【摘要】：目的改進(jìn)體外SD大鼠Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞(alveolar epithelial typeⅠ,ATⅠ)的原代培養(yǎng)方法,用更為簡(jiǎn)單的培養(yǎng)方法獲得較高純度的ATⅠ。方法選用新生1d的SD大鼠,消毒后待新生大鼠呼吸停止后斷頭取肺,采用膠原酶Ⅰ和DNaseⅠ消化分離法獲取原代細(xì)胞,將細(xì)胞接種在Ⅰ型鼠尾膠原蛋白包被過(guò)的細(xì)胞板中,利用差速貼壁法純化ATⅠ,同時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)48h后進(jìn)行換液,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),用細(xì)胞水通道蛋白5(AQP5)、肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白(SPC)、植物凝集素(BSI)、波形蛋白(Vimentin)4種肺細(xì)胞的特異性表達(dá)產(chǎn)物鑒定細(xì)胞。結(jié)果接種2d時(shí),細(xì)胞開(kāi)始貼壁生長(zhǎng)。4~6d時(shí)細(xì)胞開(kāi)始增殖,呈現(xiàn)梭形、立方形、多角形等多種形態(tài)。8d時(shí)細(xì)胞增殖能力達(dá)到最大,細(xì)胞活力為(87±8)%,細(xì)胞純度為(87±5)%。結(jié)論對(duì)組織取材、分離和培養(yǎng)進(jìn)行改進(jìn)可獲得產(chǎn)量高、生長(zhǎng)狀態(tài)好、純度高的ATⅠ。
[Abstract]:Objective to improve the primary culture method of SD rat type 鈪，

本文編號(hào)：2327150