【摘要】：目的：探討利用Ⅶ型膠原酶制作大鼠腦出血模型，使之成為一種穩(wěn)定有效，可重復(fù)的腦出血模型方法。 方法：雄性SD大鼠48只隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，將等體積Ⅶ型膠原酶和無(wú)菌生理鹽水分別注入實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組大鼠尾殼核。通過(guò)觀察兩組大鼠在第1、3和7天不同時(shí)間點(diǎn)的神經(jīng)功能缺損變化，最后處死后腦部尾殼核形成的血腫體積大小以及腦組織化學(xué)改變。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組大鼠都有神經(jīng)功能缺損明顯，尾殼核有明顯出血灶，而對(duì)照組神經(jīng)體征不明顯，尾殼核未見明顯出血，兩組相比較具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）。同樣，切片HE染色中可見穿刺道大量紅細(xì)胞存在，血腫周圍細(xì)胞水腫明顯。而對(duì)照組僅見穿刺針道有少許血細(xì)胞存在。 結(jié)論：Ⅶ型膠原酶制作大鼠腦出血模型是一種成功的穩(wěn)定的可重復(fù)的方法。 目的：探討外源性NGF對(duì)大鼠腦出血的作用機(jī)制。 方法：將SD大鼠隨機(jī)分成三組，即假手術(shù)組、對(duì)照組和NGF組。對(duì)照組和NGF組均按第一部分造模方法所述以Ⅶ型膠原酶制備腦出血模型，假手術(shù)組只將給予頭皮切開，不做任何處理便縫合皮膚。NGF組是經(jīng)孔給予2μl混有300uNGF的生理鹽水緩慢注入，對(duì)照組則給予2μl無(wú)菌生理鹽水，，假手術(shù)組不給予NGF或無(wú)菌生理鹽水。術(shù)畢觀察三組大鼠神經(jīng)功能缺損變化，按第1、3和7天三個(gè)時(shí)間點(diǎn)處死大鼠，處死前給予BrdU抗體按50mg/kg行腹腔注射，4%多聚甲醛前固定鼠腦，取出腦組織后再以4%多聚甲醛后固定，20%和30%蔗糖液脫水，錫紙包裹后凍存于-80℃冰箱中。再做10μm厚的冰凍切片，將冰凍切片行免疫組化檢測(cè)，在光學(xué)顯微鏡下計(jì)數(shù)新生神經(jīng)元細(xì)胞（Nestin抗體標(biāo)記）數(shù)目、新生血管數(shù)目（VEGF抗體標(biāo)記）以及含BrdU的增殖神經(jīng)元的數(shù)目，最后將各組數(shù)據(jù)性統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果：假手術(shù)組神經(jīng)功能缺損評(píng)分前后均為0分；對(duì)照組造模后有明顯神經(jīng)功能缺損，但后期神經(jīng)功能恢復(fù)緩慢；NGF組在給予NGF后神經(jīng)功能缺損評(píng)分有改善，第7天時(shí)間點(diǎn)改善最明顯，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有意義（P＜0.05）。將實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組及假手術(shù)組比較，經(jīng)免疫組化染色檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)組Nestin抗體標(biāo)記和VEGF抗體標(biāo)記陽(yáng)性細(xì)胞均增多，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 結(jié)論：通過(guò)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明外源性NGF能激活腦出血模型大鼠的內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞（NSCs），并促進(jìn)其增殖分化為神經(jīng)神經(jīng)細(xì)胞。同時(shí)能促進(jìn)顱內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞分泌VEGF，而免疫組化檢測(cè)進(jìn)一步說(shuō)明NGF從細(xì)胞水平促進(jìn)了腦出血大鼠的神經(jīng)功能的恢復(fù)。
[Abstract]:Objective: to explore a stable, effective and repeatable method for making intracerebral hemorrhage model in rats using collagenase 鈪

本文編號(hào)：2425071