【摘要】：本研究首先基于傳統(tǒng)的細(xì)胞貼壁分離法和組織塊貼壁分離法技術(shù),發(fā)明了一種半貼壁的分離技術(shù),成功有效快速地獲得了大量的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC),并發(fā)現(xiàn)獲取的臍帶MSC具有通過(guò)IDO分子介導(dǎo)抑制T細(xì)胞的功能：其次,構(gòu)建了Thl細(xì)胞誘導(dǎo)的小鼠子癇前期(PE)模型,發(fā)現(xiàn)MSC移植能降低PE模型鼠蛻膜和脾臟淋巴細(xì)胞中TNF-α及脾臟淋巴細(xì)胞中IFN-γ和IL-4的表達(dá)水平,并首次報(bào)道MSC移植能有效的緩解孕鼠的PE癥狀；再次,發(fā)現(xiàn)miR-181a在PE患者臍帶和蛻膜來(lái)源的MSC中高表達(dá),并且首次證明了miR-181a可通過(guò)TGF-β通路影響MSC細(xì)胞的增殖,高表達(dá)miR-181a的MSC可明顯上調(diào)IL-6和IDO表達(dá)水平,且IL-6和IDO的高表達(dá)與miR-181a誘導(dǎo)JNK和p38的磷酸化有關(guān)；最后,發(fā)現(xiàn)高表達(dá)miR-181a的MSC可促進(jìn)T細(xì)胞的增殖和IFN-γ分泌；miR-181a可降低MSC實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎的保護(hù)作用,提示miR-181a對(duì)MSC免疫調(diào)節(jié)功能的抑制可能是PE發(fā)病的一種新見(jiàn)解。 1、臍帶MSC分離技術(shù)的完善及其調(diào)控T細(xì)胞的機(jī)制 間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSC)具有免疫調(diào)節(jié)功能,該細(xì)胞易于分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增和純化,多次傳代擴(kuò)增后仍具有干細(xì)胞特性,且具有強(qiáng)大的增殖能力、多向分化潛能及免疫原性低等特性,被認(rèn)為是具有免疫豁免能力的一群細(xì)胞。在受到炎癥信號(hào)刺激的情況下,MSC會(huì)募集到發(fā)生炎癥損傷的部位,通過(guò)分泌細(xì)胞因子,趨化因子和細(xì)胞外基質(zhì)蛋白質(zhì),降低局部炎癥損傷,參與到局部炎癥部位的修復(fù)和再生。MSC能參與對(duì)多種免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié),抑制T、B、DC和NK細(xì)胞的增殖和細(xì)胞因子分泌。Friedenstein等人最早根據(jù)骨髓來(lái)源的成纖維樣細(xì)胞和造血干細(xì)胞系對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)皿塑料底部的貼附性差異,于1976年首次從兔骨髓中成功分離了MSC。除了骨髓以外,母胎界面也是一個(gè)重要的MSC細(xì)胞的來(lái)源,目前已經(jīng)能從臍帶、胎盤和羊膜等多種母胎界面的組織中分離到MSC。但是,有報(bào)道表明MSC的分離方法是決定MSC功能的一個(gè)重要的因素。由于MSC在組織中是少數(shù)細(xì)胞,因此采用傳統(tǒng)的細(xì)胞貼壁分離法并不能穩(wěn)定的分離到MSC。除此之外,目前已知的從組織中分離MSC的方法都必須先將組織消化成單細(xì)胞懸液,而我們選取的MSC分離來(lái)源臍帶又很難用傳統(tǒng)的膠原酶消化,再者使用長(zhǎng)時(shí)間的消化,又可能影響細(xì)胞的活性,造成了從臍帶中獲得MSC比較困難。因此,尋找更好的臍帶MSC分離方法勢(shì)在必行。 我們嘗試結(jié)合傳統(tǒng)的細(xì)胞貼壁分離法和組織塊貼壁分離法,使用一種半貼壁的分離方式,成功有效快速的獲得大量的臍帶MSC。臍帶組織塊通過(guò)消化,能釋放出一部分MSC細(xì)胞,同時(shí)適量的溫和消化組織塊,可以使其更容易貼壁。貼壁后的組織塊中的MSC細(xì)胞會(huì)移動(dòng)到細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,并擴(kuò)增。