中和抗體阻斷FcγR Ⅰ降低脂多糖誘導(dǎo)的大鼠PC12細(xì)胞凋亡
發(fā)布時間:2019-07-23 12:41
【摘要】:目的探討IgG Fc受體Ⅰ(FcγRⅠ)在脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤PC12細(xì)胞凋亡中的作用。方法將PC12細(xì)胞接種于培養(yǎng)板中,用(50、125、250、500、1000)μg/mL LPS處理24 h,噻唑藍(lán)(MTT)比色法檢測細(xì)胞存活率,選取合適的LPS劑量。待細(xì)胞處于對數(shù)生長期,采用隨機(jī)數(shù)字表法分為空白對照組:不進(jìn)行任何處理,繼續(xù)培養(yǎng)24 h;LPS組:培養(yǎng)液中加入500μg/mL LPS,孵育24 h;LPS聯(lián)合FcγRⅠ中和抗體組:培養(yǎng)液中加入500μg/mL LPS和0.2μg/mL FcγRⅠ中和抗體,孵育24 h。處理結(jié)束后,實(shí)時熒光定量PCR和Western blot法檢測各組FcγRⅠmRNA和蛋白含量,異硫氰酸熒光素標(biāo)記的膜聯(lián)素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)染色結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡,采用免疫組織化學(xué)染色法檢測各組細(xì)胞caspase-3、Bcl-2和BAX的蛋白水平。結(jié)果隨著LPS劑量的增加,PC12細(xì)胞的活力逐漸下降;與對照組相比,LPS處理組FcγRⅠmRNA和蛋白水平增加,caspase-3、Bcl-2和BAX蛋白水平增加,細(xì)胞凋亡率增加;與LPS組相比,LPS聯(lián)合FcγRⅠ中和抗體組FcγRⅠmRNA和蛋白水平降低,caspase-3、BAX蛋白水平顯著降低,細(xì)胞凋亡率降低,Bcl-2蛋白水平增加。結(jié)論FcγRⅠ參與LPS誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the role of IgG Fc receptor 鈪,
本文編號:2518158
[Abstract]:Objective to investigate the role of IgG Fc receptor 鈪,
本文編號:2518158
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