【摘要】：目的初步研究單純皰疹病毒2型(HSV-2)DNA疫苗pc(pc DNA3.1-)-P6-g BCTL-TBK-1在小鼠體內(nèi)的分布及安全性。方法將前期構(gòu)建的HSV-2 DNA質(zhì)粒pc-P6-g BCTL-TBK-1肌內(nèi)注射免疫接種BALB/c小鼠,每只100μg,分別于第0、2、4周免疫接種3次,于末次免疫后的第24小時(shí)及7、21、35、49 d采集小鼠的心、肝、脾、腎、肺、腦、血液和注射部位的肌肉組織,提取各組織DNA,采用PCR法檢測(cè)質(zhì)粒DNA在小鼠體內(nèi)的分布情況及其與宿主基因組發(fā)生整合的可能性。結(jié)果末次免疫后24 h及7、21、35 d,在小鼠的心、肝、脾、腎、肺、腦、血液和注射部位的肌肉組織中均可檢測(cè)到質(zhì)粒,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),在末次免疫后第49天,僅在小鼠注射部位的肌肉組織中能檢測(cè)到質(zhì)粒。純化后的基因組DNA經(jīng)PCR擴(kuò)增后均為陰性。結(jié)論質(zhì)粒pc-P6-g BCTL-TBK-1經(jīng)肌內(nèi)注射免疫小鼠后,質(zhì)粒DNA可快速地分布到小鼠的心、肝、脾、腎、肺、腦、血液和肌肉組織中;隨著時(shí)間的延長(zhǎng),質(zhì)粒DNA僅分布于接種的肌肉部位,且該DNA疫苗未與宿主的基因組整合,具有一定的安全性。
[Abstract]:Objective to study the distribution and safety of herpes simplex virus type 2 (HSV-2) DNA vaccine pc (pc DNA3.1- P6 g BCTL-TBK-1 in mice. Methods BALB/c mice were immunized with HSV-2 DNA plasmid pc-P6-g BCTL-TBK-1 intramuscular at 100 渭 g each for 3 times in 0, 2 and 4 weeks, respectively. The muscle tissues of heart, liver, spleen, kidney, lung, brain, blood and injection site were collected at 24 hours and 7, 21, 35 and 49 days after the last immunization, and DNA, was extracted from each tissue. The distribution of plasmid DNA in mice and the possibility of integration with host genome were detected by PCR. Results plasmid was detected in heart, liver, spleen, kidney, lung, brain, blood and muscle tissue of mice 24 h and 7 h, 21 d, 35 d after the last immunization. With the prolongation of time, on the 49th day after the last immunization, the plasmid could be detected in the muscle tissue of the mouse heart, liver, spleen, kidney, lung, brain, blood and injection site. The plasmid could be detected only in the muscle tissue of the injection site of mice. The purified genomic DNA was negative after PCR amplification. Conclusion after intramuscular injection of plasmid pc-P6-g BCTL-TBK-1 into mice, plasmid DNA can be rapidly distributed in heart, liver, spleen, kidney, lung, brain, blood and muscle tissue of mice. With the prolongation of time, plasmid DNA was only distributed in the inoculated muscle, and the DNA vaccine was not integrated with the host genome, so it was safe to some extent.
【作者單位】： 泰山醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院臨床微生物學(xué)教研室;泰安市婦幼保健院新生兒科;
【基金】：山東省自然科學(xué)基金(ZR2013HL057,ZR2013HM033)
【分類號(hào)】：R392

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本文編號(hào)：2478361