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IFN-γ誘導(dǎo)的自噬抑制人胎盤胎兒側(cè)來源間充質(zhì)干細(xì)胞增殖

發(fā)布時間:2020-03-10 15:13
【摘要】:目的探討IFN-γ誘導(dǎo)無血清培養(yǎng)人胎盤胎兒側(cè)來源MSCs自噬的發(fā)生,并分析自噬對細(xì)胞增殖的影響。方法用酶消化法和無血清培養(yǎng)體系分離培養(yǎng)人胎盤胎兒側(cè)來源MSCs,利用流式細(xì)胞儀和分化培養(yǎng)體系鑒定細(xì)胞屬性;用質(zhì)量濃度50μg/L的IFN-γ處理人胎盤胎兒側(cè)來源MSCs,以未處理細(xì)胞作為對照組,3-Ma處理為自噬抑制組;分別提取總蛋白,Western blot檢測自噬標(biāo)志基因LC3Ⅰ/Ⅱ的表達(dá);mRFP-GFP-LC3腺病毒感染細(xì)胞,觀察細(xì)胞內(nèi)點(diǎn)狀聚集的情況;MTT法檢測IFN-γ對細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果所分離細(xì)胞呈CD73、CD90和CD105陽性細(xì)胞,不表達(dá)CD14、CD34和CD45,具有向脂肪和成骨細(xì)胞分化的能力;IFN-γ可提高LC3Ⅱ的表達(dá)量(P0.05),熒光共聚焦顯微境觀察到IFN-γ處理細(xì)胞中的點(diǎn)狀聚集顯著增加;3-Ma可解除IFN-γ對MSCs增殖能力的抑制(P0.05)。結(jié)論 IFN-γ誘導(dǎo)的自噬負(fù)調(diào)控人胎盤胎兒側(cè)來源MSCs的增殖能力。

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本文編號:2586081

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