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Aire通過(guò)miR-155調(diào)控M1型巨噬細(xì)胞極化的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-04-13 17:26
【摘要】:Aire(Autoimmune regulator)是一種轉(zhuǎn)錄因子,Aire基因的突變將導(dǎo)致1型糖尿病、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等自身免疫病的發(fā)生,但Aire基因突變所伴隨的念珠菌感染原因至今仍不清楚。巨噬細(xì)胞作為一類(lèi)重要的免疫細(xì)胞,具有顯著異質(zhì)性,依據(jù)其所處微環(huán)境的不同可以向不同表型極化,包括M1型和M2型。其中M1型巨噬細(xì)胞在抵抗多種病原體,包括念珠菌在內(nèi)的真菌中發(fā)揮著重要作用。課題組前期結(jié)果表明:Aire可以促進(jìn)小鼠單核巨噬細(xì)胞系RAW264.7向M1型巨噬細(xì)胞極化,但其是否同樣影響正常巨噬細(xì)胞向M1型巨噬細(xì)胞極化尚不清楚。有研究報(bào)道m(xù)i R-155在巨噬細(xì)胞向M1型極化的過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用,同時(shí)研究還發(fā)現(xiàn)Aire能夠調(diào)控胸腺上皮細(xì)胞中mi R-155的表達(dá),但其在外周(如巨噬細(xì)胞)是否有作用并不清楚。因此我們?cè)O(shè)想表達(dá)于外周的Aire是否可通過(guò)調(diào)控巨噬細(xì)胞中mi R-155的表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)巨噬細(xì)胞向M1型極化,從而為Aire基因的突變所伴隨的念珠菌易感性提供可能的解釋。為此,我們分別以Aire-/-鼠腹腔巨噬細(xì)胞和Aire過(guò)表達(dá)的腹腔巨噬細(xì)胞為研究對(duì)象,進(jìn)行了如下研究:一、Aire對(duì)M1型巨噬細(xì)胞極化影響的研究:首先我們觀察了Aire對(duì)巨噬細(xì)胞極化類(lèi)型的影響,結(jié)果顯示,Aire促進(jìn)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞中M1型巨噬細(xì)胞相關(guān)分子(IL-1α、IL-6和i NOS)及表面分子(MHC-II和CD16/32)表達(dá),抑制M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)分子(Arg-1)及表面分子(Dectin-1和CD206)表達(dá),說(shuō)明Aire促進(jìn)巨噬細(xì)胞向M1型極化,抑制其向M2型極化。二、Aire通過(guò)mi R-155對(duì)M1型巨噬細(xì)胞極化影響的研究:進(jìn)一步我們研究了Aire是如何影響巨噬細(xì)胞向M1型極化的,結(jié)果顯示,Aire可以上調(diào)腹腔巨噬細(xì)胞中mi R-155的表達(dá)水平。并且在上述兩種細(xì)胞模型基礎(chǔ)上干預(yù)mi R-155(過(guò)表達(dá)或抑制)后,能夠逆轉(zhuǎn)Aire對(duì)M1型巨噬細(xì)胞的極化作用,表明Aire可能通過(guò)調(diào)控mi R-155的表達(dá)進(jìn)而促進(jìn)M1的極化。此外,我們檢測(cè)了mi R-155調(diào)控M1極化過(guò)程的下游分子SOCS1的表達(dá),結(jié)果顯示,Aire-/-鼠明顯高于WT組;轉(zhuǎn)染Aire組SOCS1的表達(dá)低于GFP組,提示Aire可通過(guò)調(diào)控mi R-155表達(dá)影響M1型巨噬細(xì)胞的極化,并且其可能的分子機(jī)制之一是通過(guò)影響SOCS1發(fā)揮的作用。綜上,本研究證實(shí)了Aire可以促進(jìn)巨噬細(xì)胞向M1型極化,并通過(guò)mi R-155影響M1型巨噬細(xì)胞的極化進(jìn)而初步探討其可能的機(jī)制,為全面了解胸腺外Aire表達(dá)的功能,以及為Aire基因的突變所伴隨的念珠菌易感性提供了可能的解釋。
【圖文】:

Aire通過(guò)miR-155調(diào)控M1型巨噬細(xì)胞極化的研究


Aire的結(jié)構(gòu)

巨噬細(xì)胞


CD4+Th1 細(xì)胞反應(yīng)外,M1 細(xì)胞分泌的補(bǔ)體級(jí)聯(lián)因子和表達(dá)和 II 類(lèi)分子,,增強(qiáng)對(duì)病原體或腫瘤的適應(yīng)性免疫應(yīng)答[17]。IL-13、糖皮質(zhì)激素和抗原-抗體免疫復(fù)合物(immune comll 樣受體配體刺激可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化成 M2 功能表型。這種 NO 產(chǎn)生減少,促炎細(xì)胞因子的分泌減少或不存在,同時(shí)促進(jìn)重塑和修復(fù)[17]。極化為 M2 的巨噬細(xì)胞也顯示出消除細(xì)胞外)的能力增強(qiáng),并參與適應(yīng)性免疫應(yīng)答向 CD4+Th2 細(xì)胞方向的極化也與抑制抗腫瘤活性有關(guān)。M2 型巨噬細(xì)胞分泌的抗炎拮抗劑(IL-1ra),IL-10 和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β),抑制細(xì)胞因子的產(chǎn)生。對(duì)于不同的刺激物激活,M2 巨噬細(xì)胞可亞型:M2a(由 IL-4/13 刺激產(chǎn)生),M2b(在 Toll 樣受體的復(fù)合物刺激誘導(dǎo))和 M2c(暴露于巨噬細(xì)胞對(duì)抗炎癥刺激物如 或 TGF-β 中的作用)[18]。
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類(lèi)號(hào)】:R392

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本文編號(hào):2626237

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