發(fā)布時間：2019-09-06 17:17

【摘要】：目的:研究信號素(Semaphrins)家族中Sema3A分子對小鼠骨髓來源的成熟和非成熟樹突狀細(xì)胞(DC,dendritic cell)表面分子B7-H3表達(dá)的影響。 方法:體外培養(yǎng)小鼠骨髓來源的成熟和非成熟DC并通過流式細(xì)胞術(shù)篩選DC。在第8天采用流式細(xì)胞直接免疫熒光標(biāo)記法對所得細(xì)胞進(jìn)行分選并檢測CD11C、CD40、CD80、CD86、B7-H3的表達(dá)情況對DC細(xì)胞進(jìn)行鑒定。把培養(yǎng)的成熟和非成熟DC分別分為空白對照組和干預(yù)組,干預(yù)組經(jīng)不同濃度Sema-3A-Ab(1:500,1:1000,1:2000)干預(yù)72小時后,流式細(xì)胞儀分析干預(yù)后DC細(xì)胞表面共刺激分子B7-H3的表達(dá)并進(jìn)行比較。 結(jié)果:用流式細(xì)胞儀檢測所收集的細(xì)胞,CD11c+細(xì)胞達(dá)82.18%,第8天成熟DC空白對照組細(xì)胞上共刺激分子B7-H3陽性率為(7.22±0.44)%,第11天為(19.68±0.66)%,呈升高趨勢。Sema-3A-Ab可抑制成熟DC細(xì)胞表面共刺激分子B7-H3的表達(dá),干預(yù)組(10.15±0.91)%,對照組(19.68±0.66)%(p0.05)。Sema-3A-Ab對非成熟DC上細(xì)胞表面共刺激分子B7-H3的表達(dá)的影響不明顯。 結(jié)論:隨著時間的延長(第8天到第11天),B7-H3在成熟DC細(xì)胞表面的表達(dá)呈上升趨勢。Sema-3A-Ab作用于成熟DC細(xì)胞引起其B7-H3表達(dá)下調(diào),Sema3A能促進(jìn)成熟DC表達(dá)B7-H3。Sema-3A-Ab的各濃度在其干預(yù)組之間無明顯差異。
【圖文】：

2、實驗結(jié)果2.1 DC 細(xì)胞的鑒定CD11c 在 DC 細(xì)胞上特異性表達(dá)，所以 CD11c+的細(xì)胞即為 DC。用流式檢測所收集的細(xì)胞，CD11c+細(xì)胞達(dá) 82.18%。（見圖 1）應(yīng)用熒光抗體標(biāo)記流式細(xì)胞儀對兩組 DC 表面標(biāo)志物進(jìn)行檢測，mDC 表達(dá)粘附分子 CD40 和協(xié)激分子 CD80、CD86、B7-H3，分別為（13.92±0.27）％、（22.30±0.29）％±0.38）％、（7.22±0.44）％；imDC 分別為（9.95±0.19）％、（15.69％、（5.49±0.41）％、（4.71±0.58）％。（見圖 2）

2.2 B7-H3 在小鼠 DC 上的表達(dá)采用流式細(xì)胞直接免疫熒光標(biāo)記法，，用流式細(xì)胞儀對 2 組小鼠髓源性 DC 表面標(biāo)志物 B7-H3 進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示：mDC 空白對照及各濃度干預(yù)組表達(dá) B7-H3分別為：（19.68±0.66）％、（10.15±0.91）％、（10.26±0.60）％、（9.91±0.31）％（見圖 3 和表 1）；imDC 空白對照及各濃度干預(yù)組表達(dá) B7-H3 分別為：（12.92±0.77）％、（9.83±0.54）％、（10.75±0.89）％、（6.50±0.40）％（見圖 3 和表 2）。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R392

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：2532752