【摘要】：目的：探討肝X受體激動劑T0901317激活肝X受體（LXRs）對缺血再灌注損傷（ischemia reperfusion injury，IRI）臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVECs）的作用及其可能機制。 方法：傳代培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞，建立缺血再灌注模型，實驗分為以下6組：正常對照組，單純?nèi)毖踅M，缺血再灌注組，缺血再灌注加入低、中、高濃度肝X受體激動劑T0901317（0.1、1、10μmol／L）干預組。流式細胞術(shù)（FCM）檢測各組細胞凋亡率；RT-PCR方法檢測各組細胞間黏附分子-1(ICAM-1)、白細胞介素-6（IL-6） mRNA表達；凝膠電泳遷移率分析法（EMSA）檢測各組核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）的活性。 結(jié)果： 1.與對照組比較，單純?nèi)毖�、缺血再灌注組HUVECs的細胞凋亡率升高,ICAM-1,IL-6mRNA的表達增高，NF-κB活性增強，具有統(tǒng)計學意義（P0.05）。 2.與缺血再灌注組比較，缺血再灌注+T09013170.1、1μmol／L組顯著減輕缺血再灌注損傷引起的細胞凋亡率增高，明顯減少炎癥因子ICAM-1,IL-6mRNA的表達，明顯抑制缺血再灌注損傷造成的人臍靜脈內(nèi)皮細胞的NF-κB活化（P0.05)。 3.與缺血再灌注組比較，缺血再灌注+T090131710μmol／L組的細胞凋亡率，ICAM-1、IL-6mRNA表達水平，及NF-κB活性水平均無統(tǒng)計學差異（P0.05)。 結(jié)論： 1.單純?nèi)毖酢⑷毖俟嘧⒄T導人臍靜脈內(nèi)皮細胞損傷。 2.適當劑量的肝X受體激動劑T0901317激活人臍靜脈內(nèi)皮細胞肝X受體，可顯著減輕缺血再灌注損傷導致的人臍靜脈內(nèi)皮細胞凋亡，減輕炎癥因子ICAM-1、IL-6的表達，對缺血再灌注損傷人臍靜脈內(nèi)皮細胞起保護作用。 3.其機制可能與抑制NF-κB轉(zhuǎn)錄活性從而下調(diào)NF-κB通路下游炎癥因子如ICAM-1、IL-6的表達有關，為治療缺血再灌注損傷提供新的思路。
【圖文】：

1.3 統(tǒng)計學處理采用 SPSS17. 0 統(tǒng)計分析軟件處理數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（ x_士 s)）表示,組間比較使用單因素方差分析。P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。2 實驗結(jié)果2.1 光鏡下 HUVECs 的形態(tài)接種 HUVECs 于培養(yǎng)瓶中，，置于倒置相差顯微鏡下觀察，可見細胞約半小時即開始貼壁生長。當細胞融合至 70-90％時，細胞間結(jié)合緊密，可成鋪路石樣鑲嵌排列，細胞呈扁平不規(guī)則多角形或者梭型，包膜完整，折光度良好，胞漿豐富，細胞核為圓形或橢圓形，染色質(zhì)較稀疏，可見 1-2 個核仁（圖 1,a）。當換入缺氧液置入設定好的三氣培養(yǎng)箱缺氧處理后，可見到隨著缺氧時間的延長細胞足收縮，變圓甚至固縮，漂�。▓D 1,b）。

圖 2：流式細胞技術(shù)檢測 HUVECs 凋亡。1 至 6 分別代表：CT 組，AN 組，I/R 組，I/R+T組，I/R+T 1 組，I/R+T 10 組。Fig2. The apoptosis rate of HUVECs was detected by fluorescence flow cytometry .1.CTgroup;2. AN group;3. I/Rgroup;4.I/R +T 0.1 group; 5. I/R +T 1 group;6. I/R+T 10 group.表 2：流式細胞技術(shù)檢測 HUVECs 凋亡率(x_士 s，n=3)Tab2.The apoptosis rate of HUVECs detected by fluorescence flow cytometry(x_士 s，n=與 CT 組比，*P<0.05；與 I/R 組比，#P<0.05，△P>0.05；與 AN 組比，◇P>0.05。Compared with CT group ,*P<0.05 ; compared with I/R group ，#P<0.05， △P>0.05 ; compared witgroup ,◇ P>0.05.2.4 RT-PCR 方法檢測 ICAM-1、IL-6 mRNA 表達組別 CT 組 AN 組 I/R 組 I/R+T 0.1組 I/R+T 1組 I/R+T 10組凋亡率 ( %） 2.54± 0.71# 5.90± 0.83*# 17.99± 2.22* 10.46± 2.75*# 6.64± 0.63*#◇ 16.34± 2.53*△
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R363

【參考文獻】

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1 楊晶;李元建;胡長平;;缺血預適應通過抑制TLR4/NF-_κB信號通路保護大鼠心肌缺血再灌注損傷(英文)[J];中南大學學報(醫(yī)學版);2011年10期

本文編號：2549761