【摘要】：Toll樣受體,作為重要的模式識(shí)別受體,能通過識(shí)別不同的病原微生物,活化特異的信號通路,起始細(xì)胞因子的表達(dá)。在10種已知的人類TLRs中,TLR3識(shí)別雙鏈RNA (dsRNA),即一種在病毒基因組復(fù)制過程中常見的副產(chǎn)物或者中間產(chǎn)物。樹突狀細(xì)胞(DC)是最強(qiáng)的專職抗原遞呈細(xì)胞,在天然免疫和適應(yīng)性免疫的銜接中起著重要的作用。應(yīng)答病毒感染或病毒雙鏈RNA類似物poly(I:C)時(shí),DC能分泌IFN-p,而IFN-p又能活化DC,促進(jìn)DC成熟。同時(shí),也有研究表明TLR3通路與一些疾病進(jìn)程相關(guān),可作為潛在治療靶點(diǎn)。深入研究小分子化合物的活性及機(jī)制,開發(fā)成新型小分子免疫抑制劑,將彌補(bǔ)治療手段的不足。 Chaeoglobosin Fex (Cha Fex)是從球毛殼菌QEN-14中分離出的一種細(xì)胞松弛素。我們前期研究發(fā)現(xiàn)Cha Fex能抑制LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞TLR4信號通路的活化,其中主要是通過阻斷IκB-α的降解及JNK、ERK1/2和p38的磷酸化,來下調(diào)LPS誘導(dǎo)的TNF-α、IL-6和MCP-1的表達(dá)水平。然而,Cha Fex對其他種類的抗原遞呈細(xì)胞的功能與活化狀態(tài)是否也有類似的作用,還待進(jìn)一步的確認(rèn)。 目的：(1)研究Cha Fex對poly(I:C)誘導(dǎo)活化的骨髓衍生的樹突狀細(xì)胞的影響；(2)探討Cha Fex對DC的調(diào)控機(jī)制。 方法：從小鼠骨髓前體細(xì)胞中誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞作為研究對象。CCK-8分析法檢測Cha Fex對DC活力的影響。Annexin V/PI雙染法檢測Cha Fex對DC凋亡的影響。利用ELISA試劑盒檢測DC分泌IFN-β的情況。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測靶基因mRNA表達(dá)水平。流式細(xì)胞術(shù)檢測DC表面標(biāo)志�；旌狭馨图�(xì)胞反應(yīng)檢測DC對T細(xì)胞的刺激能力。流式細(xì)胞術(shù)檢測DC對右旋糖酐和羅丹明標(biāo)記的poly(I:C)的吞噬能力。最后,利用western blot分析Cha Fex對TLR3下游的IRF-3、NF-κB和MAPK信號通路活化情況的影響。 結(jié)果：在TLR3配體poly(I:C)活化的DC中,Cha Fex可以在mRNA和蛋白水平上降低IFN-p的表達(dá),相關(guān)炎性因子(如IP-10,IL-6,IL-12,TNF-α和MCP-1)的表達(dá)也有所下調(diào)；抑制DC吞噬抗原的能力,下調(diào)表面標(biāo)志(包括CD40、CD80、CD86和MHC Ⅱ)的表達(dá),進(jìn)而抑制其成熟。Cha Fex處理后,DC活化T淋巴細(xì)胞的能力顯著下降。在進(jìn)一步探尋相關(guān)調(diào)控機(jī)制時(shí)發(fā)現(xiàn),Cha Fex并不影響DC對poly(I:C)的內(nèi)吞,但可抑制IκB-α、IRF-3、p38和JNK的磷酸化水平,而對ERK1/2沒有影響。 結(jié)論：Cha Fex這種小分子化合物能夠抑制poly(I:C)活化的DC的成熟和功能,通過調(diào)控TLR3通路發(fā)揮免疫抑制作用,這提示我們Cha Fex可能會(huì)成為治療自身免疫性疾病的潛在藥物。
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R392

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 ;[J];;年期

2 ;[J];;年期

3 ;[J];;年期

4 ;[J];;年期

5 ;[J];;年期

6 ;[J];;年期

7 ;[J];;年期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

10 ;[J];;年期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 劉修恒;;小鼠骨髓源性不同成熟度樹突狀細(xì)胞培養(yǎng)鑒定[A];第十七屆全國泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

2 張慶紅;胡玉珍;呂順艷;鐘延清;;雌激素影響大鼠樹突狀細(xì)胞的分化、成熟和功能[A];中國生理學(xué)會(huì)第六屆全國青年生理學(xué)工作者學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2003年

3 郭大偉;梁健;姜曉峰;王學(xué)范;魏云濤;姜洪磊;;GPC3基因轉(zhuǎn)染的樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)抗肝癌HepG2細(xì)胞殺傷作用的研究[A];第十二屆全國肝癌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

4 張新華;鐘翠平;顧云娣;顧曉;范強(qiáng);王國強(qiáng);周播江;;TGF-β1基因轉(zhuǎn)染樹突狀細(xì)胞增強(qiáng)移植心臟耐受性并降低Fractalkine的表達(dá)[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會(huì)2002年年會(huì)文摘匯編[C];2002年

5 于益芝;劉書遜;王文雅;張明徽;郭振紅;徐紅梅;齊潤姿;安華章;曹雪濤;;TRAIL在樹突狀細(xì)胞殺傷活化T細(xì)胞中的作用[A];中國免疫學(xué)會(huì)第四屆學(xué)術(shù)大會(huì)會(huì)議議程及論文摘要集[C];2002年

