本文關(guān)鍵詞：牛初乳抗輪狀病毒的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景及目的輪狀病毒(Rotavirus,RV)是球形立體、光滑、無包膜的雙鏈RNA(dsRNA)病毒,屬于呼腸孤病毒科、輪狀病毒屬,根據(jù)VP6分為A-G組,其中A組主要引起嬰幼兒嚴(yán)重腹瀉,B、C組主要導(dǎo)致成人腹瀉,D-G組主要感染各種動(dòng)物。A組輪狀病毒是引起感染性腹瀉的重要病原體之一,占兒童腸道感染病因的50%以上。臨床上主要采取口服補(bǔ)液及抗病毒治療,目前尚無有效的抗輪狀病毒藥物。牛初乳具有促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育、增強(qiáng)抵抗力、調(diào)節(jié)腸道菌群等作用。本研究主要探討牛初乳體內(nèi)抗輪狀病毒的作用。方法牛初乳抗A組輪狀病毒的實(shí)驗(yàn)研究:5日齡ICR乳鼠隨機(jī)分為6組,每組12只。感染輪狀病毒24h后,治療組分別給予相應(yīng)濃度的牛初乳和利巴韋林連續(xù)進(jìn)行治療7天。記錄每天乳鼠體重變化及腹瀉情況,同時(shí)收集乳鼠糞便并檢測(cè)糞便中病毒滴度及使用試紙條金標(biāo)法檢測(cè)糞便中輪狀病毒抗原。于感染后3天、7天取乳鼠血清及小腸組織。流式細(xì)胞儀檢測(cè)乳鼠血清中IL-6、IL-10、IL-12p70、TNF、IFN-γ和MCP-1的表達(dá)水平;分別取1DPI、3DPI、7DPI乳鼠小腸組織,檢測(cè)其中的病毒載量;HE染色觀察小腸組織形態(tài)學(xué)改變及測(cè)定空腸絨毛長(zhǎng)度的改變;免疫組化觀察乳鼠小腸中輪狀病毒抗原的分布。結(jié)果和結(jié)論牛初乳高劑量組和聯(lián)合治療組與模型組相比可以增加腹瀉乳鼠的體重、減輕腹瀉情況;聯(lián)合治療組明顯降低糞便中RV毒力;在急性感染期牛初乳高劑量組降低乳鼠血清中IL-6、IL-10和IFN-γ的表達(dá),減輕炎癥反應(yīng),在恢復(fù)期牛初乳高劑量組和聯(lián)合治療組IL-10、IFN-γ恢復(fù)至正常對(duì)照組水平(P0.05);實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果表明,在感染初期病毒載量無明顯變化,在急性感染期及恢復(fù)期,治療組可以抑制小腸組織中病毒復(fù)制,其中在急性感染期抑制效果較明顯;HE及免疫組化結(jié)果表明牛初乳可以抑制小腸組織中輪狀病毒抗原的表達(dá),改善小腸絨毛的空泡樣、充血、水腫及炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)等病理?yè)p傷。
【關(guān)鍵詞】：輪狀病毒 牛初乳 腹瀉 炎癥反應(yīng)
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R373
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-7
• 英文縮寫詞表7-11
• 第1章 緒論11-19
• 1.1 輪狀病毒概況11-18
• 1.1.1 輪狀病毒的生物學(xué)性狀11-13
• 1.1.2 輪狀病毒的復(fù)制周期13-14
• 1.1.3 輪狀病毒的致病性14-15
• 1.1.4 輪狀病毒的致病機(jī)制15-16
• 1.1.5 輪狀病毒腹瀉的治療16-18
• 1.2 牛初乳的認(rèn)識(shí)18-19
• 第2章 牛初乳抗輪狀病毒的實(shí)驗(yàn)研究19-39
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料19-21
• 2.1.1 藥品19
• 2.1.2 細(xì)胞株19
• 2.1.3 病毒株19
• 2.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物19-20
• 2.1.5 主要儀器設(shè)備20
• 2.1.6 主要試劑20-21
• 2.1.7 主要試劑21
• 2.1.8 Real—time PCR引物設(shè)計(jì)21
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法21-28
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)21-22
• 2.2.2 輪狀病毒的擴(kuò)增22
• 2.2.3 輪狀病毒毒力的測(cè)定22
• 2.2.4 實(shí)驗(yàn)分組22-23
• 2.2.5 乳鼠腹瀉模型的建立及治療23
• 2.2.6 觀察指標(biāo)23
• 2.2.7 乳鼠糞便抗原的檢測(cè)23-24
• 2.2.8 乳鼠糞便病毒滴度的檢測(cè)24
• 2.2.9 乳鼠血清中IL-6、IL-10、IL-12p70、TNF、IFN-γ、MCP-1因子的檢測(cè)24-25
• 2.2.10 Real-Time PCR檢測(cè)乳鼠小腸病毒量25-27
• 2.2.11 形態(tài)學(xué)觀察27-28
• 2.3 結(jié)果28-39
• 2.3.1 病毒致細(xì)胞病變情況28
• 2.3.2 輪狀病毒滴度的測(cè)定28
• 2.3.3 觀察指標(biāo)28-32
• 2.3.4 乳鼠糞便抗原檢測(cè)32
• 2.3.5 乳鼠糞便病毒毒力的檢測(cè)32
• 2.3.6 乳鼠血清中IL-12p70、MCP-1、TNF、IL-6、IL-10和IFN-γ的檢測(cè)32-35
• 2.3.7 Real-Time PCR檢測(cè)乳鼠小腸中病毒RNA載量35-36
• 2.3.8 病理組織的改變及小腸絨毛高度的測(cè)量36-38
• 2.3.9 免疫組織化學(xué)檢測(cè)38-39
• 第3章 討論39-43
• 第4章 結(jié)論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-53
• 作者簡(jiǎn)介53-54
• 致謝54

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：牛初乳抗輪狀病毒的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：254503