非腸道病毒(25.0%)。2.采用病例報告研究獲得2013-2014年該人群中HFMD的發(fā)病率為29.9/1000人年,前5位發(fā)病率(1000人年)的腸道病毒依次為EV-A71(4.2)、CV-A16(1.2)、CV-A22(1.1)、CV-A6(0.9)和CV-A24(0.7)。2013-2014年該人群HFM D病原譜:EV-A71(14.2%)、CV-A16(3.9%)、CV-A22(3.5%)、CV-A6(2.8%)、CV-A24(2.5%)、CV-A10/CV-B3/E6(2.1%)、CV-B5(1.8%)、E9(1.4%)、CV-A9/CV-B4(1.1%)、CV-B2/E1/E11(0.7%)、CV-A1/CV-A2/CV-A20/E3/E7/E15/E16/E21/E25/EV-B69/EV-C99(0.4%)、未分型腸道病毒(6.4%)和非腸道病毒(51.8%)。應用二代測序在腸道病毒陰性病例標本中檢測到陽性率較高的鏈球菌和人類皰疹病毒5型,在HFMD病原譜中構成比分別為27.9%和47.8%。3.對兩年間引起HFMD的主要腸道病毒進行分離和序列分析,獲得EV-A71、CV-A16、CV-A6等毒株的分子進化特征:2012-2014年間EV-A71毒株為C4a亞型不同分支毒株共流行;兩年間流行的CV-A16毒株分別屬于B2a亞型不同分支;2012年CV-A6毒株為F2和F3亞型共流行,而2013年主要流行F3亞型毒株;2012年流行的CV-A10毒株屬于基因型C和D;2012年流行的CV-B3毒株屬于D2亞型不同分支。4.應用分離的CV-B3強毒株(286/CV-B3),初步建立了疫苗評價用小鼠模型,并利用該模型對制備的CV-B3滅活疫苗的保護效果進行評價。結果顯示滅活疫苗免疫的小鼠在應用強毒株286/CV-B3攻毒時,呈現較好的保護效果。綜上所述,本研究獲得了2012-2014年江蘇省嬰幼兒人群HFMD的發(fā)病率和病原譜,提出HFMD多價疫苗應包括病原譜中比例較高且危害較大的CV-B3和CV-A6。為解決CV-B3疫苗研究中存在的瓶頸,初步建立了CV-B3疫苗評價的小鼠動物模型,并對CV-B3滅活疫苗保護效果進行了研究,為HFMD的防控以及CV-B3疫苗研發(fā)提供了依據和工具。
【關鍵詞】：手足口病 腸道病毒 病原譜 發(fā)病率 疫苗 柯薩奇病毒B組3型
【學位授予單位】：中國食品藥品檢定研究院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R-332;R392
【目錄】：

