本文關(guān)鍵詞：視黃酸所致馬蹄腎動物模型的創(chuàng)建及其形成的分子機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景與目的：馬蹄腎是常見的先天性腎臟融合畸形,易合并多種并發(fā)癥。馬蹄腎形成的機制尚不明確,可能與組織細胞遷移能力下降、粘附能力增強相關(guān)。有研究表明經(jīng)典Wnt信號通路與發(fā)育相關(guān)且參與細胞的遷移粘附,而視黃酸與受體結(jié)合后可以抑制經(jīng)典Wnt通路的核內(nèi)反應(yīng),進而抑制細胞的遷移、增強粘附作用,提示馬蹄腎形成的可能信號通路為：視黃酸及其受體(RA/RAR) -Wnt通路(Wnt5a/CaMK Ⅱ/TAK1/NLK)及核反應(yīng)元件(β-catenin/Lef/Tcf)—粘附Slug (Snai2)和遷移相關(guān)分子Rho (Rhob)--馬蹄腎。本研究的目的：①利用視黃酸建立馬蹄腎小鼠模型,為馬蹄腎發(fā)生機制的研究奠定基礎(chǔ)。②對同窩馬蹄腎胎鼠及正常腎臟形態(tài)胎鼠的腎組織進行轉(zhuǎn)錄組測序,篩選可能與馬蹄腎發(fā)生相關(guān)的差異基因。③對篩選出的可能與馬蹄腎發(fā)生相關(guān)的基因進行驗證。方法：①6-8周齡性成熟的ICR小鼠雌雄交配(雌：雄=2：1),以觀察到陰道栓為懷孕第1天(E1d),在孕第8天(E8d)時給小鼠腹腔內(nèi)注射視黃酸溶液,分別在E13d、E15d和E17d解剖孕鼠取出胎鼠,在體式顯微鏡下觀察胎鼠及其腎臟形態(tài)并拍照記錄。②取同窩E17d的馬蹄腎胎鼠2只(編號E17RA8、E17RA9)以及正常腎臟胎鼠2只(編號E17RA2、E17RA4)，，分別對其腎組織進行轉(zhuǎn)錄組測序,對測序結(jié)果質(zhì)控后進行差異基因表達分析、差異基因表達模式聚類分析、差異基因GO功能以及Pathway富集分析等,篩選視黃酸及其受體參與的與腎臟發(fā)育相關(guān)的信號通路以及差異表達基因中與遷移、粘附相關(guān)的分子及其信號通路。③對篩選出的差異表達基因或可能信號通路中的關(guān)鍵因子,在馬蹄腎組織及受視黃酸刺激的胚腎細胞中進行q-PCR驗證,探討視黃酸引起馬蹄腎的分子機制。結(jié)果：①馬蹄腎胎鼠尾巴長度是正常腎臟胎鼠尾巴長度的1/4-1/2。E13d解剖孕鼠1只,共有11只胎鼠,其中3只形成馬蹄腎,2只呈倒“八”字形,但不明確存在融合,6只腎臟形態(tài)正常。E15d解剖孕鼠1只,共有4只胎鼠,全部為馬蹄腎。E17d解剖孕鼠2只,一只孕鼠有13只胎鼠,其中3只形成馬蹄腎,1只有形成趨勢,9只腎臟形態(tài)正常；另一只孕鼠有12只胎鼠,其中8只形成馬蹄腎,其余4只腎臟形態(tài)正常。②對同窩E17d的2只馬蹄腎胎鼠(編號E17RA8、E17RA9)及2只正常腎臟胎鼠(編號E17RA2、E17RA4)腎組織進行轉(zhuǎn)錄組測序,正常和異常兩兩比較,篩選出差異1倍以上的基因,其中E17RA8與E17RA2比較有328個差異基因,E17RA8與E17RA4比較有802個差異基因,E17RA9與E17RA2比較有562個差異基因,E17RA9與E17RA4比較有1061個差異基因；對以上4組進行基因表達模式聚類分析共篩選出63個差異1倍以上的相同基因。查閱這63個基因的功能后并未找到與視黃酸及腎臟發(fā)育相關(guān)的基因,提示可能需擴大篩選范圍。③利用馬蹄腎組織及正常腎組織對以上通路中的關(guān)鍵因子進行q-PCR驗證，比較后結(jié)果顯示視黃酸受體Rarb、Wnt5a、核反應(yīng)元件Tcf3及粘附相關(guān)分子Snai2基因上調(diào),而遷移相關(guān)分子Rhob基因下調(diào)；用視黃酸刺激胚腎細胞后,上述關(guān)鍵因子表達情況與馬蹄腎組織相同。結(jié)論：①視黃酸腹腔內(nèi)注射可以誘導(dǎo)小鼠形成馬蹄腎,可作為研究馬蹄腎發(fā)生機制的動物模型。②視黃酸可能通過影響Wnt通路上調(diào)粘附相關(guān)分子、下調(diào)遷移相關(guān)分子促進馬蹄腎的形成。
【關(guān)鍵詞】：視黃酸 馬蹄腎 動物模型 轉(zhuǎn)錄組測序 分子機制
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R-332;R692.1
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 第一部分 馬蹄腎動物模型的創(chuàng)建10-17
• 前言10-11
• 材料和方法11-12
• 結(jié)果12-14
• 討論14-16
• 結(jié)論16-17
• 第二部分 馬蹄腎與正常腎臟轉(zhuǎn)錄組學(xué)的對比研究及可能信號通路的驗證17-46
• 前言17-19
• 材料和方法19-28
• 結(jié)果28-43
• 討論43-45
• 結(jié)論45-46
• 全文總結(jié)46-47
• 參考文獻47-51
• 文獻綜述51-61
• 參考文獻57-61
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文及參與的研究61-62
• 致謝62

