【摘要】：誘導(dǎo)多能性干細胞,具有廣泛的應(yīng)用前景,特別是在藥物篩選,體外疾病模型和干細胞替代治療方面給人們帶來了無限的希望。但是,誘導(dǎo)多能性干細胞在真正應(yīng)用于臨床治療前,其安全性是一個不得不考慮的問題。 誘導(dǎo)多能性干細胞的體外培養(yǎng)過程即是一個潛在的安全隱患。我們利用細胞遺傳學(xué)手段從染色體水平上對傳代培養(yǎng)過程中的小鼠誘導(dǎo)多能性干細胞的基因組穩(wěn)定性進行檢測。結(jié)果表明傳代培養(yǎng)的小鼠誘導(dǎo)多能性干細胞中存在著染色體不穩(wěn)定現(xiàn)象:傳代培養(yǎng)中染色體數(shù)目異常細胞高比例出現(xiàn);四因子Oct4、Sox2、Klf4和cMyc誘導(dǎo)的小鼠誘導(dǎo)多能性干細胞中含羅伯遜易位染色體細胞比例不斷增加。并利用胞質(zhì)阻斷法對小鼠誘導(dǎo)多能性干細胞傳代培養(yǎng)過程中染色體異常的產(chǎn)生和積累機制進一步研究。我們的結(jié)果證實小鼠誘導(dǎo)多能性干細胞在傳代培養(yǎng)過程中染色體異常是不斷產(chǎn)生的。染色體不分離的發(fā)生導(dǎo)致14號染色體數(shù)目異常細胞高比例出現(xiàn);染色體易位的發(fā)生導(dǎo)致含14號染色體羅伯遜易位細胞比例不斷增加。 我們的研究結(jié)果提示改善現(xiàn)有的誘導(dǎo)多能性干細胞的體外培養(yǎng)條件是十分必要的,這是誘導(dǎo)多能性干細胞安全應(yīng)用于臨床治療的前提。
【圖文】：

圖 1.2 iPSCs 的多能性鑒定形態(tài)上，，iPSCs必須與ES細胞接近，而且具有無限增殖的能力。分子水平上，關(guān)鍵多能性因子的蛋白水平檢測：如Oct4，Nanog；E異的表便抗原的檢測：如小鼠中SSEA-1，人中的SSEA-3/4，TRa-1-60能性端粒酶表達的檢測。逆轉(zhuǎn)錄病毒成膜相關(guān)基因表達的檢測：如新生移酶和Trim28((Lei et al., 1996; Wolf and Goff, 2007)。 同時，真正的iPSC重編程因子發(fā)生沉默，不表達。而且，iPSCs的表觀遺傳譜也應(yīng)與ES細，如多潛能性基因啟動子區(qū)域的甲基化程度，雌性細胞中X染色體的aherali et al., 2007; Rideout et al., 2001)。功能上，iPSCs必須具有分化成三胚層的能力，包括體外分化實驗，畸成實驗和嵌合體動物實驗以及四倍體補償實驗(Jaenischand Young, 2008).1.4 iPSCs 重編程分子機制Oct3/4， Sox2， Nanog和Klf4家族等轉(zhuǎn)錄因子網(wǎng)絡(luò)的嚴格調(diào)控對維持

也有數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常同時出現(xiàn)的情況。有絲分裂過程出現(xiàn)異常，如細胞質(zhì)不分裂，中心體異常擴增，DNA修復(fù)出錯都可能導(dǎo)致異常染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)的核型出現(xiàn)（圖1.3）。另外，還有其他特異類型的染色體結(jié)構(gòu)異常，如：雙微體（DMs），多中心粒染色體，環(huán)狀染色體等。
【學(xué)位授予單位】：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R329

【共引文獻】

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本文編號：2579267