此外我們也改進(jìn)了消化酶的配方,加入透明質(zhì)酸酶和中性蛋白酶,可以使消化出的細(xì)胞更容易分散成單個(gè)細(xì)胞,而不會(huì)成團(tuán),更有利于臍帶MSC的分離。 使用我們的分離方法,24小時(shí)內(nèi)可以觀察到貼壁的成纖維樣的細(xì)胞形態(tài),貼壁細(xì)胞一周內(nèi)分裂增殖并成漩渦狀生長(zhǎng)。為了檢測(cè)分離的MSC的增殖潛能,我們檢測(cè)了細(xì)胞在2周內(nèi)的生長(zhǎng)曲線,并且檢測(cè)了培養(yǎng)后第三代MSC的表型。臍帶MSC高表達(dá)CD29,CD44,CD90,CD105(SH2),CD73(SH3)和HLA-ABC,但是不表達(dá)CD19,CD11b,CD14,CD34和CD31(上皮細(xì)胞標(biāo)志)和HLA-DR,和報(bào)道的骨髓MSC具有一樣的表面標(biāo)記表型。 為了驗(yàn)證我們獲取的臍帶MSC也具有免疫抑制的功能。我們使用MSC細(xì)胞與T細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)試驗(yàn),檢測(cè)MSC對(duì)T細(xì)胞增殖的影響。我們預(yù)先在PBMC中純化獲得T淋巴細(xì)胞,并用植物血細(xì)胞凝集素(PHA)預(yù)刺激,然后與MSC細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)。72小時(shí)以后,收獲T細(xì)胞,并用[3H]檢測(cè)T細(xì)胞的增殖情況。結(jié)果表明,經(jīng)過(guò)72小時(shí)的共培養(yǎng),臍帶MSC細(xì)胞可以有效的抑制PHA引起的T細(xì)胞增殖。接著,我們又進(jìn)一步研究了臍帶MSC是否可以影響T細(xì)胞的活化。我們收集了與臍帶MSC共培養(yǎng)24小時(shí)后的T細(xì)胞,并用流式細(xì)胞儀檢測(cè)表面標(biāo)記CD25,CD69以及內(nèi)源性的IFN-γ的表達(dá)情況。結(jié)果表明,臍帶MSC可以有效的降低T細(xì)胞內(nèi)源性的IFN-γ的表達(dá)水平,并略微的下調(diào)表面活化標(biāo)志CD25和CD69的表達(dá)水平。進(jìn)一步說(shuō)明了臍帶MSC對(duì)T細(xì)胞的免疫抑制的功能。 進(jìn)一步為了研究臍帶MSC是如何影響T細(xì)胞的免疫功能,我們檢測(cè)了臍帶MSC分泌的免疫調(diào)節(jié)相關(guān)的細(xì)胞因子IL-6、TGFB、 IDO、VEGF和COX-2的mRNA和蛋白的表達(dá)水平。通過(guò)QPCR的方法驗(yàn)證了在臍帶MSC中均表達(dá)上述細(xì)胞因子的mRNA,并通過(guò)ELISA和western blot的方法驗(yàn)證了在臍帶MSC中大量的表達(dá)VEGF、IL6和COX-2的蛋白,而較少的表達(dá)TGF-β。此外,在正常的臍帶MSC中,IDO的蛋白本底表達(dá)水平極低,幾乎檢測(cè)不到,而在使用IFN-γ刺激的情況下,則可以檢測(cè)到大量的IDO被誘導(dǎo)表達(dá)。為了驗(yàn)證是哪種細(xì)胞因子在MSC中起到了免疫抑制的功能,IL-6和TGF-β的中和抗體,IDO的抑制劑1-M-Trp以及PGE2的抑制劑indomethacin被加入了T/MSC共培養(yǎng)體系中。我們的結(jié)果顯示IDO的抑制劑1-M-Trp能有效的阻斷MSC細(xì)胞抑制T細(xì)胞增殖的能力,而IL-6和TGF-β的中和抗體,以及PGE2的抑制劑indomethacin并不能阻斷MSC細(xì)胞抑制T細(xì)胞增殖的能力。說(shuō)明IDO而不是IL-6、TGF-p或者PGE2介導(dǎo)了臍帶MSC對(duì)T細(xì)胞的抑制功能。 2、MSC移植能調(diào)控母胎界面的功能緩解子癇前期的癥狀 為了研究MSC在母胎界面的功能,我們選擇了子癇前期(Preeclampsia,PE)作為我們研究MSC的疾病模型。PE是妊娠最常見(jiàn)的并發(fā)癥之一,發(fā)病率約占孕產(chǎn)婦總數(shù)的7-9%。以妊娠20周后血壓增高、蛋白尿?yàn)樘卣?可引起孕產(chǎn)婦心、腦、肝、腎、肺等重要臟器功能嚴(yán)重受損,圍生兒宮內(nèi)缺氧、生長(zhǎng)受限、胎死宮內(nèi)。據(jù)臨床調(diào)查資料表明,PE位居我國(guó)孕產(chǎn)婦死亡原因的第二�？