本文關鍵詞：牛初乳抗輪狀病毒的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景及目的輪狀病毒(Rotavirus,RV)是球形立體、光滑、無包膜的雙鏈RNA(dsRNA)病毒,屬于呼腸孤病毒科、輪狀病毒屬,根據(jù)VP6分為A-G組,其中A組主要引起嬰幼兒嚴重腹瀉,B、C組主要導致成人腹瀉,D-G組主要感染各種動物。A組輪狀病毒是引起感染性腹瀉的重要病原體之一,占兒童腸道感染病因的50%以上。臨床上主要采取口服補液及抗病毒治療,目前尚無有效的抗輪狀病毒藥物。牛初乳具有促進生長發(fā)育、增強抵抗力、調節(jié)腸道菌群等作用。本研究主要探討牛初乳體內抗輪狀病毒的作用。方法牛初乳抗A組輪狀病毒的實驗研究:5日齡ICR乳鼠隨機分為6組,每組12只。感染輪狀病毒24h后,治療組分別給予相應濃度的牛初乳和利巴韋林連續(xù)進行治療7天。記錄每天乳鼠體重變化及腹瀉情況,同時收集乳鼠糞便并檢測糞便中病毒滴度及使用試紙條金標法檢測糞便中輪狀病毒抗原。于感染后3天、7天取乳鼠血清及小腸組織。流式細胞儀檢測乳鼠血清中IL-6、IL-10、IL-12p70、TNF、IFN-γ和MCP-1的表達水平;分別取1DPI、3DPI、7DPI乳鼠小腸組織,檢測其中的病毒載量;HE染色觀察小腸組織形態(tài)學改變及測定空腸絨毛長度的改變;免疫組化觀察乳鼠小腸中輪狀病毒抗原的分布。結果和結論牛初乳高劑量組和聯(lián)合治療組與模型組相比可以增加腹瀉乳鼠的體重、減輕腹瀉情況;聯(lián)合治療組明顯降低糞便中RV毒力;在急性感染期牛初乳高劑量組降低乳鼠血清中IL-6、IL-10和IFN-γ的表達,減輕炎癥反應,在恢復期牛初乳高劑量組和聯(lián)合治療組IL-10、IFN-γ恢復至正常對照組水平(P0.05);實時熒光定量PCR結果表明,在感染初期病毒載量無明顯變化,在急性感染期及恢復期,治療組可以抑制小腸組織中病毒復制,其中在急性感染期抑制效果較明顯;HE及免疫組化結果表明牛初乳可以抑制小腸組織中輪狀病毒抗原的表達,改善小腸絨毛的空泡樣、充血、水腫及炎性細胞的浸潤等病理損傷。
【關鍵詞】：輪狀病毒 牛初乳 腹瀉 炎癥反應
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R373
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-7
• 英文縮寫詞表7-11
• 第1章 緒論11-19
• 1.1 輪狀病毒概況11-18
• 1.1.1 輪狀病毒的生物學性狀11-13
• 1.1.2 輪狀病毒的復制周期13-14
• 1.1.3 輪狀病毒的致病性14-15
• 1.1.4 輪狀病毒的致病機制15-16
• 1.1.5 輪狀病毒腹瀉的治療16-18
• 1.2 牛初乳的認識18-19
• 第2章 牛初乳抗輪狀病毒的實驗研究19-39
• 2.1 實驗材料19-21
• 2.1.1 藥品19
• 2.1.2 細胞株19
• 2.1.3 病毒株19
• 2.1.4 實驗動物19-20
• 2.1.5 主要儀器設備20
• 2.1.6 主要試劑20-21
• 2.1.7 主要試劑21
• 2.1.8 Real—time PCR引物設計21
• 2.2 實驗方法21-28
• 2.2.1 細胞培養(yǎng)21-22
• 2.2.2 輪狀病毒的擴增22
• 2.2.3 輪狀病毒毒力的測定22
• 2.2.4 實驗分組22-23
• 2.2.5 乳鼠腹瀉模型的建立及治療23
• 2.2.6 觀察指標23
• 2.2.7 乳鼠糞便抗原的檢測23-24
• 2.2.8 乳鼠糞便病毒滴度的檢測24
• 2.2.9 乳鼠血清中IL-6、IL-10、IL-12p70、TNF、IFN-γ、MCP-1因子的檢測24-25
• 2.2.10 Real-Time PCR檢測乳鼠小腸病毒量25-27
• 2.2.11 形態(tài)學觀察27-28
• 2.3 結果28-39
• 2.3.1 病毒致細胞病變情況28
• 2.3.2 輪狀病毒滴度的測定28
• 2.3.3 觀察指標28-32
• 2.3.4 乳鼠糞便抗原檢測32
• 2.3.5 乳鼠糞便病毒毒力的檢測32
• 2.3.6 乳鼠血清中IL-12p70、MCP-1、TNF、IL-6、IL-10和IFN-γ的檢測32-35
• 2.3.7 Real-Time PCR檢測乳鼠小腸中病毒RNA載量35-36
• 2.3.8 病理組織的改變及小腸絨毛高度的測量36-38
• 2.3.9 免疫組織化學檢測38-39
• 第3章 討論39-43
• 第4章 結論43-44
• 參考文獻44-53
• 作者簡介53-54
• 致謝54

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 徐金蘭;;抗病毒中藥的研究及臨床療效優(yōu)勢[J];臨床合理用藥雜志;2010年06期

2 夏群;陳蘭舉;周瑞;陳名武;丁周志;;輪狀病毒致乳鼠腸道外感染Th1/Th2細胞因子變化的研究[J];中國微生態(tài)學雜志;2009年10期

3 陳軍華;解元元;凌華;劉作義;;輪狀病毒感染乳鼠致病機制的實驗研究[J];第三軍醫(yī)大學學報;2007年12期

4 李忠秋;郭鎮(zhèn)華;吳賽輝;馬紅;劉娣;;牛初乳中生長因子及抗菌因子的生物活性及其功能研究進展[J];中國奶牛;2006年08期

5 邵文愛;張麗媛;李康生;;抗病毒藥物篩選中兩種方法的比較[J];汕頭大學醫(yī)學院學報;2006年01期

6 楊波,伍參榮,唐小梅,胡建中,趙武能;七味白術散對人輪狀病毒感染乳鼠血清IFN-γ、TNF-α的影響[J];中國中醫(yī)藥信息雜志;2005年03期

7 王培養(yǎng);干擾素治療重型嬰幼兒輪狀病毒腸炎療效觀察[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志;2003年08期

8 劉大功;治療腹瀉良藥胃腸安丸[J];開卷有益(求醫(yī)問藥);2002年07期

9 董麗娟,申芳娥;嬰幼兒輪狀病毒腸炎的腸外病變[J];北京醫(yī)學;2002年03期

10 紀紹忠,畢燁,楊紅彥,楊鳳蓉,宋俊其,陶小霞,崔曉英;引起成人腹瀉的新輪狀病毒在原代人胚腎細胞上的培養(yǎng)和傳代[J];中華醫(yī)學雜志;2002年01期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 葉綺娜;七味白術散治療小兒輪狀病毒腸炎的腸道宏基因學相關研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2014年

  本文關鍵詞：牛初乳抗輪狀病毒的實驗研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：254503