【摘要】：阪崎克羅諾桿菌(Cronoabcter sakazakii)是一種較易引發(fā)新生兒、早產(chǎn)兒及免疫力低下者敗血癥、腦膜炎、小腸結(jié)腸炎等疾病的致病菌,且致死率高達(dá)80%,目前尚未找到確切性的致病機(jī)制,而有關(guān)LPS在阪崎克羅諾桿菌中的致病作用及其脆弱擬桿菌的干預(yù)研究報道較少。本課題通過提取阪崎克羅諾桿菌LPS腹腔注射SD幼鼠造模,取糞便提取DNA通過測序檢測腸道菌群的變化;取小腸、結(jié)腸做石蠟切片顯微鏡下觀察組織損傷程度;取血清用ELISA試劑盒檢測血清中前炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6的含量表達(dá)、抗炎性因子IL-10及血清中NO的表達(dá);取小腸提RNA做熒光定量檢測小腸緊密連接蛋白及Toll樣受體TLR4、一氧化氮合酶i NOS的含量表達(dá)。結(jié)果表明阪崎克羅諾桿菌LPS可以引發(fā)腸道菌群紊亂,影響炎性因子的表達(dá),整體上來看炎性因子先升高最后逐漸降低,除此之外,還影響了腸道緊密連接蛋白(Claudin-4,Occludin)、TLR4以及i NOS的表達(dá),使腸道組織受到不同程度損傷。益生菌對于腸性疾病的治療有著顯著作用,而脆弱擬桿菌的益生作用報道較少,所以開展脆弱擬桿菌NCTC 9343對阪崎克羅諾桿菌LPS致病的干預(yù)研究。本實驗分別在注射阪崎克羅諾桿菌LPS之前5天灌胃脆弱擬桿菌和注射阪崎克羅諾桿菌脂多糖之后5天灌胃脆弱擬桿菌,然后取大腸糞便、小腸、結(jié)腸、血清,分別從菌群、組織切片、細(xì)胞炎性因子、基因和蛋白水平上進(jìn)行探究,結(jié)果表明脆弱擬桿菌NCTC 9343預(yù)防組和治療組都能夠有效改善腸道菌群結(jié)構(gòu),使感染阪崎克羅諾桿菌LPS組的SD大鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)恢復(fù)接近正常組老鼠腸道菌群水平,同時兩個實驗組都能夠降低炎性因子水平,對于緊密連接蛋白、TLR4、i NOS的表達(dá)都具有顯著調(diào)節(jié)作用。本論文為阪崎克羅諾桿菌脂多糖致病的分子機(jī)制提供了重要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù),對有效預(yù)防和控制該菌感染具有重要意義。
【圖文】：

圖 1.1 LPS 致病機(jī)制通路圖（作者自繪）Fig1.1 The pathogenesis pathway of LPS當(dāng) LPS 侵入機(jī)體后，首先被 LBP 識別，LBP 可加快 LPS 的解聚，然后與 結(jié)合并將之運送至免疫細(xì)胞膜表面與 CD14結(jié)合，形成 LPS-LBP- CD14三聯(lián)[43]。隨后將 LPS 轉(zhuǎn)運至 TLR4-MD-2 蛋白復(fù)合體處，，在 MD-2 的幫助下與 T，激活 TLR4。TLR4 被激活之后導(dǎo)致其膜內(nèi)構(gòu)像發(fā)生改變，并將此種信號免疫細(xì)胞內(nèi)部，繼而活化核轉(zhuǎn)錄因子 NF-кB 和絲裂原活化蛋白激酶（MAP

圖 1.2 益生菌與腸道上皮屏障作用機(jī)制示意圖[65].2 Schematic diagram of mechanism between probiotics and intestinal epithelial barrier[65] 益生脆弱擬桿菌的研究益生菌是對人體健康有益的活菌，攝入適量益生菌能夠改善腸道菌群的平衡預(yù)防和治療腸道性疾病有著重要作用[66,67]，例如腹瀉、炎癥性腸病等。益生在于平時我們所食用的食物上，它對于我們的身體有益，食用足夠量的益生以增加機(jī)體免疫力來對抗病原菌。益生菌的在此方面所起到的益生作用比較，總體可以分為兩種：一種是菌體自身以及其活性代謝產(chǎn)物對有害物質(zhì)的直用，這種作用可通過粘附或者降解有害物質(zhì)達(dá)到；第二種是通過對腸道菌群節(jié)及對代謝酶的調(diào)控間接對其進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)作用，使機(jī)體中有益和有害微生到生態(tài)平衡。 目前，較為常見的益生菌是乳酸菌和雙歧桿菌[68]，而有關(guān)益生擬桿菌的研究極少。所以開展益生脆弱擬桿菌的研究意義重大。脆弱擬桿菌是一種革蘭氏陰性桿菌，屬于一種專性厭氧菌。最開始脆弱擬桿從致病部位分離得到的[69]，所以被認(rèn)為是對人體有害的細(xì)菌，隨著對其更加
【學(xué)位授予單位】：合肥工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R378

【參考文獻(xiàn)】

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1 張曉音;吳e

本文編號：2617497