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11天胎齡(E11)大鼠胚胎中腦前體細(xì)胞體外培養(yǎng)特性研究

發(fā)布時間:2019-10-12 14:30
【摘要】:目的:體外培養(yǎng)11天胚齡鼠(E11)的中腦前體細(xì)胞(ventral meseneephalieprecursor,VMP),對其在自我更新、增殖分化等特點(diǎn)進(jìn)行研究。方法:取受孕11天近交系大鼠胚胎的腹側(cè)中腦細(xì)胞,第一天在維持培養(yǎng)液(P1液)中培養(yǎng),第2-7天在增殖培養(yǎng)液(P2液)中培養(yǎng),第8-14天在分化培養(yǎng)液(D液)中培養(yǎng),每天對細(xì)胞進(jìn)行觀察并計(jì)數(shù),,使用免疫熒光細(xì)胞染色法分析前體細(xì)胞分化情況,并對不同胎齡鼠胚來源中腦前體細(xì)胞的細(xì)胞特性進(jìn)行比較。結(jié)果:E11神經(jīng)干細(xì)胞可在體外大量培養(yǎng),第1-5天細(xì)胞生長較慢,5天以后細(xì)胞呈幾何倍增,其在特定細(xì)胞因子的作用下可分裂、復(fù)制及增殖分化,同時表達(dá)新生細(xì)胞特異性抗原nestin等,細(xì)胞群體使用免疫熒光染色顯示除可見VMP外,還可見大量的神經(jīng)元(包括多巴胺能神經(jīng)元)和星形膠質(zhì)細(xì)胞等。與其他胎齡的胚胎來源細(xì)胞相比胚齡11天的最好。結(jié)論:近交系SD大鼠中腦前體細(xì)胞能夠在體外擴(kuò)增并分化,并以胚齡11天的腹側(cè)中腦前體細(xì)胞的增殖分化能力最強(qiáng),可用其得到較多的多巴胺能神經(jīng)元用于神經(jīng)變性疾病的細(xì)胞移植治療,并為將來的在體研究和臨床應(yīng)用提供細(xì)胞層面的理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
【學(xué)位授予單位】:華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R329.2

【參考文獻(xiàn)】

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5 鄭志z

本文編號:2548112


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