墒�,PE的發(fā)病機(jī)制至今未被闡明,故目前臨床上尚缺乏有效的治療手段,很多情況下不得不提前終止妊娠,造成妊娠失敗。因此,迫切需要深入研究PE的發(fā)病機(jī)制,尋找新的有效防治方法。最近的研究認(rèn)為,PE可能是一種妊娠誘導(dǎo)的免疫性疾病,而母胎界面免疫系統(tǒng)平衡失調(diào)在PE的發(fā)生與發(fā)展過(guò)程中起著重要作用。在正常的妊娠過(guò)程中,體內(nèi)產(chǎn)生的細(xì)胞因子會(huì)向Th2型的免疫狀態(tài)偏移,正常妊娠孕婦的PBMC會(huì)產(chǎn)生更多的IL-4和IL-10,而不是IL-2和TNF-α。因此,正常的妊娠被認(rèn)為是一種Th2型的免疫狀態(tài)。但是與正常妊娠明顯不同的是,PE患者的PBMC卻產(chǎn)生更多的Thl型的細(xì)胞因子,并且產(chǎn)生Th2型細(xì)胞因子的能力也在下降,提示PE患者中的免疫狀態(tài)向Thl型偏移。我們前期的結(jié)果也表面,不但在PBMC中,在蛻膜組織中,也存在Tc2和Th2細(xì)胞百分比下降,并且Tcl/Tc2細(xì)胞比例升高的情況,進(jìn)一步說(shuō)明了在母胎界面處也存在免疫狀態(tài)向Thl型偏移的情況。其中,TNF-α這個(gè)重要的Thl型細(xì)胞因子被發(fā)現(xiàn)在PE患者中表達(dá)明顯上升,并且可能對(duì)PE的發(fā)病起著重要的作用。PE患者中自身抗體介導(dǎo)的血管緊縮素受體活化被認(rèn)為是通過(guò)TNF-α起作用,并且PE患者產(chǎn)生的血管緊縮素受體的自身抗體和TNF-α能共同影響可溶性的人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1和可溶性的內(nèi)皮因子的表達(dá)水平。而可溶性的人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1和可溶性的內(nèi)皮因子在PE的發(fā)病中起到了關(guān)鍵的作用。 雖然已經(jīng)有一些研究報(bào)道通過(guò)靶向特定的PE病原分子對(duì)PE進(jìn)行治療,但是目前還沒(méi)有通過(guò)改善PE中的免疫失衡狀況來(lái)治療PE的報(bào)道,因此恢復(fù)PE患者體內(nèi)的免疫平衡,很可能是治療PE的新思路和手段。我們根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道構(gòu)建了Thl細(xì)胞誘導(dǎo)的小鼠PE模型,并且試圖通過(guò)靶向TNF-a分子尋找治療PE的新途徑。我們之前獲取了臍帶MSC細(xì)胞,并證明了MSC對(duì)T細(xì)胞的免疫抑制能力。之前的報(bào)道也表明,MSC細(xì)胞可以治療多種自身免疫疾病模型,說(shuō)明MSC治療可能是用于治療的PE的有效候選方法。 我們構(gòu)建了Thl細(xì)胞誘導(dǎo)的小鼠PE模型,通過(guò)給PE模型鼠傳輸MSC的方法治療PE。我們的結(jié)果表明,給PE模型鼠傳輸MSC能有效的延緩小鼠PE的發(fā)病,降低血壓,減少蛋白尿并減少胎盤吸收的發(fā)生。此外,傳輸MSC還能保護(hù)PE模型鼠胎鼠的生長(zhǎng)發(fā)育,提高胎盤胎仔重和活胎數(shù)量。對(duì)腎臟和胎盤的組織學(xué)分析也表明傳輸MSC能減弱腎臟和胎盤部位的病理情況。更重要的是,給PE模型鼠傳輸MSC能降低蛻膜和脾臟淋巴細(xì)胞中TNF-α的表達(dá)水平,同時(shí)也能降低IFN-γ和IL-4在脾臟淋巴細(xì)胞中表達(dá)水平。這說(shuō)明MSC可以通過(guò)逆轉(zhuǎn)PE模型鼠蛻膜和脾臟淋巴細(xì)胞中細(xì)胞因子的異常表達(dá)來(lái)保護(hù)妊娠。 我們首次報(bào)道了通過(guò)給PE模型鼠傳輸臍帶MSC能有效的緩解孕鼠的PE癥狀。給PE模型鼠傳輸臍帶MSC能降低PE模型鼠血壓,減少蛋白尿并減少胎盤吸收的發(fā)生,減輕PE引起的腎小球腎炎,保護(hù)胎鼠發(fā)育過(guò)程。并且,我們闡述了MSC可能是通過(guò)反轉(zhuǎn)了TNF-α在蛻膜和脾臟淋巴細(xì)胞中的異常表達(dá)達(dá)到緩解孕鼠的PE癥狀的機(jī)制。同時(shí)MSC能有效的緩解孕鼠的PE癥狀,也從側(cè)面說(shuō)明在PE患者母胎界面,MSC可能發(fā)生了功能異常。