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1 楊光璞,高鵬;馬蹄腎誤行剖腹1例報告[J];邯鄲醫(yī)學(xué)高等�？茖W(xué)校學(xué)報;2004年01期

2 石明,韓平,魏強,楊宇如;先天性馬蹄腎臨床分析(附21例報告)[J];華西醫(yī)學(xué);2005年02期

3 陳鎮(zhèn)釧,楊繼田,林型轉(zhuǎn),陳敬表;馬蹄腎損傷一例[J];中華創(chuàng)傷雜志;1998年01期

4 郭保偉,王有昌,李明紅,張春元;馬蹄腎合并血管平滑肌脂肪瘤1例報告[J];中國綜合臨床;2003年08期

5 傅曉鳳;;馬蹄腎的超聲診斷價值[J];浙江實用醫(yī)學(xué);2009年01期

6 彭浩;;微創(chuàng)經(jīng)皮腎鏡治療馬蹄腎結(jié)石的療效分析[J];中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用;2013年20期

7 孫旭朝;肖明朝;;經(jīng)皮腎鏡取石術(shù)治療馬蹄腎結(jié)石研究進展[J];檢驗醫(yī)學(xué)與臨床;2013年21期

8 吳大蘭;劉國棟;何家楊;;馬蹄腎五例報告[J];蘭州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1986年02期

9 鄧文芝;馬蹄腎診治體會[J];湖南醫(yī)學(xué)高等�？茖W(xué)校學(xué)報;1999年01期

10 胡盼盼;謝院生;陳香美;;馬蹄腎的臨床研究現(xiàn)狀[J];中華腎病研究電子雜志;2014年01期

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1 周利群;何志嵩;李寧忱;;經(jīng)腹腹腔鏡馬蹄腎患者腎盂輸尿管連接部狹窄成形術(shù)[A];第十五屆全國泌尿外科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

2 母華國;桑玲;陳平友;;馬蹄腎的影像學(xué)診斷[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三屆全國放射學(xué)大會論文匯編（下冊）[C];2006年

3 張大宏;劉鋒;毛祖杰;祁小龍;丁清;白虹;樓水鑫;章越龍;茅夏娃;任黎剛;章偉;鄒強;肖家全;;腹腔鏡下馬蹄腎整形手術(shù)[A];2008年浙江省泌尿外科學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

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10 汪朔;方丹波;陳戈明;何屹;蔡松良;謝立平;;腹膜后腔鏡治療馬蹄腎(附4例報告)[A];2008年浙江省泌尿外科學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

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1 齊焰;視黃酸所致馬蹄腎動物模型的創(chuàng)建及其形成的分子機制研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2016年

2 胡盼盼;馬蹄腎的臨床研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2014年

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4 孫旭朝;經(jīng)皮腎穿刺取石術(shù)治療馬蹄腎結(jié)石[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

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本文編號：256351