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ApoM對TNF-α刺激的內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子表達(dá)的影響

發(fā)布時間:2020-03-21 03:11
【摘要】:目的:探索內(nèi)皮細(xì)胞株(EA.hy926細(xì)胞)中載脂蛋白M與1磷酸鞘氨醇(S1P)以及PKCδ對炎癥因子(ICAM-1)表達(dá)的影響。方法:(1)構(gòu)建Apo M慢病毒載體轉(zhuǎn)染EAhy926細(xì)胞,分為Apo M過表達(dá)組(Apo M-OE)和Apo M陰性對照組(NC)。將NC細(xì)胞分為空白處理組和TNF-α處理組,Apo M過表達(dá)細(xì)胞分為空白處理組和TNF-α處理組,TNFα處理四小時,PCR檢測炎癥因子ICAM-1 m RNA表達(dá)水平。(2)將NC細(xì)胞分為空白處理組和S1P處理組,Apo M過表達(dá)細(xì)胞分為空白處理組和S1P處理組,S1P處理3小時,PCR檢測炎癥因子ICAM-1 m RNA表達(dá)水平。(3)將NC細(xì)胞分為TNF-α處理組和S1P+TNF-α處理組,Apo M過表達(dá)細(xì)胞分為TNF-α組和S1P+TNF-α處理組,PCR檢測炎癥因子ICAM-1 m RNA表達(dá)水平。(4)將NC細(xì)胞分為TNF-α組和Rotterin+TNF-α處理組,Apo M過表達(dá)細(xì)胞分為TNF-α組和Rotterin+TNF-α處理組,PCR檢測炎癥因子ICAM-1 m RNA表達(dá)水平。結(jié)果:(1)PCR結(jié)果顯示,Apo M-OE組Apo M m RNA表達(dá)水平顯著高于NC組(2)TNF-α處理組ICAM-1 m RNA的表達(dá)水平較對照組顯著升高;過表達(dá)Apo M后,TNF-α處理組ICAM-1 m RNA的水平較對照組顯著升高;NC細(xì)胞中TNF-α處理組ICAM-1 m RNA的表達(dá)較Apo M-OE細(xì)胞TNF-α處理組顯著升高,表明在EAhy926細(xì)胞中,過表達(dá)Apo M可抑制TNF-α介導(dǎo)的ICAM-1的升高;雙因素交互作用分析提示,TNF-α與Apo M對ICAM-1表達(dá)的影響具有交互作用。(3)NC細(xì)胞中空白處理組與Apo M過表達(dá)空白處理組的ICAM-1無顯著差異;Apo M-OE細(xì)胞在S1P處理組ICAM-1m RNA的表達(dá)水平顯著低于NC組中空白對照組,表明在無TNF-α介導(dǎo)炎癥情況下,Apo M過表達(dá)與S1P同時存在時,可顯著下調(diào)ICAM-1表達(dá);雙因素交互作用分析結(jié)果提示,Apo M與S1P在影響ICAM-1表達(dá)中無交互作用。(4)NC細(xì)胞TNF-α處理組與NC細(xì)胞TNF-α+S1P組ICAM-1 m RNA無顯著差異;Apo M過表達(dá)組中,TNF-α處理組與TNF-α+S1P組ICAM-1 m RNA無顯著差異,表明S1P單獨(dú)存在不能顯著抑制ICAM-1的表達(dá)。(5)所有組都用TNF-α預(yù)處理。NC細(xì)胞中,空白對照組ICAM-1 m RNA顯著低于Rottlerin處理組,表明Rotterin抑制PKCδ活性后TNF-α誘導(dǎo)ICAM-1表達(dá)的效應(yīng)顯著增加;Apo M過表達(dá)細(xì)胞Rottlerin處理組ICAM-1m RNA顯著低于NC細(xì)胞Rottlerin組,表明Apo M可顯著抑制由Rotterin介導(dǎo)的ICAM-1的表達(dá)。結(jié)論:TNF-α可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞株EA.hy926中ICAM-1表達(dá)的升高;無TNF-α誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)下,Apo M聯(lián)合S1P存在下可顯著抑制ICAM-1的表達(dá)。有TNF-α介導(dǎo)的炎癥狀態(tài)下,Apo M聯(lián)合S1P不能降低ICAM-1的表達(dá);在TNF-α介導(dǎo)的炎癥狀態(tài)下,Rotterin能夠增強(qiáng)TNF-α介導(dǎo)的ICAM-1表達(dá)效應(yīng);過表達(dá)Apo M可以抑制由Rotterin介導(dǎo)的ICAM-1表達(dá)的增加。綜上所述,在內(nèi)皮細(xì)胞株EA.hy926中Apo M可抑制由Rotterin介導(dǎo)的ICAM-1表達(dá),從而發(fā)揮抗炎作用。
【圖文】:

慢病毒感染,炎癥因子,細(xì)胞,效率


圖 1 EA.hy926 細(xì)胞 ApoM 慢病毒感染效率oM能夠抑制炎癥因子TNF-α介導(dǎo)的炎癥因子ICAM-1的升示,在 NC 細(xì)胞中,TNF- 處理組 ICAM-1 mRNA 的表,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.0001),表明 TNF- 可以高。NC 細(xì)胞 TNF- 組 ICAM-1 mRNA 是 ApoM-OE 細(xì)統(tǒng)計具有顯著差異(P<0.001),表明 EA.hy926 細(xì)胞中, 介導(dǎo)的炎癥因子 ICAM-1 的升高。示,雙因素交互作用分析提示,TNF-α 與 ApoM 在影響 。

影響圖,過表達(dá),炎癥因子,影響圖


圖 2 TNF-α 和 ApoM 過表達(dá)對 ICAM-1 表達(dá)的影響圖 3 TNF-α 和 ApoM 過表達(dá)對 ICAM-1 表達(dá)的影響的交互作用F-α介導(dǎo)的狀態(tài)下,S1P能夠聯(lián)合ApoM抑制炎癥因子因子ICAM-1 4 所示,NC 細(xì)胞空白處理組是 ApoM-OE 空白處理組的 1.41 倍,,
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R364.5

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本文編號:2592647

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