6 尤長宣;羅榮城;張軍一;蘇瑾;廖旺軍;鄭航;Paul L Hermonat;;基因轉(zhuǎn)移制備樹突狀細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[A];第一屆中國腫瘤靶向治療技術(shù)大會(huì)論文集[C];2003年

7 葛長勇;李鴻鈞;孫茂盛;馮婷婷;靳昌忠;姚航平;吳南屏;;滅活SV40致敏的猴樹突狀細(xì)胞的生物學(xué)特性研究[A];2008年浙江省感染病、肝病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

8 葛長勇;李鴻鈞;謝天宏;張光明;易山;孫茂盛;吳南屏;;恒河猴樹突狀細(xì)胞的生物學(xué)特性研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第四次全國艾滋病、病毒性丙型肝炎暨全國熱帶病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

9 張堯;靳風(fēng)爍;蘭衛(wèi)華;李彥峰;張克勤;吳剛;葉錦;;聯(lián)合應(yīng)用塞萊西布和CpG-ODN對樹突狀細(xì)胞功能的影響[A];第十五屆全國泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

10 夏強(qiáng);劉衛(wèi)彬;陳振光;張瑩;黃如訓(xùn);;胸腺成熟樹突狀細(xì)胞與重癥肌無力發(fā)生的相關(guān)性分析[A];第十一屆全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 章靜波;干細(xì)胞研究新動(dòng)向[N];健康報(bào);2009年

2 王雪飛;樹突狀細(xì)胞“面目”更清晰[N];健康報(bào);2004年

3 記者 白毅;間充質(zhì)干細(xì)胞可促進(jìn)成熟樹突狀細(xì)胞增殖分化[N];中國醫(yī)藥報(bào);2009年

4 劉伯寧;喬布斯的錯(cuò)誤與斯坦曼的自我試驗(yàn)[N];南方周末;2011年

5 方彤;樹突狀細(xì)胞瘤苗新進(jìn)展[N];健康報(bào);2006年

6 本報(bào)記者 沈湫莎;這一次,諾獎(jiǎng)會(huì)不會(huì)頒給逝者[N];文匯報(bào);2011年

7 張獻(xiàn)懷;樹突狀細(xì)胞療法治療惡性黑色素瘤[N];中國醫(yī)藥報(bào);2004年

8 記者　毛黎;美發(fā)現(xiàn)一種“超級”形態(tài)酶[N];科技日報(bào);2006年

9 楊淑娟;美研究出新型丙型肝炎疫苗[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

10 ;慢性HBV感染使樹突狀細(xì)胞功能受損[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 潘建平;γ-干擾素對樹突狀細(xì)胞分化和功能成熟的調(diào)控及其基因修飾的樹突狀細(xì)胞抗腫瘤免疫機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2002年

2 朱偉國;PPAR-γ激動(dòng)劑吡格列酮抑制血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞免疫激活致動(dòng)脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定的研究[D];浙江大學(xué);2010年

3 王正昕;腫瘤微環(huán)境中浸潤性樹突狀細(xì)胞的表型和免疫學(xué)功能的研究及其臨床意義[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2000年

4 周向陽;新型熱休克蛋白HSP-DC激活樹突狀細(xì)胞及其佐劑效應(yīng)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2003年

5 趙鴻;未成熟樹突狀細(xì)胞聯(lián)合骨髓移植誘導(dǎo)大鼠異體腎移植免疫耐受的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2003年

6 陳玉丙;樹突狀細(xì)胞抗原負(fù)載及MAGE-3 DNA瘤苗研制[D];吉林大學(xué);2004年

7 王宏偉;肺間質(zhì)樹突狀細(xì)胞在多器官功能障礙綜合征中的免疫激活與免疫耐受作用研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2010年

8 趙毅;青藤堿對RA患者樹突狀細(xì)胞免疫功能的影響及機(jī)制研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2007年

9 劉海波;Fas信號激活樹突狀細(xì)胞炎性復(fù)合體形成的生物學(xué)意義與分子機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

10 趙娟;受者來源的PIR-B轉(zhuǎn)染的樹突狀細(xì)胞對小鼠異基因骨髓移植GVHD的保護(hù)作用[D];華中科技大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 孫琳;Chaeoglobosin Fex調(diào)控TLR3介導(dǎo)的小鼠樹突狀細(xì)胞的功能[D];南京大學(xué);2012年

2 吳鳴宇;黑色素瘤基因（MAGE-1）相關(guān)肽負(fù)載樹突狀細(xì)胞對肝癌細(xì)胞殺傷作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2003年

3 茹穎;樹突狀細(xì)胞在IgA腎病和系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病機(jī)制中的作用[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

4 孟冬梅;急性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞來源的樹突狀細(xì)胞的誘導(dǎo)及功能研究[D];青島大學(xué);2003年

5 梁軍利;IFN-β1a對多發(fā)性硬化樹突狀細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子影響的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2010年

6 黃祺琦;耐受性樹突狀細(xì)胞來源的exosome治療小鼠免疫介導(dǎo)性再生障礙性貧血的實(shí)驗(yàn)研究[D];南昌大學(xué);2010年

7 初曉霞;淋巴瘤樹突狀細(xì)胞的表達(dá)與臨床分期、惡性度及預(yù)后的相關(guān)性研究[D];青島大學(xué);2002年

8 劉麗燕;MyD88在OK-432誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞成熟中的作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

9 孟松;IL-10處理的樹突狀細(xì)胞分泌的exosomes對實(shí)驗(yàn)性大鼠腸炎的治療作用[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

10 王茜;調(diào)節(jié)性樹突狀細(xì)胞對CD8~+T細(xì)胞的負(fù)向調(diào)節(jié)作用[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2010年

，

本文編號：2559810