本文關(guān)鍵詞：不同劑量黃芩苷對(duì)子癇前期模型大鼠肝細(xì)胞XIAP、Bcl-2和Caspase-9的表達(dá)及肝細(xì)胞凋亡率的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：子癇前期(pre-eclampsia,PE)是一種常見(jiàn)的妊娠中晚期特發(fā)性疾病,其發(fā)病機(jī)制至今不明。肝臟被認(rèn)為是子癇前期除了胎盤(pán)以外最常受損的器官,主要表現(xiàn)為肝細(xì)胞凋亡和血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的增加。研究表明,子癇前期患者胎盤(pán)滋養(yǎng)細(xì)胞XIAP、Bcl-2的表達(dá)減少,Caspase-9的表達(dá)增多,可能與其發(fā)病機(jī)制有關(guān),但缺乏肝細(xì)胞凋亡與其相關(guān)機(jī)制的研究。黃芩苷(Baicalin)對(duì)細(xì)菌、病毒、氧化作用、炎癥反應(yīng)、變態(tài)反應(yīng)、腫瘤等有一定的對(duì)抗作用。目的:本次研究的目的是探討不同劑量黃芩苷干預(yù)對(duì)子癇前期模型大鼠肝臟組織中XIAP、Bcl-2及Caspase-9表達(dá)及肝細(xì)胞凋亡率的影響。方法:將75只孕鼠隨機(jī)分為2組:對(duì)照組(control group,CG組)15只、子癇前期模型(preeclampsia,PE)組60只;各組孕鼠均在妊娠第13~20天給藥,CG組[生理鹽水,125 mg/(kg·d)],子癇前期模型組[L-NAME,125 mg/(kg·d)];在妊娠第16天,子癇前期模型組二次隨機(jī)分組,每組15只:空白對(duì)照亞組(Blank control subgroup,BC組)、低劑量黃芩苷干預(yù)亞組(Low-dose baicalin intervention subgroup,LB組)、中劑量黃芩苷干預(yù)亞組(Medium-dose baicalin intervention subgroup,MB組)和高劑量黃芩苷干預(yù)亞組(High--dose baicalin intervention subgroup,HB組)。在妊娠第16天BC組加注生理鹽水[0.5ml/d,腹腔注射],LB組、MB組、HB組分別加注黃芩苷[(50,100,150)mg/(kg·d),腹腔注射]。在妊娠第10、13、16、19天檢測(cè)所有大鼠尾動(dòng)脈壓、24h尿蛋白及觀察L-NAME、黃芩苷用藥情況。妊娠第21天,在麻醉、無(wú)菌條件取肝臟組織。用免疫組化(SABC)方法定位檢測(cè)各組孕鼠肝臟組織中XIAP、Bcl-2和Caspase-9蛋白定位表達(dá)情況,通過(guò)SCANSCOBC醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)對(duì)圖片處理進(jìn)行半定量分析。用TUNEL實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)各組孕鼠肝細(xì)胞的凋亡情況。采用SPSS17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,兩獨(dú)立正態(tài)分布樣本間比較采用t檢驗(yàn),不同時(shí)間點(diǎn)均數(shù)比較采用重復(fù)測(cè)量方差分析,多組間樣本均數(shù)比較采用F檢驗(yàn)和LSD-t檢驗(yàn),α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn),P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.妊娠第10天,對(duì)照組、子癇前期模型組孕鼠各指標(biāo)間比較:孕次(均為初產(chǎn)),尾動(dòng)脈收縮[(109.20±4.51)VS(107.80±5.93)mm Hg,t=1.01,P=0.324],舒張壓[(77.47±9.93)VS(78.75±6.80)mm Hg,t=0.59,P=0.557],24h尿蛋白[(6.24±0.27)VS(6.11±0.54)mg/24h,t=0.85,P=0.401],差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);2.妊娠16天(造模3天后),對(duì)照組與子癇前期模型組孕鼠各指標(biāo)間比較:大鼠尾動(dòng)脈收縮壓[(115.20±4.90)VS(135.47±5.43)mm Hg,t=10.72,P0.001]、舒張壓[(77.93±7.82)VS(89.40±4.75)mm Hg,t=4.01,P0.001];24h尿蛋白[(6.21±0.28)VS(7.52±0.58)mg/24h,t=7.79,P0.001],差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);3.妊娠第19天(不同劑量組黃芩苷干預(yù)后第4天),各組孕鼠檢測(cè)指標(biāo)間比較:(1)對(duì)照組、空白對(duì)照亞組、低劑量黃芩苷干預(yù)亞組、中劑量黃芩苷干預(yù)亞組、高劑量黃芩苷干預(yù)亞組:孕鼠尾動(dòng)脈收縮壓[(118.67±4.95)VS(144.60±5.32)VS(130.13±5.71)VS(122.60±3.91)VS(108.87±17.72)mm Hg,F=43.78,P0.001]、舒張壓[(81.60±6.67)VS(90.80±6.42)VS(82.40±7.60)VS(81.33±5.50)VS(75.73±11.54)mm Hg,F=5.12,P0.001]、24h尿蛋白[(6.24±0.26)VS(11.14±0.62)VS(6.91±0.34)VS(7.07±0.28)VS(7.31±1.22)mg/24h,F=42.72,P0.001];差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(2)(1)各組孕鼠尾動(dòng)脈收縮壓間的比較:與對(duì)照組相比,空白對(duì)照亞組收縮壓顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義t=7.80,P0.001;與空白對(duì)照亞組相比,低、中、高劑量黃芩苷干預(yù)亞組收縮壓間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,t值分別為4.35、6.62、10.75,P值均為0.001;低、中、高劑量黃芩苷干預(yù)亞組收縮壓間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:低與中劑量間t=2.27,P=0.027,中與高劑量間t=4.13,P0.001,低與高劑量間t=6.40,P0.001;對(duì)照組與中劑量黃芩苷干預(yù)亞組收縮壓間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義t=1.18,P=0.241;(2)各組孕鼠尾動(dòng)脈舒張間的比較:與對(duì)照組相比,空白對(duì)照亞組舒張壓顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義t=3.22,P=0.002;對(duì