提示MSC的改變可能是PE發(fā)病的一個(gè)新的機(jī)制。 3、 miR-181a調(diào)控MSC的機(jī)制 母胎界面的MSC是怎樣發(fā)生變化的呢?microRNAs (miRNAs)的發(fā)現(xiàn)是近年重大的科學(xué)突破之一,改變了我們尋找基因調(diào)節(jié)的方法。microRNAs是一種短(19-25核苷酸)的單鏈非編碼RNA,他通過(guò)和mRNA3'端非翻譯區(qū)結(jié)合調(diào)節(jié)目的基因的表達(dá)水平。miRNAs的高表達(dá)或下調(diào)以及遺傳改變可影響它們與靶基因的結(jié)合,涉及許多疾病的發(fā)病機(jī)制,并涉及發(fā)育、分化、凋亡及腫瘤形成等多種生物學(xué)功能。我們前期研究發(fā)現(xiàn)PE患者胎盤中miR-181a水平表達(dá)升高,提示我們miR-181a可能通過(guò)影響MSC的功能從而影響PE的疾病發(fā)生。miR-181a據(jù)報(bào)道有抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),并調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的功能,但是miR-181a在MSC中的具體功能還未見(jiàn)報(bào)道。 為此,我們研究了miR-181a是否能夠調(diào)控MSC細(xì)胞的生長(zhǎng)并且改變MSC的免疫調(diào)節(jié)功能,同時(shí)miR-181a對(duì)MSC的調(diào)控作用是通過(guò)什么信號(hào)通路介導(dǎo)的。我們發(fā)現(xiàn),在PE患者臍帶和蛻膜來(lái)源的MSC中,miR-181a的表達(dá)水平要高于正常妊娠來(lái)源的MSC。說(shuō)明在PE患者中MSC細(xì)胞可能發(fā)生了改變。我們將分別用于高低表達(dá)miR-181a的片段pre-miRNA181a分子以及anti-miR-181a inhibitor利用Lipofectamine2000轉(zhuǎn)入MSC細(xì)胞,并利用CCK8和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞的增殖情況和細(xì)胞活力。結(jié)果表明,在MSC細(xì)胞中高表達(dá)miR-181a,會(huì)影響MSC細(xì)胞的增殖,但是不會(huì)影響MSC細(xì)胞的凋亡。為了研究miR-181a影響細(xì)胞的增殖的機(jī)制,我們使用計(jì)算機(jī)預(yù)測(cè)miR-181a相關(guān)的靶基因,并發(fā)現(xiàn)miR-181a靶向TGF-β通路蛋白TGFBR1和TGFBRAP1。我們采用QPCR檢測(cè)了高表達(dá)miR-181a的MSC中TGFBR1和TGFBRAP1分子mRNA表達(dá)水平,并采用Westernblot檢測(cè)TGFBR1和TGFBRAP1分子蛋白表達(dá)水平,并構(gòu)建了含有TGFBR1和TGFBRAP13'UTR的luciferase質(zhì)粒驗(yàn)證miR-181a是否與TGFBR1和TGFBRAP1的3’UTR直接結(jié)合。結(jié)果表明,高表達(dá)miR-181a降低了MSC中TGFBR1和TGFBRAP1分子mRNA和蛋白的表達(dá)水平；luciferase熒光報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)也證實(shí)miR-181a直接結(jié)合TGFBR1和TGFBRAP1的3’UTR；此外,高表達(dá)miR-181a的MSC細(xì)胞SMAD2磷酸化水平明顯低于對(duì)照組。說(shuō)明miR-181a是一個(gè)內(nèi)源性的TGF-β通路阻斷劑,miR-181a可通過(guò)TGF-β通路影響MSC細(xì)胞的增殖。 另一方面,MSC的免疫調(diào)節(jié)功能也是MSC的一個(gè)重要功能,將分別用于高低表達(dá)miR-181a的片段pre-miRNA181a分子以及anti-miR-181a inhibitor利用Lipofectamine2000轉(zhuǎn)入MSC細(xì)胞,并利用QPCR檢測(cè)了與MSC的免疫調(diào)節(jié)功能相關(guān)了細(xì)胞因子(IL6, TGFB, IDO, VEGF和COX2)的表達(dá)水平。