本文關(guān)鍵詞：抗IL-13全人源單鏈抗體的篩選、可溶性表達及鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:篩選特異性好、有體外中和特性的抗IL-13單鏈抗體,并進行可溶性表達和鑒定。方法:前期課題組構(gòu)建了大庫容量天然單鏈抗體文庫,本研究采用噬菌體展示技術(shù)對天然抗體文庫進行3輪富集,然后從3輪富集后的文庫中采用ELISA進行篩選抗IL-13陽性單鏈抗體;將特異性好、親和力相對較高的陽性單鏈抗體轉(zhuǎn)入表達載體中進行表達并鑒定。結(jié)果:經(jīng)3輪噬菌體展示富集,有30%左右的克隆子為陽性;經(jīng)過約500株克隆子篩選,篩選到2株特異性和親和力相對較高,有體外中和特性的單鏈抗體;將篩選的單鏈抗體基因轉(zhuǎn)入表達載體LZ16中進行了表達,并采用生物大分子相互作用技術(shù)、Western blot等進行了鑒定。結(jié)論:成功篩選到特異性好、親和力相對較高并具有體外中和活性的抗IL-13單鏈抗體。
【作者單位】： 四川醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： IL- 全人源單鏈抗體 噬菌體展示
【基金】：四川省科技廳項目(2015JY0218,013SZZ005) 四川省教育廳項目(13ZB0262)
【分類號】：R392.11
【正文快照】： 白細胞介素在嗜酸性和非嗜酸性哮喘中扮演著重要的角色,其中白細胞介素-13(IL-13)是一個密切相關(guān)的細胞因子,它是由肥大細胞、嗜堿性粒細胞、嗜酸性粒細胞和Th2細胞分泌,最重要的是Th2細胞分泌。IL-13是參與Th2細胞介導(dǎo)的氣道炎癥中一個關(guān)鍵性的細胞因子[1],其誘導(dǎo)B細胞增殖和

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本文編號：258950