)照組與中劑量黃芩苷干預(yù)組舒張壓間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義t=0.09,P=0.926;與空白對(duì)照亞組相比,低、中、高劑量黃芩苷干預(yù)亞組舒張壓間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,t值分別為2.94、3.31、5.27,P值分別為0.004、0.001、0.001;低、中、高劑量黃芩苷干預(yù)亞組舒張壓間:低與中劑量間t=0.37,P=0.711,中與高劑量間t=1.96,P=0.054,低與高劑量間t=2.33,P=0.023;(3)各組孕鼠24h尿蛋白的比較:與對(duì)照組相比,空白對(duì)照亞組24h尿蛋白顯著升高差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意t=20.53,P0.001;空白對(duì)照亞組與低、中、高劑量黃芩苷干預(yù)亞組24h尿蛋白差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,t值分別為17.69、17.05、16.04,P值均為0.001;低、中、高劑量黃芩苷干預(yù)亞組間24h尿蛋白無(wú)明顯差異:低與中劑量間t=0.64,P=0.521,中與高劑量間t=1.00,P=0.321,低與高劑量間t=1.65,P=0.104。4.免疫組織化學(xué)(SABC)方法檢測(cè)XIAP、Bcl-2及Caspase-9、表達(dá)的比較:(1)各組間肝細(xì)胞中XIAP表達(dá)的比較:與對(duì)照組相比,空白對(duì)照亞組灰度值明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義t=53.18,P0.001;與空白對(duì)照亞組相比,低、中、高劑量黃芩苷干預(yù)亞組灰度值表達(dá)明顯減少,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,t值分別為23.27、33.28、43.59,P值均為0.001;低、中、高劑量黃芩苷干預(yù)組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:低與中劑量間t=10.02,P0.001,中與高劑量組間t=10.30,P0.001,低與高劑量間t=20.32,P0.001。(2)各組間肝細(xì)胞中Bcl-2表達(dá)水平的比較:與對(duì)照組相比,空白對(duì)照亞組灰度值明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義t=22.31,P0.001;與空白對(duì)照亞組相比,低、中、高劑量黃芩苷干預(yù)組灰度值表達(dá)明顯減少,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,t值分別為4.33、7.69、12.61,P值均為0.001;且低、中、高劑量黃芩苷干預(yù)組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:低與中劑量間t=3.36,P=0.001,中與高劑量組間t=4.92,P0.001,低與高劑量間t=8.28,P0.001。(3)各組間肝細(xì)胞中Caspase-9表達(dá)水平的比較:與對(duì)照組相比,空白對(duì)照亞組灰度值明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義t=46.90,P0.001;與空白對(duì)照亞組相比,低、中、高劑量黃芩苷干預(yù)組表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:t值分別為14.00、34.32、25.71,P值均為0.001;低、中、高劑量黃芩苷干預(yù)組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:低與中劑量組間t=20.31,P0.001,中與高劑量組間t=8.61,P0.001,低與高劑量組間t=11.70,P0.001。5.各組肝細(xì)胞凋亡率的比較:與對(duì)照組相比,空白對(duì)照亞組肝細(xì)胞凋亡率顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義t=18.33,P0.001;與空白對(duì)照亞組相比,低、中、高劑量黃芩苷干預(yù)亞組明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,t值分別為7.25、10.81、10.80,P值均為0.001;低與中劑量組間t=3.56,P=0.001,低與高劑量組間t=3.55,P=0.001,中與高劑量組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P=1.000。結(jié)論:本研究結(jié)果表明,黃芩苷干預(yù)后可以使子癇前期模型大鼠肝細(xì)胞中的,XIAP、Bcl-2表達(dá)量增加,Caspase-9表達(dá)減少,同時(shí)肝細(xì)胞凋亡率下降;黃芩苷對(duì)子癇前期模型大鼠肝臟有保護(hù)作用,并呈現(xiàn)劑量依賴(lài)性的特點(diǎn),驗(yàn)證了黃芩苷具有治療子癇前期潛在的臨床價(jià)值,其安全有效的治療劑量仍需進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】：子癇前期 黃芩苷 肝細(xì)胞 XIAP Bcl-2
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R285.5;R-332
【目錄】：

• 中文摘要5-9
• 英文摘要9-13
• 常用縮寫(xiě)詞中英文對(duì)照表13-14
• 前言14-15
• 1 材料與方法15-20
• 1.1 一般資料15
• 1.2 研究方法15-19
• 1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)19
• 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理19-20
• 2 結(jié)果20-30
• 2.1 各組孕鼠尾動(dòng)脈壓及 24h尿蛋白的比較20-22
• 2.2 肝臟組織鏡下結(jié)構(gòu)的比較（HE染色）22-23
• 2.3 XIAP在各組肝細(xì)胞中的表達(dá)23-24
• 2.4 Bcl-2 在各組肝細(xì)胞中的表達(dá)24-26
• 2.5 Caspase-9 在各組肝細(xì)胞的表達(dá)26-27
• 2.6 各組肝細(xì)胞凋亡率（TUNEL法）27-30
• 3 討論30-35
• 4 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-40
• 綜述40-52
• 參考文獻(xiàn)47-52
• 致謝52-53
• 在學(xué)期間研究成果53-54
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷54

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本文編號(hào)：261371