結(jié)果顯示,高表達(dá)miR-181a明顯上調(diào)IL6和IDO mRNA表達(dá)水平。通過(guò)ELISA和Western blot檢測(cè)也驗(yàn)證了上述的結(jié)果。為了研究miR-181a誘導(dǎo)IL6和IDO高表達(dá)的機(jī)制,我們使用MAPK通路的抑制劑處理高表達(dá)miR-181a的MSC細(xì)胞,結(jié)果表明JNK的抑制劑抑制了miR-181a誘導(dǎo)的IDO表達(dá),而p38的抑制劑抑制了miR-181a誘導(dǎo)的IL6表達(dá)。說(shuō)明miR-181a可能通過(guò)誘導(dǎo)JNK和p38的磷酸化水平誘導(dǎo)IL6和IDO高表達(dá)。我們還檢測(cè)了高表達(dá)miR-181a的MAPK通路的磷酸化水平。結(jié)果顯示,miR-181a在轉(zhuǎn)染MSC細(xì)胞18小時(shí)后上調(diào)了JNK和p38激酶的磷酸化水平。為了研究miR-181a對(duì)MSC細(xì)胞因子分泌水平的影響是否會(huì)影響MSC對(duì)免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)功能,我們將高表達(dá)miR-181a的MSC的細(xì)胞和T細(xì)胞共培養(yǎng),結(jié)果顯示,在短期培養(yǎng)的情況下,高表達(dá)miR-181a的MSC甚至?xí)龠M(jìn)T細(xì)胞的增殖,而不是像正常MSC一樣抑制T細(xì)胞的增殖；并且高表達(dá)miR-181a減弱了MSC抑制T細(xì)胞表達(dá)IFN-y的能力。我們的結(jié)果證明了miR-181a在MSC細(xì)胞中生長(zhǎng)和免疫調(diào)節(jié)功能的雙向調(diào)節(jié)作用。 為了進(jìn)一步驗(yàn)證miR-181a對(duì)MSC功能的影響,我們研究了miR-181a對(duì)MSC傳輸治療的作用。MSC已經(jīng)被用于治療移植物抗宿主病,糖尿病,類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎,自身免疫性腦脊髓炎,系統(tǒng)性紅斑狼瘡,牙周炎,炎癥性腸道疾病和敗血癥等多種動(dòng)物疾病模型,并證實(shí)了其在體內(nèi)免疫抑制和抗炎癥的作用。雖然我們之前的研究表明通過(guò)給PE模型鼠傳輸臍帶MSC能有效的緩解孕鼠的PE癥狀。但是Thl誘導(dǎo)的PE模型有其本身的局限性,雖然該模型具有PE的一些特征,但并不能完全的反應(yīng)人類PE的全部癥狀和病理情況,因此未被廣泛應(yīng)用。 DSS誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎是一個(gè)廣泛使用的研究免疫炎癥狀態(tài)的模型,MSC用于治療DSS誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎模型的報(bào)道已有多篇,是一個(gè)比較成熟的用于研究MSC治療的模型。我們通過(guò)連續(xù)給雄性C57BL/6小鼠口服3%DSS8天,成功誘導(dǎo)了結(jié)腸炎模型。相對(duì)于正常組的小鼠,模型組小鼠有更高的疾病評(píng)分,并伴隨著體重下降,更短更輕的結(jié)腸,以及更高的死亡率。組織學(xué)的研究也表明,模型組小鼠發(fā)生腸壁增生并有局部炎性細(xì)胞浸潤(rùn),伴隨著上皮潰瘍和杯狀細(xì)胞丟失。而傳輸正常的MSC細(xì)胞可以有效的減緩疾病的發(fā)生程度,表現(xiàn)在更低的疾病評(píng)分,穩(wěn)定小鼠體重,抑制結(jié)腸炎癥的發(fā)生。在DSS誘導(dǎo)后第12天可以觀察到更長(zhǎng)更重的結(jié)腸以及更低的死亡率。組織學(xué)的結(jié)果也表明,MSC傳輸可以阻止腸壁增生和局部炎性細(xì)胞浸潤(rùn),恢復(fù)上皮潰瘍和杯狀細(xì)胞。更重要的是,miR-181a會(huì)降低MSC對(duì)DSS誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎的保護(hù)作用。顯示了miR-181a在體內(nèi)降低了MSC的免疫調(diào)節(jié)功能。
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R363

