【摘要】：目的 檢測內毒素血癥小鼠肺組織中miRNAs的表達情況,初步探討miRNAs在內毒素血癥肺損傷中可能的作用。 方法 1.經腹腔注射大腸桿菌內毒素(8mg/kg)制備小鼠急性肺損傷模型,采用高通量miRNA芯片技術初步篩選出內毒素血癥肺組織中差異表達的miRNAs。 2.應用QRT-PCR技術檢測經miRNA芯片初步篩選出的部分差異表達的miRNAs,以驗證其表達是否和芯片結果一致。 3.挑選出QRT-PCR驗證結果與芯片結果一致的miR-1949,研究不同時間及不同劑量LPS處理后RAW264.7細胞中miR-1949的表達情況。 4.應用miRNA靶基因預測軟件miRDB預測miR-1949的靶基因,從中選擇幾個靶基因,然后分別在組織及細胞水平檢測LPS處理后這些靶基因的表達情況。 結果 1.經miRNA芯片檢測發(fā)現,內毒素血癥小鼠肺組織中共有17個miRNAs表達上調,9個miRNAs表達下調。 2.經QRT-PCR驗證,miR-1949、miR-223、miR-150表達與芯片結果一致,其中miR-1949、miR-223表達上調,miR-150表達下調。 3.LPS處理后RAW264.7細胞中miR-1949的表達呈現時間及劑量依賴效應。 4.對預測出的miR-1949的靶基因MAPK8、MAP2K1、SMEK1進行檢測,發(fā)現LPS處理后肺組織及RAW264.7細胞中SMEK1表達降低,MAPK8、MAP2K1沒有明顯改變。 結論 1.miR-1949在LPS處理后的小鼠肺組織及RAW264.7細胞中表達上調； 2.miR-1949可能通過調控SMEK1的表達而在小鼠內毒素血癥肺損傷中發(fā)揮作用。
【學位授予單位】：中南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R363

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