【摘要】：目的:1.觀察半橫斷損傷和Allen’s法脊髓損傷后BBB評分的異同。2.觀察脊髓損傷后內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的存活和分化為星形膠質(zhì)細(xì)胞的變化,并且觀察超短波對這一變化的影響。方法:1.分別用兩種不同的損傷方式對隨機(jī)分組的20大鼠進(jìn)行脊髓損傷,并且在損傷后的第1、3、5、7、14天進(jìn)行BBB評分,觀察后肢運動恢復(fù)的異同。2.用46只SD大鼠,被隨機(jī)分成3組:假手術(shù)組,只暴露硬脊膜,不給予打擊;對照組,給予Allen’s打擊,并不做任何治療;治療組,給予Allen’s打擊,并在SCI后24小時開始給予小劑量超短波(11 W)治療,每日一次7min直至取材前。大鼠的運動功能用BBB評分進(jìn)行評定,大鼠取材后分別對組織進(jìn)行橫向切片,分別進(jìn)行HE和免疫熒光染色,來檢測脊髓形態(tài)和Nesin、GFAP在組織內(nèi)的表達(dá)部位和表達(dá)量,以觀察內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞在脊髓損傷后并超短波治療后存活和分化為星形膠質(zhì)細(xì)胞的情況。結(jié)果:實驗的結(jié)果顯示,(1)Allen’s法脊髓損傷相比,半橫斷在損傷后5天恢復(fù)速度加快,在第7天的時候超過了前者,并且在第14天這一差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)(2)BBB評分顯示,3天后后肢功能評分逐漸恢復(fù)。治療組與對照組相比,3天、5天和7天的BBB評分并沒有顯著的差異,直到14天,治療組的后肢功能BBB評分高于對照組,并且差異顯著(p0.05)(3)HE染色:在第3天,超短波治療組與對照組相比,脊髓組織出血較多,但是在第7天和14天,組織壞死的范圍較對照組小。(4)Nestin、GFAP、NeuN免疫熒光染色:在脊髓中央管,Nestin+細(xì)胞在損傷后第3天表達(dá)最多,并且隨著損傷后時間的推遲,Nestin+細(xì)胞的表達(dá)量卻是逐漸減弱的,到第14天表達(dá)水平與假手術(shù)組相當(dāng)。GFAP+細(xì)胞在第7天表達(dá)最強(qiáng),并且與Nestin共染的區(qū)域(黃色熒光)也是最多的。在損傷周圍區(qū)白質(zhì),損傷頭端和尾端的表達(dá)變化不一樣,脊髓損傷對于脊髓頭端和尾端的干細(xì)胞存活影響不一致,頭端的存活高峰在第3天,尾端則在第7天,并且治療組Nestin+存活的數(shù)量大于對照組的時間,頭端在第3天,尾端在第14天;而分化為星形膠質(zhì)細(xì)胞趨勢,頭端和尾端卻是一致的,分化的高峰都在第7天,并且此時損傷尾端治療組Nestin+/GFAP+大于對照組;在損傷后第14天,治療組頭端NeuN+細(xì)胞個數(shù)大于對照組,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:半橫斷損傷后大鼠后肢功能恢復(fù)先慢于Allen’s法損傷,在損傷后第2周恢復(fù)速度快于Allen’s法損傷,并且在第二周恢復(fù)的速度明顯快于第一周。超短波能夠減少脊髓損傷早期壞死面積、提高大鼠運動功能評分,有利于損傷后3天和14天神經(jīng)干細(xì)胞的存活,但是損傷頭端和尾端表現(xiàn)不盡相同。并且超短波治療也能夠減少損傷后7天神經(jīng)干細(xì)胞分化為星形膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量。
【圖文】：

3 結(jié)果結(jié)果顯示，Allen’s 法的大鼠在損傷后后肢運動功能評分恢復(fù)速度較平均，而半橫斷損傷后大鼠后肢功能在前 5 天恢復(fù)較慢，都低于挫傷組，但是 5 天后恢復(fù)速度加快，在第 7 天的時候超過了挫傷組，并且在第 14 天半橫斷損傷組評分高于挫傷組，，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）。表 3.1 每個時間點的 BBB 評分Group 1d 3d 5d 7d 14d半橫斷損傷 0±0 0.53±0.66 1.00±1.50 5.80±1.89 10.90±2.98aAllen’s 法損傷 0±0 0.75±0.78 2.14±1.12 3.92±1.75 5.83±0.96aa：兩組損傷模型對照 p<0.05 ； n=7

脊髓橫斷切片觀察位置定義
【學(xué)位授予單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R651.2;R-332

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2589690