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1 郭振興;鄭翠玲;陳振萍;董文川;楊仁池;;胚胎骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)人Th17細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用的研究[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

2 姜廷帥;蔡莉;惠延年;閆峰;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為角膜上皮細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[A];中國(guó)眼底病論壇·全國(guó)眼底病專題學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2008年

3 張顥;陶艷玲;邱林;張伯龍;馬軍;陳志哲;劉擁軍;韓忠朝;;一種具有免疫負(fù)調(diào)節(jié)功能的人臍帶源間充質(zhì)干細(xì)胞[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

4 張毅;蘇永鋒;霍思維;江小霞;劉元林;吳英;毛寧;;間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)選擇性活化樹(shù)突狀細(xì)胞發(fā)育的調(diào)控[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

5 熊中華;許倩;陸德云;;人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞向肝細(xì)胞分化的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)第九次感染病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

6 王國(guó)蓉;張曉偉;李靜;陳文明;;多發(fā)性骨髓瘤患者間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)T細(xì)胞及樹(shù)突狀細(xì)胞作用的初步研究[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

7 李紅;郭子寬;李秀森;毛寧;;小鼠骨實(shí)質(zhì)來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞功能特性分析[A];第10屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

8 李秀森;李紅;張毅;毛寧;;bFGF對(duì)小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性影響的研究[A];第11次中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文匯編[C];2007年

9 王巧稚;韓藝;趙宏賢;余鴻;劉廣益;;當(dāng)歸誘導(dǎo)人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化和毒性檢測(cè)的研究[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)第十一屆全國(guó)組織學(xué)與胚胎學(xué)青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2009年

