【摘要】：目的在新西蘭白兔第4腰椎上終板鉆孔、種植人型結(jié)核桿菌H37Rv標(biāo)準(zhǔn)菌株，構(gòu)建新西蘭兔脊柱結(jié)核模型，為脊柱結(jié)核的臨床與基礎(chǔ)研究提供動(dòng)物模型；并通過(guò)影像學(xué)、病理學(xué)、細(xì)菌學(xué)來(lái)評(píng)價(jià)，探討提供新西蘭兔脊柱結(jié)核模型成功率的相關(guān)方法。 方法42只新西蘭兔分為三組，實(shí)驗(yàn)組20只，對(duì)照組20只，空白組2只。弗氏完全佐劑注射至新西蘭兔頸根部背側(cè)皮內(nèi)，1個(gè)月后在已致敏的新西蘭兔的腰4椎體上方近椎間盤(pán)處鉆孔，以明膠海綿填充，實(shí)驗(yàn)組內(nèi)注入濃度為5mg/ml的結(jié)核桿菌混懸液0.1ml（菌量為1×10~7CFU/ml）；對(duì)照組內(nèi)注入液體培養(yǎng)基與生理鹽水混合液0.1ml�？瞻捉M不做任何處理。術(shù)后觀察實(shí)驗(yàn)兔一般情況，并于術(shù)后4w、8w通過(guò)影像學(xué)、組織病理學(xué)、細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)等方法評(píng)價(jià)來(lái)證實(shí)新西蘭兔脊柱結(jié)核模型成功率。 結(jié)果術(shù)中除實(shí)驗(yàn)組內(nèi)1只實(shí)驗(yàn)兔因麻醉時(shí)空氣栓塞致死外，其余37只實(shí)驗(yàn)兔手術(shù)順利。實(shí)驗(yàn)組內(nèi)4只出現(xiàn)消瘦、納差等癥狀；1只實(shí)驗(yàn)兔于1個(gè)月后進(jìn)食不佳，五天后死亡；1只實(shí)驗(yàn)兔于術(shù)后49天死亡，解剖發(fā)現(xiàn)胸腔內(nèi)有大量膿液，肺臟表面彌散大小不等結(jié)節(jié)。其余實(shí)驗(yàn)兔活動(dòng)好，精神及進(jìn)食好，術(shù)后2月15只實(shí)驗(yàn)兔存活，存活率為88.2%(15/17)。對(duì)照組內(nèi)20只實(shí)驗(yàn)兔有1只術(shù)后麻醉未恢復(fù)當(dāng)日死亡。1只兔術(shù)后進(jìn)食、飲水不佳于術(shù)后第13天死亡。其余18只兔術(shù)后平穩(wěn)，進(jìn)食良好，體重?zé)o明顯變化。術(shù)后2月18只實(shí)驗(yàn)兔存活，存活率為94.7%(18/19)�？瞻捉M內(nèi)實(shí)驗(yàn)兔活動(dòng)好，精神及進(jìn)食好，2月2只實(shí)驗(yàn)兔存活，存活率為100%(2/2)。 實(shí)驗(yàn)組內(nèi)實(shí)驗(yàn)兔在腰椎感染H37Rv標(biāo)準(zhǔn)結(jié)核桿菌后，兔椎體骨破壞于術(shù)后4w即被發(fā)現(xiàn)。術(shù)后4w X線觀察陽(yáng)性兔8只（8/17），8w陽(yáng)性兔10只（10/15）。術(shù)后4w重建CT觀察陽(yáng)性兔15只（15/17），8w陽(yáng)性兔為15只（15/15）。術(shù)后4wMRI觀察陽(yáng)性兔為13只（13/17），，8w陽(yáng)性兔15只（15/15）。對(duì)照組內(nèi)所有實(shí)驗(yàn)兔術(shù)后8w內(nèi)未發(fā)現(xiàn)椎體骨破壞。術(shù)后8w在麻醉下解剖實(shí)驗(yàn)組內(nèi)實(shí)驗(yàn)兔，見(jiàn)所有實(shí)驗(yàn)兔傷口愈合良好，無(wú)皮膚竇道形成。12只實(shí)驗(yàn)兔腰大肌無(wú)膿腫，剝離椎前肌與椎體粘連后，未見(jiàn)椎體上端孔洞，可見(jiàn)椎間盤(pán)前方纖維環(huán)顏色發(fā)暗、凹陷，椎體骨質(zhì)改變，椎間隙略變窄（正常椎間盤(pán)纖維環(huán)為瓷白色，膨隆感）。其中3只腰大肌有0.5cm～1.0cm膿腫，為黃白色，膿腫內(nèi)有砂礫樣感。椎旁軟組織有肉芽組織生成。見(jiàn)2只實(shí)驗(yàn)兔L3-4椎間盤(pán)與上下終板粗大，凸向前方，明顯骨質(zhì)破壞。取病變椎體、肉芽組織和膿腫行病理檢查，HE染色發(fā)現(xiàn)有死骨、大量炎癥反應(yīng)，淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)、類(lèi)上皮樣細(xì)胞或壞死灶等形成，但無(wú)多核巨細(xì)胞反應(yīng)和典型的結(jié)核結(jié)節(jié)形成。實(shí)驗(yàn)組內(nèi)兔椎旁肉芽組織勻漿后通過(guò)自制羅氏培養(yǎng)基培養(yǎng)，6w內(nèi)有73.3％結(jié)核分枝桿菌生長(zhǎng)。通過(guò)影像學(xué)、大體觀察、病理學(xué)和細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)，綜合評(píng)價(jià)新西蘭兔脊柱結(jié)核模型成功率為88.2％（15/17）。 結(jié)論新西蘭兔經(jīng)過(guò)弗氏完全佐劑致敏，在兔脊柱椎體局部種植適當(dāng)劑量的H37Rv結(jié)核標(biāo)準(zhǔn)菌株，通過(guò)影像學(xué)、組織病理、細(xì)菌學(xué)等檢查證實(shí)，能夠構(gòu)建出與人類(lèi)脊柱結(jié)核的病理變化相似的兔脊柱結(jié)核模型，為脊柱結(jié)核臨床和基礎(chǔ)研究提供理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。
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【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類(lèi)號(hào)】：R529.2;R-332

【參考文獻(xiàn)】

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1 楊偉宇;王自立;喬永東;丁惠強(qiáng);趙浩寧;戈朝暉;;脊柱結(jié)核病灶部分切除術(shù)的切除范圍[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年08期

2 司建煒;王自立;;PCR-DNA序列測(cè)定法檢測(cè)脊柱結(jié)核分枝桿菌耐藥基因的研究[J];寧夏醫(yī)學(xué)雜志;2010年09期

3 李定越,盧潤(rùn)生,蔣紹雙,鄭德福;結(jié)核病實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型[J];四川醫(yī)學(xué);2003年07期

本文編號(hào)：2455400