【摘要】：目的利用非整合質(zhì)粒載體在體外將成人外周血中單個核細(xì)胞重編程為少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(oligodendrocyte progenitor cells,OPCs)。方法經(jīng)外周靜脈采集志愿者血液5 m L,利用Ficoll-Paquem密度梯度離心法獲得單個核細(xì)胞,體外擴(kuò)增培養(yǎng)后,電轉(zhuǎn)染攜帶外源基因(OCT4,SOX2,KLF4,C-myc,LIN28,Nanog)的質(zhì)粒,然后在加有化學(xué)小分子的特定培養(yǎng)基中分三步培養(yǎng)。結(jié)果轉(zhuǎn)染后30 d左右,可以獲得血小板衍生生長因子受體α(platelet-derived growth factor receptor-α,PDGFR-α)陽性的早期少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(Pre-OPC),該細(xì)胞能傳20代以上,繼續(xù)分化30 d左右可以獲得表達(dá)O4的少突膠質(zhì)前體細(xì)胞。結(jié)論利用非整合質(zhì)粒載體攜帶外源基因可以將成人外周血單個核細(xì)胞在較短期時間內(nèi)重編程為具有增生能力的早期少突膠質(zhì)前體細(xì)胞,且能繼續(xù)分化為少突膠質(zhì)前體細(xì)胞。
[Abstract]:Objective to reprogram adult peripheral blood mononuclear cells into oligodendrocytes (oligodendrocyte progenitor cells,OPCs) by non-integrated plasmid vector in vitro. Methods the blood of volunteers was collected 5 mL by peripheral vein. Mononuclear cells were obtained by Ficoll-Paquem density gradient centrifugation. After amplification and culture in vitro, the plasmid carrying foreign gene (OCT4,SOX2,KLF4,C-myc,LIN28,Nanog) was electrotransferred, and then cultured in three steps in a specific medium with small chemical molecules. Results early oligodendrocytes (Pre-OPC) with positive platelet-derived growth factor receptor 偽 (platelet-derived growth factor receptor- 偽, PDGFR- 偽) could be obtained about 30 days after transfection. The cells could propagate for more than 20 generations, and oligodendrocytes expressing O4 could be obtained by further differentiation for about 30 days. Conclusion Adult peripheral blood mononuclear cells can be reprogrammed into early oligodendrocytes with proliferation ability in a short period of time by carrying foreign genes by non-integrated plasmid vector, and can continue to differentiate into oligodendrocytes.
【作者單位】： 中國康復(fù)醫(yī)學(xué)研究所;首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院細(xì)胞治療室;北京腦重大疾病研究院神經(jīng)損傷和修復(fù)所;北京神經(jīng)損傷和康復(fù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81661130160) 北京市科委計劃項目(Z151100001615055)~~
【分類號】：R329.2

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本文編號：2521004