10 王玉紅;陳光輝;;地黃低聚糖對(duì)人脂肪組織源性間充質(zhì)干細(xì)胞分泌肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子的影響[A];2010全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合危重病、急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 崔曉偉;投資者需積極管理PE投資[N];上海金融報(bào);2009年

2 本報(bào)記者 徐麗艷;金融危機(jī)下的中國(guó)PE機(jī)會(huì)[N];中國(guó)企業(yè)報(bào);2008年

3 本報(bào)記者 李靜瑕;外資PE爭(zhēng)搶人民幣基金[N];中國(guó)企業(yè)報(bào);2010年

4 本報(bào)記者 徐暢;PE將為下輪增長(zhǎng)提供金融支持[N];中國(guó)證券報(bào);2009年

5 證券時(shí)報(bào)記者 胡學(xué)文;北京外資PE新規(guī)出臺(tái) 外資合伙制破冰[N];證券時(shí)報(bào);2010年

6 潘溈;演講會(huì)見(jiàn)聞：從全民PE到全民創(chuàng)業(yè)[N];21世紀(jì)經(jīng)濟(jì)報(bào)道;2011年

7 證券時(shí)報(bào)記者 躍然;全民PE時(shí)代資金肉搏 四大病灶亟需切除[N];證券時(shí)報(bào);2011年

8 賈敏;山東愛(ài)地超高分子量PE纖維生產(chǎn)線投產(chǎn)[N];中國(guó)紡織報(bào);2009年

9 本報(bào)記者 翁海華;外資PE人民幣基金的上海“窗口”[N];21世紀(jì)經(jīng)濟(jì)報(bào)道;2009年

10 本報(bào)記者 尹先凱;人民幣PE成主流![N];21世紀(jì)經(jīng)濟(jì)報(bào)道;2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 劉柳;miR-181a調(diào)控MSC影響PE發(fā)病機(jī)制的研究[D];南京大學(xué);2012年

2 朱雅姝;Flk-1~+間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的抑制作用及其分子機(jī)制研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

3 孫昭;間充質(zhì)干細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)功能及其機(jī)制的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

4 賴國(guó)政;轉(zhuǎn)染Chk1、Chk2基因人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)腦腫瘤放療抵抗機(jī)制信號(hào)通路途徑的研究[D];華中科技大學(xué);2011年

5 蘇永鋒;間充質(zhì)干細(xì)胞調(diào)控選擇性活化樹(shù)突狀細(xì)胞發(fā)育[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2009年

6 彭飛;620nm非相干紅光對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的光生物調(diào)節(jié)作用[D];華中科技大學(xué);2011年

7 于美嬌;系統(tǒng)歸巢的間充質(zhì)干細(xì)胞在牙周組織修復(fù)再生過(guò)程中的作用研究[D];山東大學(xué);2011年

8 李東杰;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞促進(jìn)創(chuàng)面愈合及體外誘導(dǎo)分化為表皮樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2011年

9 李寶軍;脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)及復(fù)合PLGA體內(nèi)異位成軟骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2007年

10 吳桂珠;脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞治療壓力性尿失禁的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 蔣志瓊;類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者炎性環(huán)境對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞影響的體外實(shí)驗(yàn)研究[D];川北醫(yī)學(xué)院;2010年

2 周長(zhǎng)輝;人臍帶Wharton's Jelly及子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用研究[D];鄭州大學(xué);2010年

3 伍時(shí)縣;間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化和紫杉醇誘導(dǎo)鼻咽癌細(xì)胞凋亡的可視化研究[D];暨南大學(xué);2010年

4 吳昊;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞增強(qiáng)全反式維甲酸對(duì)HL-60細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

5 王靜;間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響及可能機(jī)制的體外研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

6 章守琴;人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞支持造血的體外研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2010年

7 陳芳;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)化療所致卵巢顆粒細(xì)胞損傷的體外實(shí)驗(yàn)[D];暨南大學(xué);2010年

8 張茜真;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、鑒定以及干細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子誘導(dǎo)其重編程的研究[D];浙江理工大學(xué);2010年

9 陳義;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)及體外重建角膜后板層的初步研究[D];暨南大學(xué);2010年

10 馬蘭蘭;不同胎齡人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2010年

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本文編號(hào)：2555162