• 中文摘要7-9
• Abstract9-11
• 前言11-17
• 一、HFMD腸道病毒病原譜研究現狀11-14
• 1 HFMD腸道病毒病原譜概況11-13
• 1.1 EV-A組病毒與HFMD11-12
• 1.2 EV-B組病毒與HFMD12-13
• 1.3 EV-C組病毒與HFMD13
• 2 HFMD腸道病毒病原譜和主要病原分子流行特征相關研究存在的問題13-14
• 二、HFMD腸道病毒疫苗研究現狀14-15
• 1 非EV-A71/CV-A16 腸道病毒疫苗研究現狀14
• 2 HFMD腸道病毒疫苗研究存在的問題14-15
• 三、本研究的目的、意義及技術路線15-17
• 1 目的和意義15-16
• 2 主要技術路線16-17
• 第一部分 江蘇省 2012-2014 年HFMD病原譜研究17-32
• 引言17
• 一、江蘇省 2012-2013 年HFMD病原譜主動監(jiān)測研究17-25
• 1.1 儀器與耗材17-18
• 1.2 試劑18
• 1.3 引物列表18
• 1.4 實驗材料來源18-19
• 1.5 實驗方法19-21
• 1.6 結果21-23
• 1.6.1 2012-2013 年江蘇省三地HFMD流行情況21
• 1.6.2 非EV-A71/CV-A16 腸道病毒樣本檢測結果21-22
• 1.6.3 59 例非EV-A71/CV-A16 腸道病毒感染病例病原譜組成22-23
• 1.6.4 臨床癥狀及病程23
• 1.7 討論23-25
• 二、江蘇省 2013-2014 年HFMD病原譜病例報告研究25-31
• 2.1 儀器與耗材25
• 2.2 試劑25
• 2.3 引物列表25
• 2.4 實驗材料來源25
• 2.5 實驗方法25-26
• 2.6 結果26-29
• 2.6.1 2013-2014 年江蘇省三地HFMD流行情況26
• 2.6.2 非EV-A71/CV-A16 腸道病毒樣本檢測結果26-28
• 2.6.3 腸道病毒陰性樣本的二代測序檢測結果28
• 2.6.4 兩年監(jiān)測期發(fā)病率和病原譜比較分析結果28-29
• 2.7 討論29-31
• 小結31-32
• 第二部分 江蘇省 2012-2014 年HFMD主要病原分子流行特征研究32-58
• 引言32-33
• 一、病原分離33-37
• 1.1 儀器與耗材33-34
• 1.2 試劑34
• 1.3 材料34-35
• 1.4 方法35-36
• 1.5 結果36-37
• 二、主要病原的分子流行特征研究37-57
• 2.1 EV-A7137-43
• 2.2 CV-A1643-46
• 2.3 CV-A646-49
• 2.4 CV-A1049-52
• 2.5 CV-B352-57
• 小結57-58
• 第三部分CV-B3 疫苗動物模型的初步建立與滅活疫苗保護效果評價58-73
• 引言58-59
• 一、CVB3 小鼠模型的初步建立59-72
• 2.1 儀器和耗材59
• 2.2 材料和試劑59-60
• 2.3 方法60-63
• 2.4 結果63-70
• 2.4.1 286/CV-B3 在BALB/c小鼠的毒力研究63-64
• 2.4.2 確定小鼠模型攻毒劑量64-65
• 2.4.3 瀕死小鼠病理及 286/CV-B3 毒株的組織噬性65-68
• 2.4.4 286/CV-B3 病毒攻擊后小鼠不同組織病毒載量的測定68-69
• 2.4.5 CV-B3 滅活疫苗保護效果評價69-70
• 2.5 討論70-72
• 小結72-73
• 總結73-74
• 綜述 腸道病毒多價疫苗——防控手足口病的新方向74-84
• 引言74-75
• 1. 腸道病毒引起疾病的流行75-78
• 1.1 EV-A組病毒75-77
• 1.1.1 EV-A71 與CV-A1676
• 1.1.2 A組其他病毒76-77
• 1.2 EV-B組77-78
• 1.2.1 CV-B377
• 1.2.2 CV-B577-78
• 1.2.3 B組其他病毒78
• 1.3 EV-C組病毒78
• 2．腸道病毒感染引起疾病的臨床特征78-79
• 2.1 EV-A組病毒79
• 2.2 EV-B組病毒79
• 3.腸道病毒疫苗研究79-84
• 3.1 EV-A71 疫苗80
• 3.2 CV-A16 疫苗80-81
• 3.3 EV-A71/CV-A16 聯合疫苗81-82
• 3.3.1 雙價EV-A71/CV-A16 滅活疫苗81
• 3.3.2 雙價EV-A71/CV-A16 VLP疫苗81-82
• 3.4 EV-B組疫苗82-84
• 參考文獻84-97
• 縮略詞表97-98
• 附表98-103
• 個人簡歷及發(fā)表文章目錄103-105
• 致謝10

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前1條

1 吳星;梁爭論;;腸道病毒71型實驗室診斷研究進展[J];微生物學免疫學進展;2012年04期

  本文關鍵詞：江蘇省HFMD病原譜研究及柯薩奇B3疫苗評價小鼠模型的初步建立，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：264504