發(fā)布時間：2020-04-16 09:21

【摘要】：銅綠假單胞菌是在醫(yī)院引起感染的最常見病原菌之一。在免疫缺陷及囊胞性纖維癥患者中,銅綠假單胞菌定殖人體肺部會引起慢性炎癥,致使肺功能逐漸喪失,最終導致患者呼吸衰竭甚至死亡。與浮游生物相比,生物被膜中的細菌抗生素抗性明顯增加,抗免疫能力增強。細菌生物被膜形成的標志是菌體被胞外基質(zhì)包圍,胞外基質(zhì)(EPS)由胞外多糖,脂肪酸,胞外DNA和蛋白質(zhì)等混合物組成,其中胞外多糖是EPS的主要成分。銅綠假單胞菌至少產(chǎn)生三種不同的胞外多糖:藻酸鹽,Pel和Psl,這三種多糖決定著生物被膜結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性,在生物膜發(fā)展過程中發(fā)揮著不同的作用。本研究利用細菌顯微追蹤技術(shù)在單細胞水平上研究了胞外多糖水解酶PslG與PelA對細菌運動及其生物被膜的影響。PslG是Psl合成過程中的周質(zhì)蛋白。添加PslG后細菌運動明顯加快,運動速度提高到原來4-5倍,運動范圍擴大,細菌處于無限制狀態(tài);細菌運動無明確方向,軌跡曲折,軌跡面積覆蓋效率提高;此外,細菌需要兩倍多的時間來形成生物被膜。關(guān)于Psl結(jié)構(gòu)及作用也已有一定的研究,但我們對Pel的結(jié)構(gòu)仍知之甚少,其具體功能還尚未明確。我們發(fā)現(xiàn)了PelA對銅綠假單胞菌細菌表面運動特性以及生物被膜形成的具體作用,我們觀察到PelA在單細胞水平上對銅綠假單胞菌初期粘附的表面運動也有著一定的影響,對生物膜的形成有一定的抑制作用;在形成生物被膜后期添加PelA,出現(xiàn)較明顯的生物被膜降解現(xiàn)象。同時,為了達到更好的生物被膜降解效果,我們同時添加PslG、PelA,明顯看到已經(jīng)形成生物被膜的解離現(xiàn)象,這個現(xiàn)象可看做生物被膜形成的逆過程。多個因素共同作用可以達到更好的抑制生物被膜的效果。
【圖文】：

通過自身分泌的胞外多糖、蛋白和胞外 DNA其中而形成大量膜樣聚集體，我們稱之為生物被膜（Bio界中存在廣泛，且存在形式多種多樣，附著在固體表面則聚集在氣液界面則形成液體生物被膜。文虎克在牙菌斑中用自制的顯微鏡觀察到大量微生物的存次發(fā)現(xiàn)。隨后，在過去的 300 多年里，受限于當時的科技水被膜進行更微觀的細致觀察，且人們對生物被膜的認知不到生物被膜是細菌在自然界中的普遍存在方式，所以微生征的研究很集中，而關(guān)于生物被膜的文獻報道卻很少。2技術(shù)進步，科學家們逐漸發(fā)現(xiàn)自然界的細菌大部分都是以生，，并且生物被膜在人類社會有著重要的作用[1; 2]，從此越來行生物被膜的研究（圖 1-1），生物被膜這一名詞也逐漸進

圖 1-2 生物被膜的發(fā)展階段以及在各個階段發(fā)揮作用的因e stage of biofilm development and the factors that play the ro膜的研究現(xiàn)狀
【學位授予單位】：天津大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R378

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本文編號：2629627